Анализ иммуно

Другим перспективным направлением в разработке амперометрических биосенсоров является создание устройств, основанных на иммунологических реакциях. Принцип иммунного анализа заключается во взаимодействии исследуемого вещества, называемого антигеном (АГ), со специфически связывающимся с ним антителом (АТ) с образованием комплекса АГ -АТ. При фиксированной концентрации антитела (антигена) равновесное отношение концентраций связанного и свободного антигена (антитела) зависит от его общей концентрации. Таким образом, неизвестную концентрацию антигена (антитела) можно определить при помощи фиксированного количества меченых антител (антигенов). Для этого антиген или антитело метят ферментами. Разработанные к настоящему времени иммуноферментные амперометрические датчики можно классифицировать следующим образом [c.506]

Рис. 7.8-3. Типы иммуносенсоров, а — Moдифициpoвaiшaя антителами поверхность преобразователя б — конкурентный иммунный анализ, [ ] ос l/[Ag] в — сандвичевый иммунный анализ, [ ] ос [Ag] г—гомогенный иммунный анализ, [ ] ос l/[Ag].

Конкурентный иммунный анализ включает конкуренцию между определяемым веществом пробы и меченым определяемым веществом за ограниченное число активных центров. [c.569]

ИММУННЫЙ АНАЛИЗ Цели изучения [c.565]

Количество 6-МАМ выше в тканях с меньшей гидролитической активностью (мозг, селезёнка, СМЖ), чем в тканях с высокой гидролитической активностью (печень, легкие, почки). Содержание 6-МАМ в стекловидном теле в 41 образце да 223 положительных по иммунному анализу от 10 до 125 нг/мл 31]. Помимо 5-МАМ, в стекловидном теле определены кодеин и морфин в различных соотношениях. [c.32]

Внешний иммунный анализ с меткой [c.551]

Понять различные варианты иммунного анализа. [c.565]

VII. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ИММУННОГО ОТВЕТА [c.498]

Врач. Ну, во-первых, потому, что сахарный диабет тесно связан с нарушением регуляции содержания глюкозы в крови. Может быть наш анализ в беседе 3 поможет лучше понять это поистине страшное заболевание, которое занимает третье место в мире по смертности (после сердечно-сосудистых заболеваний и рака). Во-вторых, потому, что это заболевание обычно носит комплексный характер и часто бывает связано как с нарушением регуляции содержания глюкозы, так и с поражением почек, суставов, сердечно-сосудистой системы, органов зрения, а также с ожирением, ослаблением иммунной системы и другими нарушениями в [c.74]

Использование иммунных методов с пороговым уровнем 20 нг/ мл позволяет продлить эти сроки до 3-6 дней, а в случае хронического потребления до 25 40 дней ft 1 . Следует отметить значительные вариации результатов анализа при ежедневном отборе проб, вплоть до чередования положительного и о+рицательного отклика. [c.133]

Все белки, изученные до сих пор, обладают антигенными св-вами. У белков различают линейные детерминанты, построенные из аминокислотных остатков, расположенных рядом в одном участке полипептидной цепи, и конформационные, к-рые слагаются из аминокислотных остатков разных участков одной или большего числа полипептидных цепей. Антитела, полученные при иммунизации данного животного определенным белком, могут реагировать, хотя и с небольшим сродством, с нек-рыми пептидами, выделенными из гидролизата зтого белка. Такие пептиды, построенные из 5-7 остатков, часто располагаются на изгибах или выступающих отрезках пептидной цепи и, очевидно, являются детерминантами или их частями. Однако в иных условиях, напр, при иммунизации др. вида животного, могут образовываться антитела к иным участкам молекулы того же белкового А. Практически вся пов-сть белковых молекул обладает антигенными св-вами, она, т. обр., представляет собой сумму перекрывающихся детерминант, каждая из к-рых может вызывать иммунную р-цию или не вызывать ее в конкретных условиях. Последние определяются различиями в строении между белковым А, и собственными белками организма, а также регуляторными иммунными механизмами, находящимися под генетич. контролем. По-видимому, почти все детерминанты белков конформационно зависимы. Согласно данным рентгеноструктурного анализа, антигенные детерминанты обладают повыш. подвижностью. [c.174]

Иммунный интерферон 2/487 Иммунный флуоресцентный анализ 2/)2)9 Иммуногены 2/427 [c.611]

Ознакомиться с тем. как можно проводить иммунный анализ с использованием меток. [c.565]

Иммунный анализ основан на измерении доли занятых активных центров. [c.569]

Хотя конкурентный вариант иммунного анализа имеет свои преимущества и очень популярен, он имеет и практические ограничения. Очевидным недостатком является то, что маркирование определяемого вещества Ag может изменить или даже полностью устранить способность связываться с АЬ вторая опасность особенно существенна, если маркирование включает в связы- [c.571]

В настоящее время 30% всех иммуноанализов в США включают применение изотопных меток. Остальные 70% выполняются в основном с помощью методов, в которых роль меток выполняют флуорофоры или ферменты. Применение нефелометрии ограничено анализом иммунных белков. Инфекционные заболевания в основном диагностируют с помощью гетерогенных методов с применением ферментных меток и бусин в качестве носителей, хотя 30% анализов выполняются с помощью более дешевых методик типа РИА. Контроль лекарственных препаратов осуществляют с помощью гомогенных методик, включающих применение ферментных меток или регистрацию поляризации флуоресценции. В случае анализа гормонов имеется большой выбор как гомогенных, так и гетерогенных методик с радиоактивными, ферментными и флуоресцентными метками. Доля неизотопных методов составляет 65% и имеет тенденцию к росту. Альтернативные методы йммуноана-лиза часто используются внутри определенной диагностической группы, например в анализах на тиреоидный статус. В США наиболее важным фактором является стоимость анализа, а различные технические аспекты обычно имеют второстепенное значение. В частности, 50% инструментального парка, используемого в иммуноанализе, работает с промышленно выпускаемыми реагентами. [c.19]

Если общая концентрация каннабиноидов в моче менее 50 нг/мл (по данным иммунного анализа), то, возможно, это связано с употреблением дозы ранее чем период 36 ч, или быть следствием долговременной экскрешн, свойственной хроническим потребителям. Если при последовательных еженедельных анализах первая проба была положительной, а вторая и третья отрицательные, то это может быть вызвано случайным или разовым потреблением средства. [c.132]

Шпорцевая, или южноафриканская, лягушка Хепориз) в последние 10 лет все чаще используется иммунологами и иммуногенетиками в качестве объекта исследования. Это объясняется в основном наличием частично генетически охарактеризованных клонов и линий животных и увеличением числа и информативности методов, используемых для анализа иммунной системы Хепорив. Некоторые из этих методов описаны в данной главе. [c.467]

Л. а. используют в иммунохим. анализе для определения антител, гормонов, лек. препаратов, вирусных и бактериальных антигенов по концентрации комплекса антиген-антитело. При этом в иммунном флуоресцентном анализе к антителу непосредственно присоединяют флуоресцирующие в-ва, напр. РЗЭ, флуоресцирующие красители (чувствительность метода 10" моль/л), а в иммуноферментном анализе к антителу присоединяют фермент и в результате ферментативной р-ции, сопровождаемой биолюминесценцией, определяют ферментативную активность (чувствительность метода 10" моль/л). [c.614]

Извесгно, что в ответ на попадание в живой организм чужеродных веществ (ими могуг бьггь и суперэкотоксиканты) в нем вьфабатьшаются антитела, как отклик иммунной системы организма. Последние в высшей степени специфично взаимодействуют с этими веществами с образованием соответствующих комплексов, что в итоге приводит к их нейтрализации и выводу из организма Именно на использовании данных взаимодействий и возможности получения необходимых антител и базируются иммунохимические методы анализа. Стремление создать специфичные и эффективные методы определения в воде, воздухе и почве остаточных количеств токсичных веществ и снизить их стоимость во многом явилось стимулом к разработке указанных методов Многие иммунохимические методы имеют высокую чувствительность и специфичность, а в ряде случаев позволяют определять высокотоксичные соединения даже без вьщеления из матрицы или после минимальной очистки. [c.297]

Автор. Такие примеры есть. Во-первых, это простейшая модель инфекционного заболевания, которую предложил Г.И. Марчук в 1975 г., т е. в начале нашей работы [Марчук, 1985]. Модель содержала четьфе уравнения, которые описывали взаимодействие иммунной системы организма с проникшими в него вирусами или бактериями. Анализ показал, что изменение некоторых параметров модели (коэффихщентов ее уравнений) изменяет само решение так, что врачи могут интерпретировать это как переход хронической формы заболевания в острую с последующим выздоровлением. В связи с этим хочу вспомнить один любопытный случай. [c.12]

Положительная проба мочи по данным иммунного анализа указывает на потребление марихуаиы (или продуктов ее переработки) в течеиие периода от 1 ч вплоть до нескольких недельот момента отбора пробы. [c.132]

В конкурентном иммунном анализе устанавливают число центров, не занятых пробой он может иметь различные варианты, но суть в том, что определяемое вещество пробы смешивают с меченым определяемым веществом, и они конкурируют за активные центры (рис. 7.9-4). Метсд требует разделения связанного и свободного антигена или антитела с целью определения их относительных количеств. Если определяют антиген, присутствие меченого антигена позволяет оценить относительное разделение. Как можно заключить из кривых иа рис. 7.9-3, оптимальная чувствительность достигается при уменьшении концентраций меченого антигена и антитела. [c.569]

Широкое распространение получают иммунофер-ментные методы - разновидность иммунных методов анализа (радиоактивная или флуоресцентная метка заменяется ферментом). Их используют для определения иммуноглобулинов, гормонов, стеровдов, лек. ср-в, пестицвдов и др. Эти методы обладают исключительно высокой чувствительностью и селективностью. [c.80]

Бели определяемое веидаство является антигеном, оно может быть определено с помощью иммунного анализа (см, разд. 7.9), Для проведения такого анализа обычно используют метку, и выбор преобразователя зависит от природы [c.519]

Схема 7.в-11. Пути реакций согласно связанноь с редокс-ферментом ампе-рометрическощг измерению с помощью редокс-медиатора, для конкурентного иммунного анализа с использованием антигена, меченного ферроценом. [c.539]

В иммунном анализе определяемое вещество не связано с продуктом каталитической реакции, а является меткой, маркирующей наличие комплексного или свободного антигена илн антитела. Основы иммунного анализа обсуждаются в разд. 7.9. Так же, как в ферментативных тест-наборах (например, для определения глюкозы), на основе иммунного анализа создано большое число тест-наборов например, в тесте на беременность — хотя здесь результат рассчитан на наблюдение пользователя за развитием о1фаски и не контролируется автоматически (т. е. детектором служит человеческий глаз ). На такой тест-полоске [c.551]

Устройство ввода на основе решетки позволяет завести свет в световод. Решетка —это периодическая структура (например, треугольная, пилообразная, синусоидальная) (рис. 7.8-21), которая нанесена на поверхность световода. Когда свет падает на решетку он возбуждает в световоде проходящую моду в зависимости от периода решетки. Чтобы усилить эффект изменения показателя преломления на границе раздела, изменения, происходящие на поверхности решетки, надо перенести на световод. Например, на рис. 7.8-21 свет, падающий вблизи устройств ввода, будет возбуждать проходящие моды, зависящие от показателя преломления окружающей среды. В этом варианте поверхность становится чувствительной к тонким изменениям показателя преломления. Этот вариант, следовательно, подходит для проведения безметочного иммунного анализа, поскольку связывание между иммобилизованным антителом и антителом пробы дает большую плотность этих молекул на расстоянии порядка длины волны вглубь от поверхности (заметьте, что глубина проникновения света составляет величину порядка длины волны, уравнение 7.8-34) и, таким образом, приводит к изменению показателя преломления. Например, конкурентный иммунный анализ можно применить для определения пестицидов, при этом на модифицированной аминосиланом поверхности устройства связи ковалентно иммобилизован триазиновый гаптен, а связывание антитела детектируют за счет измерения угла несвязывания [7.8-53, 7.8-54]. Чтобы детектировать присутствие триазиновых пестицидов, пробу следует предварительно выдержать с антителами, а затем — перенести к иммобилизованному гаптену. Очевидно, чтобы обеспечить невмешательство пользователя в эту процедуру анализа, в устройстве должен быть предусмотрен этап выдержки. [c.559]

При разработке иммунного анализа целью является проследить за равновесием между антителом и антигеном. При анализе исследуют связывание антигена с антителом и различают связанный и несвязанный антиген. Поскольку процесс имеет равновесный характер (уравнение 7.9-1), линейной зависимости от концентрации антигена нет. Следовательно, важно знать характеристический отклик связьгеания как функцию концентрации антигена. [c.567]

Из кривых на рис. 7.9-5 очевидно, что изменение сигнала в результате [AAg ] является функцией концентрации антитела, используемой в анализе (рис. 7.9-5,б), и что уровень антител, даюищй максимальную чувствительность, зависит от концентраций меченого и определяемого антигена. Традиционно системы иммунного анализа имеют тенденцию давать погрешность при высокой концентрадии реагента со степенями связывания 0,4-0,5. Действительно, из рис. 7.9-3,а и б, видно, что связывание в этой области (0,4-0,5) слишком велико, чтобы привести к большому изменению степени связывания антигена при низкой концентрации последнего. Однако нельзя игнорировать сигнал, относящийся к неспецифическому связыванию, поэтому чувствительностью поступаются в пользу более низких помех за счет неспецифического связывания при более высоких концентрациях антител. [c.571]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология