Нитрофенилфосфаты, гидролиз

Около 13 лет назад случайно было обнаружено [266], что щелочной раствор л1-нитрофенилфосфата гидролизуется на свету гораздо быстрее, чем в темноте. Аналогичный эффект наблюдается и для ж-нитроанизола. Как было показано с помощью меченых атомов, при этом рвется связь арил — [c.444]

В таблице 5 приведена кинетика накопления п-нитрофенола в реакции гидролиза я-нитрофенилфосфата, катализируемого щелочной фосфатазой [6]. Определить значения т и Кт(кат) ферментативной реакции. [c.173]

Кинетика накопления п-нитрофенола в реакции гидролиза п-нитрофенилфосфата, катализируемого щелочной фосфатазой. Условия опыта pH 8,0 25°С Ш трис-буфер [SJo = 5,1-10- М [c.174]

Рис. 86. Обработка с помощью уравнения (8.26) полной кинетической кривой гидролиза я-нитрофенилфосфата под действием щелочной фосфатазы (Д = 1 час)

Об активности щелочной фосфатазы судят по количеству -нитрофенола, образующегося при гидролизе п-нитрофенилфосфата под действием фермента. [c.196]

ДЛЯ п-нитрофенилфосфата [80]. В случае последнего соединения заряженные нуклеофилы обычно мало реакционноспособны, и незаряженные нуклеофилы, такие, как амины и имидазолы, относительно более активны (см. ниже). Для этих случаев найдено доказательство промежуточного образования четвертичного аммониевого основания, которое быстро гидролизуется в соответствующую кислоту. [c.203]

Получение и формула. Гидролиз хлорангидрида 4-нитрофенилфосфата с последующим переводом в бариевую соль. [c.296]

Другие химические эффекты вытекают из измененного электронного распределения возбужденного состояния молекул. Одним из первых примеров, интерпретированных таким путем, был термический и фотолитический гидролиз м- и ге-нитрофенилфосфатов [9] [c.500]

Фосфатазы — ферменты, ускоряющие гидролиз эфиров фосфорной кислоты. Щелочной фосфатазой называют фосфа-тазу, оптимум pH которой находится в щелочной среде. В организме субстратом действия этого фермента является фосфоглицериновая кислота, однако специфичность фос-фатаз не велика и они гидролизуют многие другие эфиры фосфорной кислоты. Для обнаружения фосфатаз и их количественного определения используют в качестве субстратов такие бесцветные эфиры фосфорной кислоты, которые под действием фосфатаз распадаются на фосфат и окрашенное соединение. Активность фосфатазы оценивают по интенсивности окраски. Примером такого субстрата является нитрофенилфосфат, распадающийся при участии фосфатазы на фосфат и нитрофенол, имеющий желтый цвет [c.234]

Рис. 8. Влияние кислотности уходящей группы па скорости гидролиза дианионов ацилфосфатов и и-нитрофенилфосфата [33].

Влияние концентрации арилсульфатазы на скорость гидролиза п-нитрофенилфосфата до и после диализа препарата фермента [c.123]

Кинетику гидролиза п-нитрофенилфосфата, катализируемого щелочной фосфатазой, изучали по образованию /г-нитрофе-нола и фосфат-иона (продукты 1 и 2 схемы 7.1 соответственно). Было найдено, что при проведении ферментативной реакции в 1М трис-буфере (1М водный раствор трис-оксиметил-З-аминометана) отношение концентраций продуктов Р1/Р2 в процессе реакции равнялось 2,1. Исходя из предположения, что трис-буфер принимает участие в ферментативной реакции в качестве дополнительного нуклеофильного агента [10], определить отношение констант (см. схему 7.12). [c.153]

Различают три типа К. А-эстеразы, или арилэстеразы, к-рые специфичны в осн. по отношению к эфирам фенолов, не ингибируются диэтил-п-нитрофенилфосфатом (Е-600), гидролизуют его В-эстеразы, или алиэстеразы, гидролизующие эфиры алифатич. спиртов и ингибируемые Е-600 С-эстеразы, к-рые не ингибируются Е-600 и не гидролизуют его. [c.322]

Изучение синтеза пантотеин-2, 4 -циклофосфата из пантолак-тон-2-дифенилфосфата показывает, что при переэтерификации происходит образование шестичленной циклической системы. Аналогичные циклические фосфаты были идентифицированы в качестве промежуточных соединений при гидролизе эфиров дезоксинуклео-зид-3 -фосфатов и, вероятно, могут образовываться в случае рибо-нуклеозидных производных, в которых удобно расположенная 2 -гидроксильная группа блокирована. Так, ш,елочной гидролиз тимидин-З -п-нитрофенилфосфата, идуший через 3, 5 -циклофосфат, образующийся в результате трансфосфорилирования, дает смесь тимидин-3 - и тимидин-5 -фосфатов [166]. [c.179]

Гидролиз при pH 1—5 протекает в незначительной степени и только при pH 8—9 становится заметным. Гидролитическая устойчивость Е-600 меньше, чем тио-эфира (Е-605). Олдридж, который исследовал зависимость между ферментативной активностью и гидролитической устойчивостью диэтил-п-нитрофенилфосфата (Е-600) и родственных соединений, отметил, что ингибирующее действие этих соединений тем сильнее, чем меньше их устойчивость к воде. Конечно, эти представления не следует распространять на все эфиры фосфорной кислоты. [c.191]

Почти все индивидуальные промежуточные продукты распада, получаю циеся прн гидролизе диметил-4-нитрэ )еяилтиофос фата, за исключением конечного, содержат в молекуле одновременно по одному атому фосфора и серы. Если бы диметил-4-нитрофенилтио-фосфат окислялся до диметил-4-нитрофенилфосфата, то в продуктах гидролиза были бы соединения, содержащие лишь фосфор и не содержащие серы, и наоборот. Этот вопрос можно выяснить путел разделения полученных продуктов. [c.86]

Электростатические эффекты в водном растворе йвляются малыми и изменчивыми, поскольку вода обладает исключительной способностью сольватировать заряды. Проанализируем качественно следуюш ие результаты. Гидролиз сложных эфиров фосфорной кислоты протекает лишь при продолжительном кипячении их в концентрированной ш елочи, а ацильная группа дианиона ацетилфосфата значительно более стойка по отношению к атаке анионом тиола, чем другие ацильные группы. На этом основании можно полагать, что отрицательные заряды ионизированных фосфатов затрудняют атаку анионными нуклеофильными агентами [76, 49]. Монокатион тетраметилендиамина реагирует с дианионом ге-нитрофенилфосфата с константой скорости 1,9-Ю л/мол мин, которая в четыре раза больше константы скорости реакции со свободным основанием(равной 0,43 10 л/моль мин), хотя основность монокатиона (р Г 5,7) в 2000 раз меньше основности свободного основания (р/ Г 9,1) [33]. С первого взгляда эту высокую реакционную способность можно объяснить, полагая, что реакция протекает с участием внутримолекулярного общекислотного катализа протоном второго атома азота монокатиона, т. е. по согласованному бифункциональному механизму ХУП. [c.84]

Обработкой 5 -0-тритилтимидина га-нитрофенилдихлорфосфатом в пиридине и последующим гидролизом получают 5 -0-тритилтимидин-3 - -нитрофенилфосфат I, который в результате щелочной обработки и восстановительною детритилирования дает тимидин-З -фосфат с выходом 75%. [c.375]

Поскольку известно, что 34 является мощным необратимым ингибитором ацетилхолинэстеразы, то для проявления биологической активности присутствие нитроалкильного или нитроарильного заместителя необязательно. Роль нитрогрунны состоит скорее в том, что она влияет на реакционную способность и придает веществу некоторые желательные характеристики, например специфичность действия и летучесть. Влияние нитрогрунны на реакционную способность можно проиллюстрировать работами Маркова и сотр. [395], изучавших реакции ряда м- и тг-нитрофенилфосфатов и фосфонатов с ацетилхолинэстеразой, а также реакции мета- и пара-изомеров 37. Для пара- и лie/ 7.я-изoмepoв 37 соответственно кг составляет 1,4-10 и 1,6-10 л/(моль-с) [см. реакцию (10)]. Интересно, что скорости щелочного гидролиза этих двух соединений очень близки [396]. Другое очевидное преимущество соединений типа 37, имеющих нитрофенильные заместители, заключается [c.180]

Олдфидж (Aldrige, 1953), а также Бергман и сотр. (Bergman et al., 1957) разделили неспецифические эстеразы, гидролизующие эфиры с короткой углеводородной цепью в зависимости от их чувствительности к органическим фосфатам (особенно диэтил-п-нитрофенилфосфату— Е 600 и диизопропилфторфосфату— ДПФ ), на 3 группы [c.191]

Фермент выделяют из клеток Е. соИ, зараженных фагом Т4. С его помощью можно осуществить включение на 5 -ОН-ко-нец ДНК или РНК из [у- Р]-АТФ. Поскольку описываемый метод часто используется для введения метки в продукты гидролиза НК, уже имеющие на 5 -концах фосфаты, уместно начать с необходимой в этом случае подготовительной реакции удаления концевых фосфатов. Для этого обычно используют щелочную фосфатазу из Е. oli. Краткие сведения о ферменте М 80 000 (димер) имеется два изофермента нуждается в и Mg + р1 = 4,5 рН пт = 8 удельная активность 30—40 ед./мг 1 ед. обеспечивает гидролиз 1 мкмоль л-нитрофенилфосфата с образованием окрашенного /г-нитрофенола за 1 мин при 25° и pH 8. Хранят фермент в 0,01 М Трис-НС1 (pH 8) с 0,12 М Na l и 50% глицерина при —20 . [c.255]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология