Антрон проба

Тревельян и Гаррисон [14] применили его для определения углеводов дрожжей. Наконец, в последнее время антрон начинают использовать также и для определения углеводов в растительном материале [15]. Антрон является высоко специфичным реактивом на углеводы. Он дает положительную реакцию (зеленая окраска) не только с моно- и дисахаридами, но и с различными полисахаридами и производными сахаров. Чтобы охарактеризовать степень чувствительности реакции с антроном, достаточно упомянуть, что этот реактив при использ1вании его для онределения крахмала, является в 40 раз более чувствительным, чем иод [12]. Антроновый метод дает возможность определить сахара в пределах 20—200 мкг в пробе. [c.428]

Для определения содержания углеводов в исходном и про-гидролизованном остатках с бстрата используют ряд методов с применением концентрированной серной кислоты фенол-серно-кислый, орцин-сернокислый, антроновый [56]. Наиболее часто употребляемый и дающий более стабильные результаты — антроновый метод. Он основан на исчерпывающем гидролизе углеводов в концентрированной кислоте, образованием в условиях реакции производных фурфурола, которые при взаимодействии с антроном дают окрашенный продукт. Метод достаточно чувствителен и позволяет регистрировать до 10 мкг/мл сахаров в пробе. [c.134]

Определение глюкозы. В широкие пробирки, стояш,ие во льду, помещают по 2,5 мл исследуемого раствора, содержащего 10—100 мкг глюкозы, и при встряхивании приливают по 5 мл свежеприготовленного раствора антрона. Пробы тщательно перемешивают и ставят в водяную баню при 90° С. Через 10 мин пробы охлаждают в бане с ледяной водой и развившуюся зеленую со слабым синеватым оттенком окраску фотометрируют при 620 нм (окраска стабильна при комнатной температуре в течение нескольких часов). Одновременно с исследуемыми растворами ставят контрольную пробу с дистиллированной водой и со стандартным раствором несколько проб (с различными количествами глюкозы) для построения калибровочного графика. [c.24]

Углеводы открывают при помощи следующих проб с тетразолием (41), . антроном (5), с ионом меди (И) (10), с хлорным железом и роданидом (17), с йодной кислотой (30), пробы Молиша (25) и с фенилгидразином (32). Если имеются указания на присутствие восстанавливающего сахара, то пробу с фенилгидразином проводят согласно прописи для этой пробы (32) или по методике, описанной в настоящем разделе. Если восстанавливающие сахара отсутствуют, а проба на растворимость указывает на присутствие полисахарида, то несколько миллиграммов неизвестного вещества суспендируют в 1 мл воды и обрабатывают каплей насыщенного водного раствора йода. Крахмал дает синюю окраску, а гликоген и высшие декстрины— красную инсулин и низшие декстрины не дают окраски. Если установлено присутствие ди- или полисахарида, то его гидролизуют кипячением в 2—3 мл воды и 0,1 лгл разбавленной соляной кислоты в течение 5 мин. и затем раствор нейтрализуют и испытывают на присутствие восстанавливающих сахаров. Другие пробы на углеводы были описаны Фейглем [861 Девор [1971 видоизменил пробу Молиша путем сульфирования 1-нафтола Клейн и Вейс-ман [198] описали цветную реакцию на гексозы в присутствии пентоз, используя в качестве реагента хромотроповую кислоту. Хроматографический метод описан на стр. 447 . [c.444]

По данным зависимости оптической плотности растворов шкалы от концентрации строят калибровочный график, с помощью которого определяют количество антрона в пробе. [c.194]

Отмеривают в две пробирки по 0,5 мл безбелкового фильтрата крови и в две другие — по 0,5 мл содержимого контрольных проб. Добавляют во все пробирки по 1 мл концентированной серной кислоты, отмеривая кислоту с помощью мерного цилиндра, и по2 мл антроно-вого реактива. Содержимое пробирок аккуратно перемешивают во избежание разбрызгивания. Смесь при этом сильно разогревается. Пробирки быстро опускают в кипящую водяную баню на 10 мин, предварительно закрыв пробирки кусочками фольги вместо пробок. [c.133]

Через 20 минут или больше измеряют в фотоколорпметре при 625 гп(г против холостого опыта, содержащего воду, антрон и серную кислоту. Если нет фильтра с максимумом при 625 Ш(х, то годятся фильтры в области между 580—670 т х. Если окрашивание слишком сильное, можно после охлаждения развести пробу 75%-ной Н2504. Цвет стойкий в течение нескольких часов. [c.220]

Реактивы. 0,2%-ный раствор антрона [0,9175 г х. ч. антрона помещают в мерную колбу на 250 мл, добавляют 100—150 мл серной кислоты, выдерживающей пробу Савалля (ГОСТ 4209—78), или X. ч. серной кислоты (ГОСТ 4204—77) и перемешивают до полного растворения. Объем раствора в колбе доводят до метки серной кислотой и вновь перемешивают. Приготовленный раствор выдерживают при комнатной температуре в течение 4 ч в темном месте, после чего реактив готов к употреблению].- [c.143]

Прямой метод. В пробирки, содержащие 25—100 мг ткани, 1 мл гомогената или безбелкового раствора, добавляют по 3 мл 30%-ного раствора едкого калия. Пробы закрывают пробками и помещают в кипящую водяную баню на 20 мин. После этого раствор охлаждают до комнатной температуры, содержимое пробирок количественно переносят в мерные колбочки на 25—50 мл в зависимости от содержания гликогена в пробах (1 мл получаемого раствора должен содержать от 3 до 30 мкг гликогена) и объем доводят водой до метки. В широкие пробирки берут по 2,5 мл полученного раствора, ставят их в лед, добавляют при встряхивании 5 мл раствора антрона, тщательно перемешивают, погружают на 10 мин в водяную баню при 90° С, затем охлаждают и фотометрируют при 620 нм. [c.24]

Определение гликогена. Исследуемую пробу предварительно обрабатывают щелочью для разрушения простых сахаров. При высоком содержании гликогена в пробе определение проводят прямым методом, т. е. непосредственно из раствора. Прямой метод применяется при определении гликогена в ткани печени, в опытах с добавлением гликогена. Если содержание гликогена в пробе мало, то перед определением его осаждают спиртом — непрямой метод. Предварительное отделение гликогена в этом случае необходимо потому, что окраску с антроном дают также и продукты гидролиза белка, и при небольших количествах гликогена это не может не сказаться на результатах определения. [c.24]

Раствор антрона хранят при температуре 6—8° С в темном месте и используют для анализа в течение 10—12 сут при приготовлении на кислоте, выдерживающей пробу Савалля, и в течение 2 сут при приготовлении на х. ч. Н2504. [c.144]

В небольшую пробирку, содержаш,ую приблизительно 1 мг исследуемого вещества, приливают 1 мл воды и 2 мл 0,2%-ного раствора антрона в концентрированной Н2504. Конечная концентрация Нп504 в исследуемом растворе всегда должна быть выше 50% в противном случае антрон выпадает из раствора и образует молочную суспензию. Тепло, выделяющееся при разбавлении серной кислоты, необходимо для протекания реакции. В присутствии углеводного материала появляется зеленая окраска, интенсивность которой быстро увеличивается, пока раствор не станет темным сине-зеленым. Для подтверждения пробы раствор можно разбавить ледяной уксусной кислотой или 50%-ной Н2504. В отсутствие углеводов, но в присутствии других органических соединений серная кислота часто вызывает коричневую окраску. Фурфурол с антроном дает зеленую окраску, но при разбавлении кислотой выпадает тяжелый коричневый осадок. Целлюлоза, крахмал, декстрин, гуммиарабик, трагакант, агар-агар, пектин, альгин, простые и сложные эфиры целлюлозы дают положительную реакцию. [c.187]

Анализы фракций обычно можно выполнить, применяя модифицированную методику с антроном [5]. Аликвотные пробы фракций объемом [c.241]

Раствор дает отрицательную нафторезорцин-уроново-кис-лотную пробу. Согласно данным количественною анализа на содержание восстанавливающих сахаров при использовании антрона, в нем содержится 0,85 г глюкозы. [c.459]

Проба с антроном [8—12]. Реактив представляет собой 0,1%-ный раствор антрона в концентрированной серной кислоте. В пробирку наливают 0,5 мл реактива и осторожно наслаивают капиллярной пипеткой 0,5 мл водного раствора или суспензии 1 лг исследуемого вещества. Проба считается положительной, если после смешения появляется темно-синее до сине-зеле-ного окрашивание. Конечная концентрация серной кислоты не должна быть менее 65%. Было высказано предположение, что реакция проходит через первоначальную стадию образования фурфурола или одного из его производных, а именно 5-оксиметилфурфурола. Последний образуется из сахара при отщеплении молекулы воды за счет гидроксильных групп второго и третьего атомов углерода, причем гидроксил остается у второго атома углерода. Это хорошо согласуется с тем, что фенилозазон Е)-глюкозы, фенилозо-триазол О-глюкозы, О-глюкозон и 2-дезоксирибоза дают отрицательную пробу, в то время как с фенилгидразоном О-маннозы проба положительна. [c.386]

Для получения градуировочной кривой в ряд пробирок вводят по 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 мл стандартного раствора, что соответствует 0,035 0,07 0,105 0,140 0,175 мг глюкозы. Во всех пробах объем доводят водой до 0,5 мл. Одновременно в 2 контрольные пробирки наливают по 0,5 мл воды. Далее во все пробирки прибавляют концентрированную серную кислоту, антроно-вый реактив п продолжают обработку, как и пробы с кровью. Фотометрируют пробы против компенсационной жидкости из контрольных пробирок. [c.29]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология