Фильтрование через гели

ФИЛЬТРОВАНИЕ ЧЕРЕЗ ГЕЛИ [c.14]

Фракционирование по молекулярным весам может быть как аналитическим, так и препаративным. Цель аналитического фракционирования заключается в нахождении молекулярновесового распределения исследуемого образца. Полученную кривую распределения можно далее сопоставить с другими характеристиками образца, например с методом синтеза или способом деструкции этого полимера, с физическими и механическими свойствами его. Выделение и характеристика каждой отдельной фракции, что является самой длительной и трудоемкой частью эксперимента, проводится только для того, чтобы построить кривую раснределения. С целью упрощения аналитического фракционирования широко применяются методы турбидиметрического титрования, ультрацентрифугирования и фильтрования через гель. Такие методы можно применять для получения кривых распределения по молекулярным весам, не выделяя каждую фракцию. Подробно указанные методы рассматриваются в других главах. Современный уровень знаний, однако, не позволяет применять большинство подобных методов без калибровки по аналитическому фракционированию с выделением каждой фракции и определением хотя бы молекулярного веса их. [c.61]

Другой интересный подход к выбору материала носителя для колонки применили Воган и Грин [9]. Эти авторы предположили, что применение в качестве носителя шариков из поперечно сшитого полистирола позволит нанести на носитель более тонкие пленки полимера. Необходимо при этом, чтобы степень сшивания полистирола была достаточно высокой и полимер не мог проходить сквозь матрицу. В противном случае будет происходить фракционирование путем фильтрования через гель. Фильтрование через гель дает фракции, молекулярный вес которых изменяется в порядке, обратном [c.88]

ДИАЛИЗ И ФИЛЬТРОВАНИЕ ЧЕРЕЗ ГЕЛИ [c.213]

ДИАЛИЗ и ФИЛЬТРОВАНИЕ ЧЕРЕЗ ГЕЛИ 219 [c.219]

В табл. 37 приведены величины для различных веществ при фильтровании через гели с высоким содержанием поперечных связей. [c.219]

ВЕЛИЧИНЫ для РАЗЛИЧНЫХ ВЕЩЕСТВ ПРИ ФИЛЬТРОВАНИИ ЧЕРЕЗ ГЕЛЬ С БОЛЬШИМ ЧИСЛОМ ПОПЕРЕЧНЫХ СВЯЗЕЙ [c.220]

В соответствии с определением, данным в статье 11, а], при гель-фильтрации используют водные растворы и гидрофильные гели, а при гель-проникающей хроматографии — органические растворители и гидрофобные гели. Фильтрование через гель применяется при биохимических исследованиях и при изучении природных соединений, гель-прони-кающая хроматография — для исследования синтетических высокомолекулярных соединений. Указанные методы включают также хроматографирование, или фильтрование , на молекулярных ситах 12]. Гель обычно характеризуют размерами молекул (точнее, интервалом молекулярных весов молекул), которые он достаточно эффективно разделяет. [c.399]

Препаративное фракционирование. Метод гельфильтрации впервые применили для обессоливания белковых растворов [669]. Под термином обессоливание надо понимать не только процесс удаления солей, но и отделение любых низкомолекулярных веществ от растворов макромолекул. Фильтрованием через гель сефадекса мож- [c.138]

Для удаления низкомолекулярных веществ из первичного экстракта или для смены среды можно провести диализ через целлюлозные мембраны. Этот метод более длителен, чем фильтрование через гель, и чаще применяется для удаления соли после высаливания и кристаллизации, а также после фракционирования в градиенте плотности солей или сахарозы, что обсуждается ниже. [c.43]

Молекулярне-массовое распределение полимеров. Синтетические полимеры — смесь молекул различной массы. Для построения кривых распределения исходную смесь фракционируют добавлением нерастворителя, центрифугированием и хроматографией (обычно фильтрованием через гели). Затем определяют молекулярную массу каждой фракции. Кривые распределения полимергомологов по молекулярной массе подобны соответствующим кривым распределения частиц по размерам, получаемым седиментационным анализом суспензий. [c.211]

Гель-проникающая хроматография представляет собой разновидность метода фракционирования на колонке, в которой разделение осуществляется по принципу молекулярного сита. Этот принцип был известен уже в начале 50-х годов, но лишь после того, как Порат и флодип [101 вновь открыли и широко использовали этот метод, он получил признание и широкое применение в научных исследованиях. Порат и Флодин опубликовали свою первую работу по фильтрованию через гель, как они назвали этот метод, в мае 1959 г. Начиная с этого момента и до 1964 г. было опубликовано более 300 работ, посвященных этому новому методу фракционирования. [c.111]

Название гель-проникающая хроматография выбрано как раз потому, что здесь разделение обусловлено различной проницаемостью гранул геля в отношении молекул растворенного вещества. Порат и Флодин назвали этот метод фильтрованием через гель, но такое название предполагает фильтрование через пластинку или короткую колонку и тем самым, вероятно, вызывает неверные представления о сущности метода. К тому же при истинном фильтровании более крупные частицы задерживаются на фильтре, а менее крупные проходят через него. В отличие от предлон енного Поратом и Флодином название гель-проникающая хроматография , очевидно, более точно отражает существо принципа разделения молекул. [c.112]

На данном этапе биохимических исследоваии11, когда перед множеством исследователей стоит задача фракционирования сложных смесей веществ, вызывает удивление тот факт, что мембраны, обладающие свойствами молекулярных сит, до снх пор так мало использовались в работе. Физико-химические закономерности, управляющие скоростями движения растворенных веществ через полупроницаемые мембраны путем свободной диффузии или под влиянием электрического поля, полностью не выяснены однако новейшие успехи в этой области привели к интересным выводам, которые имеют большое практическое значение. Ниже мы рассмотрим некоторые полезные практические приемы, а также многообещающие перспективы фильтрования через гель. [c.213]

При более тщательном исследовании Флодин [19] установил следующие моменты. Действие колонки можно повысить наиболее эффективно путем уменьшения размера частиц декстранового геля. Вязкость исследуемого образца ставит некоторый предел применимости метода фильтрования через гели, однако эффекты разделения не зависят от концентрации растворенных веществ. Из раствора белка можно полностью удалить соли, используя для элюирования воду, но так как в этих условиях некоторые белки склонны выпадать в осадок, элюирование, видимо, лучше проводить при помощи летучего буферного раствора. Декстраны, помимо эффекта молекулярного сита, слабо адсорбируют ароматические и гетероциклические соединения кроме того, в зависимости от ионной силы и pH геля [20] может наблюдаться сильная адсорбция некоторых основных веществ. [c.219]

Фильтрование через гели. Разделение веществ по молекулярному весу было впервые обнаружено при фильтровании через слои набухших зерен крахмала и агар-агара белков. Оказалось, что низкомолекулярные соединения достаточно глубоко диффундируют в объем зерен геля и по этой причине труднее вымываются носителем. Высокомолекулярные соединения, чья диффундирующая способность ниже, остаются в токе носителя и быстрее выходят из колонки. В настоящее время в качестве гелеобразующих веществ широко применяют декстраны с поперечными связями, известные под фирменным названием сефадексы . [c.89]

В конце пятидесятых годов Дж. Порат и Р. Флодин показали, что фильтрование через гели можно с успехом использовать для удаления солей из водных растворов белков и для концентрирования этих растворов. [c.89]

Попено и сотр. [30] обнаружили, что 90% пептидной части -кислого гликопротеипа можно удалить с помощью Flavoba terium, выращенных на 1-кислом гликопротеипе как единственном источнике углерода. После очистки смеси фильтрованием через гель и хроматографией на ионообменных смолах выделена фракция, содержащая то же количество гексоз, гексозамина и сиаловой кислоты, которое было найдено в исходном препарате. Эта фракция не содержала аминокислот. Молекулярный вес ее значительно больше 1000 (пентасахарид). [c.93]

Мати и др. [64] выделили из гидролизованного проназой тиреоглобулина овцы гликопентид, который был гомогенен при фильтровании через гель (сефадекс Г-25). Гликопептид содержал все углеводные компоненты (включая сиаловую кислоту) исходного белка и ряд аминокислот, в том числе и аспара- [c.224]