Трифторацетилирование пептидов

Недостаток трифторацетильной защитной группы состоит в том, что избирательное отщепление ее в присутствии сложных этиловых или метиловых эфиров достигается лишь в особых случаях [2496]. Превращение в гидразиды возможно только в случае эфиров трифторацетилированных пептидов, у которых М-концевой остаток стерически экранирован ([2504] ср. стр. 121). Правда, можно избежать затруднений, возникающих при образовании гидразида, путем применения тритилгидразина [2500]. Азиды трифторацетиламинокислот обычно получают непосредственным взаимодействием соответствующего хлорангидрида [c.33]

Метиловые эфиры пептидов можно получить в результате обработки их ацилпроизводных диазометаном, путем их исчерпывающего метилирования [290], а также обработки тионилхло-ридом в метаноле или метанольном раствором НС1 [282, 291]. В последнем случае этерификация сопровождается частичным расщеплением пептидных связей [292]. Трифторацетилирование пептидов следует проводить при значительно более низкой температуре, чем соответствующую обработку аминокислот [293, 294], или использовать в этих целях вместо ангидрида трифторуксусной кислоты ее метиловый эфир и проводить реакцию в метаноле в присутствии триэтиламина в качестве катализатора [253]. Перечень некоторых производных пептидов и подробные методики их получения приведены в руководстве Кнаппа [187]. [c.83]

Анализ пептидов, содержащих лизин, из ферментативного (но не триптического ) или частичного химического гидролизата является важным этапом расшифровки аминокислотной последовательности белков. Выделение пептидов, содержащих лизин, следует начать с обратимого блокирования е-аминогрупп остатков лизина в исследуемом белке. Такую обратимую модификацию можно получить при трифторацетилировании [5], малеинировании [2] или цитраконилировании [4]. [c.111]

В серии публикаций Вейганд и сотр. предложили много методов и реагентов для трифторацетилирования аминокислот. Перенос ТФА-остатка из фениловых [145] и метиловых [137] эфиров трифторуксусной кислоты на а-аминогруппы ряда аминокислот и пептидов протекал с высокими выходами. Этот метод использовался также для ацилирования 14 связанных со смолой метиловых эфиров аминокислот [108], включавших серин, треонин, оксипролин и лизин. Случайное появление многочисленных газохроматографических пиков согласуется с неполным ацилированием ОН- или е-ЫНг-групп, тем не менее в другой работе [66] метиловые эфиры ТФА-аминокислот (включая оксиаминокислоты и триптофан, но не аргинин, гистидин и цистин) успешно хроматографировали после ацилиро-вания по аналогичной методике. [c.108]

Так как для ГЖХ-анализа необходимо большое количество стандартных соединений, которые, как правило, нельзя купить и нужно синтезировать, то следующее важное преимущество трифторацетильной группы состоит в том, что это обычно используемая защитная группа в пептидной химии. Если трифторацетильная защитная группа применена для синтеза, то образующиеся метиловые эфиры можно непосредственно использовать в качестве пептидов-стандартов для газохроматографического анализа. Если в синтезе применяется хорошо известная карбобензоксигруппа, ее следует заменить на трифторацетиль-ную действием трифторуксусной кислоты [14], хотя даже метиловые эфиры карбобензоксидипептидов пригодны для ГЖХ [15]. Интерес могли бы представлять и некоторые другие производные, но так как до настоящего времени в достаточной степени исследовали лишь N-ТФА-производные пептидов, они и буа,ут рассматриваться в этой главе. Трифторацетилирование проводят или метиловым эфиром трифторуксусной кислоты с триэтилами-ном в слабощелочном растворе [10], или трифторуксусным ангидридом [16]. В этих же условиях вместе с а-аминогруппой три-фторацетилированию подвергается вторая аминогруппа в боковой цепи лизина и орнитина. [c.147]

Анализ аминокислотной последовательности интересующего пептида методом ГЖХ базируется на частичном гидролизе (предпочтительно кислотном) в концентрированой соляной кислоте [10, 18] или 8,5 н. растворе хлористого водорода в абсолютном метаноле, проводящемся в запаянной ампуле при 70 °С в течение 5—17 ч [6,29]. В ходе деградации получаются все аминокислоты, а также возможные пептидные фрагменты от дипептидов до олигопептидов. Ясно, что они образуются не в одинаковых количествах, поскольку пептидные связи сильно отличаются по чувствительности к кислотному гидролизу. Если частичный гидролиз проводится в метанольном растворе хлористого водорода, продукты деградации получаются в виде хлоргидратов соответствующих эфиров для дальнейшего хроматографического анализа они нуждаются только в трифторацетилировании. [c.164]

Вследствие относительно высокой упругости паров соединений, содержащих фтор [50], газо-жидкостная хроматография применяется для разделения К-ТФА-эфиров ди-, три- и тетрапептидов, Газо-хроматографический анализ различных летучих производных коротких пептидов проводился рядом автором [51—56]. Бименом и Веттером, например, осуществлено хроматографическое разделение N-aцeтилиpoвaнныx аминоспиртов и полиаминов, полученных из лейцил-аланина, глицил-фенилаланина, фе-нилаланил-глицина, лейцил-аланил-пролина и лейцил-аланил-глицил-лейцина с последующим масс-спектрометрическим определением последовательности аминокислот в пептидных цепях [53]. Однако наибольшего успеха удалось достигнуть при применении, как и в случае разделения аминокислот, К-трифторацетилирован-ных метиловых эфиров (рис. 9). Указанный метод, по-видимому, имеет ограниченное применение при исследовании структуры пептидов [64] и степени рацемизации при их синтезе [55]. [c.267]

I Еще более важным, чем этерификация кислородсодержащих I соединений, является трифторацетилирование азотистых соеди-I нений. Этим способом можно временно блокировать амино-I группу IB аминокислотах, что является важным вопомогательным I средством при синтезе пептидов. Для ацилирования применяют I безводную трифторуксусную кислоту [785] и даже чаще ее ангидрид [72, 782, 783], Для той же цели служит и S-этиловый эфир трифтортиоуксусной кислоты [671]. В то время, как этот эфир ацилирует в щелочной среде аминогруппу диаминокислот в 1)- лоложени1И, трифторуксусный аигидрид в трифторуксусной кислоте ацилирует преимущественно аминогруппу в а-положении [671, 782] [c.212]