Колонки для ВЭЖХ

При всей кажущейся несложности процесса суспензионной упаковки колонок для ВЭЖХ у начинающего хроматографиста, так же как и у имеющего опыт, но начинающего работать с новым сорбентом, возникает ряд вопросов. Какой растворитель взять для приготовления суспензии Какую концентрацию суспензии использовать Как лучше диспергировать сорбент Какой формы и объема применить резервуар для суспензии Какой насос лучше для подачи растворителя Какое направление потока растворителя выбрать и какой взять растворитель Какое давление использовать и сколько растворителя подавать Сколько времени снижать давление Как выравнивать слой сорбента и устанавливать фитинг и фильтр На каждый вопрос существует ряд ответов, а выбор удачной комбинации вариантов всегда обусловлен не только собственным опытом, но и какими-либо общими представлениями, литературными данными и. наконец, имеющимся в наличии оборудованием. [c.115]

Рис. 5.11. Колонки для ВЭЖХ а — цельнометаллические б — со сменными стеклянными патронами в — с неиосредственным присоединением форколонок г — с радиальным сжатием. 1 — корпус 2 — сорбент 3 — фильтры 4 — сменный патрон 5 — наконечники.

Проводимые работы по развитию микроколоночной ВЭЖХ, направленные на дальнейшую миниатюризацию колонок, очевидно, являются перспективными и нужными, однако их освоение и внедрение в практику в большой мере сдерживается техническими трудностями. Описаны капиллярные колонки для ВЭЖХ с внутренним диаметром около 5 и 10 мкм, в том числе и с привитыми фазами, позволившие получить эффективность до нескольких миллионов т.т. описаны колонки с привитыми сорбентами, имеющие внутренний диаметр около 30—50 мкм, также позволившие получить эффективность около миллиона т.т. Однако ввод проб в такие колонки, особенно количественный, стабильная подача растворителей с расходом 0,01—1 мкл/мин при давлениях 10—40 МПа, наконец, создание детекторов с объемом кюветы в 1—20 нл, дающих высокую чувствительность,— все это только часть серьезных проблем, решить которые предстоит в дальнейшем. Сейчас можно предсказать, что в ближайшие 5—10 лет микроколоночные хроматографы с колонками диаметром 0,2—2 мм найдут самое широкое применение в аналитической практике, хотя и не станут наиболее массовыми. [c.63]

Приготовление колонок для ВЭЖХ из частиц сорбента размером от 3 до 12 мкм долго было для специалистов по ВЭЖХ труднопреодолимой проблемой. Так как при измельчении любых твердых тел их поверхность контакта резко возрастает, мелкие частицы приобретают способность заряжаться, слипаться в трудно разрушаемые комочки либо отталкиваться друг от друга с образованием неравномерно распределенных пустот. [c.114]

Возможны разные варианты такой очистки. Можно просто при использовании градиента высокого давления установить колонку с привито-фазным сорбентом ie, желательно не обладающую большим гидравлическим сопротивлением (с зернением 20 или 15 мкм), после насоса, подающего чистую воду, до смесителя. В этом случае колонка будет очищать ровно столько воды, сколько нужно для работы, и вода будет самая свежеочищенная. Можно использовать стеклянную колонку, заполнив ее более крупным препаративным сорбентом (например, 40 — 63 мкм), и подавать воду под гидростатическим давлением, получая столько воды, сколько нужно на день работы. Можно, наконец, использовать полупрепаративную или препаративную колонку для ВЭЖХ и качать воду насосом хроматографа, используя для очистки воды ночное время, когда аналитическая работа не нужна. Какой вариант удобнее, решает сам исследователь. [c.30]

К сожалению, даже хорошо оснащенные лаборатории редко имеют широкий выбор сорбентов и колонок для ВЭЖХ ввиду их высокой стоимости и очень широкого ассортимента. Кроме того, часто в научной практике возникает необходимость иметь, например, силикагель с определенным размером и объемом пор и силикагель со специфическими привитыми фазами, которые могут обеспечить требуемое разделение. В этом случае наиболее быстрым и рациональным является получение сорбента и упаковка колонок своими силами, что требует, конечно, определенной квалификации. [c.112]

Начнем с хранения колонок. Фирмы, производящие тестированные и не тестированные, а также пустые колонки для ВЭЖХ поставляют их в специальных коробках, имеющих мягкий пенополиуретановый вкладыш с гнездом для колонки или такие же прокладки. Иногда колонку дополнительно помещают в трубку из пластика и фиксируют на концах держателями. Концы колонки герметично закрывают заглушками разного типа. [c.122]

Стекло используют в конструкциях современных хроматографов довольно редко, главным образом из-за его хрупкости я плохой работы на разрыв, хотя его химическая инертность известна. Методы упрочнения стекла путем закалки, нанесений упрочняющих пленок и другие приемы позволяют до известной степени преодолеть традиционную хрупкость стекла. В таком виде его используют для создания малых шприцевых насосов (например, в отечественном микроколоночном приборе Милихром ) на 5—6 МПа, колонок на 3—8 МПа, микрошприцев высокого давления. Тем не менее следует иметь в виду, что хотя современные методы позволяют очень сильно упрочнить стекло некоторых марок (например, колонки для ВЭЖХ из стекла производства ЧССР выдерживают при набивке давление 60 МПа и больше), тем не менее любой возникающий при работе на поверхности такого изделия дефект (царапина, трещина, растворение покрытия) могут привести к мгновенному разрушению изделия. и выходу хроматографа из строя. Необходимы чехлы, защищающие от поражения осколками. [c.166]

Качественно заполненные колонки для ВЭЖХ с хорошими стабильными характеристиками имеют высокую стоимость. Это связано с большими сложностями их изготовления. Целесообразно приобретать колонки в фирмах-производитслях хроматографических матсриа)юв, а не изготавливать их в лабораторных условиях. [c.140]

Все узлы современного жидкостного хроматографа являются по своей сути периферическими, вспомогательными элементами по отношению к колонке, где протекает собственно физический процесс разделения. Рабочие параметры высокоэффективных колонок определяют основные технические требования, предъявляемые к ряду других элементов аппаратуры. К таким параметрам относятся в первую очередь высокое гидравлическое сопротивление и малая степень размывания хроматографических зон, а также небольшие объемы аналитических колонок для ВЭЖХ. [c.181]

Промышленный выпуск заполненных аналитических и препаративных колонок для ВЭЖХ налажен многими фирмами, и, по-видимому, большая часть разделений в мире выполняется на колонках фабричной упаковки. В то же время соображения экономики, экспериментальной гибкости и, наконец, здоровый спортивный интерес заставляют многих хроматографистов осваивать методы упаковки собственных колонок. Это во всяком случае оправдано, если предстоит работать в условиях, быстро выводящих слой сорбента из строя, либо при работе с оригинальными сорбентами, синтезированными в лаборатории. [c.198]

Важным фактором колонок для ВЭЖХ является экстрако-лоночное расширение пика (ЭКР). От значения ЭКР зависит как разрешающая способность колонки, так и правильность оценки N. Большое значение имеет ЭКР при изучении причин, вызывающих размывание хроматографической зоны, а также при оптимизации системы. Очевидно, что от соотношения дисперсии собственно в колонке в мертвых объемах будет зависеть, насколько полученное значение N приближается к истинному. Когда ставится задача уменьшения диаметра или длины колонки, повышения N и перехода к сорбентам с меньшим диаметром зерна, одним из критериев соответствия для решаемой задачи выбранной колонки и применяемой аппаратуры служит ЭКР. ЭКР можно снизить, уменьшая длину соединительных капилляров, объем кюветы, постоянную времени электронной схемы детектора. [c.253]

Природа активных функциональных групп на поверхности сорбента определяет селективность процесса разделения, а размер частиц, их фракционный состав (близость к монодисперсному распределению) и характер упаковки определяют эффективность процесса разделения. Использование поверхностно-пористых сорбентов дало возможность заметно повысить эффектибность разделения ЖХ, однако в последние годы сорбенты этого типа применяют редко. Переход к объемно-пористым сорбентам с малыми размерами частиц (3—10 мкм) позволил при большей емкости сделать пути диффузии в порах сорбентов обоих типов сопоставимо малыми и существенно повысить эффективность колонок для ВЭЖХ. [c.226]

Приготовление высокоэффективных колонок для ВЭЖХ является одной из наиболее трудновоспроизводимых процедур, обычно требуюпдих гораздо больших усилий, чем простое повторение литерnypiibix прописей. По,мимо общих причин неудач, возникающих при попытках воспроизвести любую методику заполнения колонок, имеются две специфические причины описа- [c.246]

Общий принцип заполнения колонок для ВЭЖХ выглядит просто необходимо создать суспензию подходящего сорбента и ввести ее в металлическую трубку-колонку с фильтром (фритой) на конце. Все определяется комплексом деталей образования суспензий и особенностей ввода этой суспензии. Прежде всего, для того чтобы избежать разделения частиц сорбента по размерам в процессе упаковки, подбирают смесь нескольких жидкостей с плотностью, близкой к плотности силикагеля. Частицы сорбента в такой жидкости долгое время не оседают. Метод получил название сбалансированной плотности . [c.247]

Специальные защитные приспособления, увеличивающие срок работы Ваших дорогих (в том числе — импортных) колонок для ВЭЖХ в 2—4 раза предколоиочные фильтры, проточные фильтры, защитные колонки, насыщающие колонки, предколонки, устройства для фильтрования элюента, устройства для фильтрования пробы, концентрирующие патроны. [c.449]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология