Влияние pH в ион-парной хроматографии

Повышение ионной силы водной фазы приводит к уменьшению числа образующихся ионных пар из-за конкуренции буферных ионов с противоионом за образование ионной пары. Поэтому повышение ионной силы в ион-парной хроматографии приводит к снижению к при разделении на обращенной фазе и к повышению к при разделении на нормальной фазе. Влияние буферных ионов возрастает в последовательности М02-<Вг-<.С1-<304 -. Селективность растворителя в ион-парной хроматографии изменяется по тем же правилам, как и в случае распределительной жидкостной хроматографии. [c.78]

Влияние температуры имеет в ион-парной хроматографии большое значение. При использовании механически удерживаемых неподвижных фаз колонка должна быть термостатирована. В ион-парной хроматографии применяют обычно фазы с повышенной вязкостью, а повышение температуры снижает ее. Зависимость селективности от температуры также наиболее выражена в ион-парной хроматографии. [c.80]

Сложность процессов, протекающих прн ион-парной хроматографии, препятствует созданию моделей, описывающих влияние структурных факторов сорбатов на удерживание. В данном режиме наряду с гидрофобностью сорбатов удерживание будет определяться и величинами рКа, однако анализ относительной роли эти-х факторов осуществим с трудом. Имеются указания, что параметры моделей удерживания можно связать со вкладами определенных структурных фрагментов и я-константами гидрофобности Ганча [69]. [c.174]

На проявление модифицирующего эффекта существенное влияние оказывает pH подвижной фазы. Ассоциация модификатора с сорбатом, где бы она ни происходила, будет наиболее прочной, если оба они ионизированы. Поэтому pH подвижной фазы выбирают в зависимости от свойств сорбата и модификатора. На рис. 4.43 изображена типичная зависимость коэффициентов емкости слабой кислоты от pH подвижной фазы и концентрации модификатора. Нижняя кривая, соответствующая обычному обращенно-фазовому режиму, совпадает по форме с кривыми рис. 4.4. При добавлении в подвижную фазу динамического модификатора удерживание увеличивается. Более всего этот эффект выражен при pH около 6, где в достаточной степени ионизированы и сорбат, и модификатор. Рекомендуемые значения pH для ион-парной хроматографии приведены в табл. 4.38. [c.173]

Оптимизация подвижных фаз, состоящих [438] из воды, ацетонитрила, метанола, тетрагидрофурана Анализ в биологических объектах. Ис- [40] пользование амперометрического детектирования Теоретический анализ механизма нор- [386] мально-фазовой ион-парной хроматографии, экспериментальное исследование влияния состава подвижной фазы [c.301]

Во-первых, не принималось во внимание влияние pH на диссоциацию слабых ионов сорбата и ионов-модификаторов. Влияние pH в ион-парной хроматографии будет рассмотрено ниже. [c.120]

Рис. 3.31. Пример влияния длины углеводородной цепи ионов-модификаторов на удерживание в ион-парной хроматографии [85] (с разрешения изд-ва).

Концентрация противоионов. В ион-парной, как и в ионообменной хроматографии концентрация противоионов оказывает значительное влияние на удерживание. В ион-парной хроматографии противоион имеет такой же заряд, как и молекулы образца, но противоположный заряду нона-модификатора. Например, при разделении веществ анионной природы поп-парным [c.127]

Температура. В ион-парной хроматографии температура оказывает влияние как на удерживание, так и на эффективность, но не в той же степени, как это имеет место в ионообменной хроматографии. Ион-парная хроматография обычно является гораздо более эффективным методом (в отношении числа теоретических тарелок), чем ионообменная хроматография, и поэтому работа при комнатной температуре дает удовлетворительные результаты. [c.128]

Пирсон и соавторы подробно сопоставляли характеристики различных силикагелевых матриц, в частности влияние размера пор н фактора прочности, играюш,его важную роль при элюции концентрированными (до 80%) растворами пропанола (высокая вязкость ) в 0,1%-ном растворе ТФУ (ион-парная хроматография). Для адек- [c.215]

Исходя из сказанного, становится вполне понятным, почему в повседневной практике подобные поверхностно-покрытые фазы были вытеснены химически связанными (см. разд. 3.2.2). Соответственно мы не будем подробно обсуждать различные аспекты, представляющие интерес с точки зрения оптимизации таких систем. Учитывая влияние температуры и состава подвижной фазы на удерживание и селективность, можно предположить, что для описания свойств нерастворимых неподвижных фаз в ЖЖХ пригодны те же самые соотношения, что и в ЖСФХ. Жидко-жидкостные системы получили широкое распространение при разделении ионных соединений посредством ион-парной хроматографии. Такие систе.мы рассматриваются в разд. 3.3.2. [c.70]

Влияние концентрации ионов-модификаторов. Из-за сложности. механизма ион-парной хроматографии влияние концентрации противоионов обычно не подчиняется столь простой зависимости, как представленная уравнением (3.91). Одна из причин этого состоит в том, что изотерма распределения ионов-модификаторов нелинейна, т. е. величина Ку на рис. 3.28 не является постоянной. Несколько типичных изотерм распределения приведены на рис. 3.29. [c.123]

Как показывает этот рисунок, первоначальное добавление в подвижную фазу небольших количеств ионов-модификаторов приводит к их преобладающей абсорбции неподвижной фазой. Однако неподвижная фаза быстро насыщается этими ионами, кривые распределения сглаживаются, а величина Ку уменьшается. Поэтому влияние изменения концентрации ионов-модификаторов должно быть гораздо заметнее в области низких, а не высоких концентраций. По этой причине Кромбин и др. [82] и Барта и др. [81]. предложили использовать для описания ион-парной хроматографии в качестве основного параметра концентрацию ионов-модификаторов в неподвижной фазе. Однако этот параметр неудобен, поскольку требует знания изотерм распределения. На практике обычно используют график зависимости удерживания (1п ) от логарифма концентрации ионов-модифи-каторэв в подвижной фазе (ln[Y]). Такие зависимости обычно имеют вид прямых (или немного искривленных, но монотонных Линий) в широком диапазоне концентраций пример такой зависимости приведен на рис. 3.30. [c.123]

Влияние органических модификаторов подвижной фазы. В обращенно-фазовой ион-парной хроматографии органические модификаторы элюента могут влиять как на удерживание, так и на селективность. Изотерму распределения противоионов, а следовательно, и удерживание более всего определяет количество добавленного модификатора. Растворимость ионов-модификаторов в подвижной фазе представляет собой второстепенный фактор. Для растворения в подвижний фазе достаточных количеств больших ионов-модификаторов может потребоваться высокое содержание органического растворителя в подвижной фазе. В принципе тип органического растворителя можно использовать в качестве пара.метра для оптимизации обращенно-фазовой ион-парной хроматографической системы. Однако вследствие широкого выбора других параметров эта возможность еще широко не исследовалась. [c.126]

В целом же удерживание в данном случае определяется тем же типом взаимодействий, что и на альбумин-силикагелевой ХНФ, и здесь применимы в основном те же приемы регулирования удерживания и селективности, но в качестве спиртового модификатора более предпочтителен пропанол-2 [96]. В качестве модификаторов были также испытаны как катионные, так и анионные соединения. Анализ их влияния на удерживание ионных соединений показал, что оно хорошо описывается моделью ион-парных равновесий для взаимодействия сорбат-сорбент [97]. Таким образом, при разделении оптических изомеров на колонках Епап11оРас можно пользоваться теми же приемами, которые широко используются в обращенно-фазовой хроматографии [98]. Это еще раз подчеркивает важность гидрофобных связывающих центров для ХНФ на основе белков. [c.138]