Разделение влияние воды при адсорбционной хроматографии

Эта классификация основана на характере сил, действующих между растворенными веществами и твердой или жидкими фазами, с которыми они соприкасаются. На практике обычно разделение веществ протекает по смешанным механизмам. Адсорбционная хроматография сопровождается распределительной при ТСХ на слабоактивных сорбентах в элюентах, содержащих воду. Распределительная и ионообменная хроматография могут сопровождаться адсорбционной. На разделение по адсорбционному механизму может оказывать влияние структура пор адсорбента [c.341]

В жидкостно-адсорбционной хроматографии наряду с поверхностными свойствами адсорбента на результаты разделения оказьшает влияние и пористость его структуры. Удельная поверхность определяет емкость адсорбента. Для удовлетворительного разделения достаточно, чтобы адсорбент имел поверхность 50 м /г. Но возможно хорошее разделение и при меньшей поверхности. В частности, поверхностно-пористые материалы, находящие все более широкое применение в жидкостной хроматографии, имеют уде,льную поверхность 0,65-14,0 м /г [6]. Это позволяет провести хроматографическое разделение с высокой эффективностью, но из-за малой емкости таких адсорбентов приходится работать с очень малыми пробами и соответственно с высокочувствительными детекторами. Удельная поверхность не определяет селективность адсорбента. В самом деле, с увеличением поверхности адсорбента увеличивается количество адсорбированного вещества, но для всех веществ это изменение будет одинаковым, и поэтому селективность не изменится. Размер пор сильнее влияет на свойства адсорбента. Относительная доля свободных и реактивных гидроксильных групп на поверхности силикагеля тесно связана с размером пор адсорбента. Широкопористый силикагель имеет большую долю свободных ОН-групп, а поверхность узкопористого силикагеля покрыта в основном реактивными и связанными гидроксильными группами. Это различие в структуре поверхности узко- и широкопористых силикагелей достаточно, чтобы повлиять на относительную адсорбцию различных соединений. Линейная емкость силикагеля и ее изменение в процессе дезактивации также зависят от размера пор адсорбента (см. рис. 5 . Объясняется это тем, что поверхность узкопористых силикагелей более гетерогенна, и поэтому, несмотря на большую удельную поверхность адсорбенты этого типа обладают меньшей линейной емкостью. Добавление воды к активным образцам быстро делает поверхность широкопористого силикагеля однородной линейная емкость узкопористых силикагелей повышается в процессе добавления дезактиватора. [c.24]

В адсорбционной хроматографии на полярных сорбентах (например на силикагеле) в качестве основы подвижной фазы используют, как правило, неполярный алифатический углеводород, чаще всего н-гексан или н-гептан. Для получения требуемой полярности подвижной фазы добавляют более полярный растворитель, например метиленхлорид или хлороформ. В качестве другого компонента, имеющего влияние на удерживание разделяемых веществ, в подвижную фазу добавляют некоторые из алифатических спиртов (метанол, этанол, изопропанол),причем добавляют сравнительно малое количество — не более 1%. Аналогичное спиртам влияние имеют следовые количества воды (до 0,1%). В этом случае, однако, возникают затруднения, связанные с приготовлением подвижной фазы с определенным количеством такой добавки и поддержанием в ней постоянного состава (система должна быть совершенно уравновешена, ина-le вода может сорбироваться на стационарной фазе, и состав подвижной фазы в поцессе разделения будет изменяться). Некоторые авторы отдают предпочтение применению в качестве модификатора подвижной фазы простых эфиров, в частности метил-трег-бутилэфира, который имеет преимущество перед диэтиловым эфиром с точки зрения техники безопасности. [c.248]

В связи с быстрым развитием химии белка и белкового обмена потребовались новые, точные методы определения аминокислот с затратой очень небольших количеств исследуемых объектов и времени. Метод распределительной хроматографии на колонке не всегда удовлетворял этим требованиям. Используемый инертный носитель, чаще всего силикагель, проявлял адсорбционные свойства, что оказывало неблагоприятное влияние на разделение аминокислот, а методика таких работ была очень трудоемкой. В 1943 г. А. Мартин, Р. Синдж, Р. Консден и А. Гордон использовали для анализа малых количеств аминокислот фильтровальную бумагу. В этом случае фильтровальная бумага явилась носителем неподвижной водной фазы. Для разделения смеси веществ они наносили на полосу фильтровальной бумаги маленькую каплю исследуемого раствора, на небольшом расстоянии от края. Затем каплю раствора подсушивали, и этот конец бумаги помещали в растворитель так, чтобы нанесенная капля была несколько выше поверхности растворителя. Растворитель (обычно органический растворитель смешанный с водой) под действием капиллярных сил поднимался вверх по полосе бумаги как только подвижная фаза подходила к месту нанесения смеси веществ, происходило распределение отдельных компонентов смеси мел ду подвижной и неподвижной фазами, основанное на различии их коэффициентов распределения. Все вещества, у которых величина коэффициентов распределения различалась хотя бы незначительно, образовывали отдельные зоны (пятна) на полоске бумаги за счет многократного повторения акта распределения дтежду двумя фазами. [c.79]

В распределительной хроматографии неорганических ионов в качестве твердых носителей для полярных обычно водных неподвижных фаз пригодны следующие материалы оксид алюминия, силикагель, силанизован-ный силикагель, целлюлоза и полиамиды. Во многих случаях при разделении указанным методом отчетливо наблюдается влияние адсорбции. В таких случаях установить характер разделения, т. е. решить, с каким типом хроматографии — адсорбционной или распределительной — мы имеехм дело, можно лишь исходя из содержания воды в подвижной фазе. [c.21]