Антроновый метод определения

Ход определения. Во многих объектах углеводы находятся как в растворимой (сахара, олигосахариды, декстрины), так и в нерастворимой форме (крахмал). Поэтому для определения общего содержания сбраживаемых углеводов крахмал переводят в растворимые продукты (декстрины и сахара) и в растворе определяют суммарное содержанпе углеводов антроновым методом. [c.144]

Определение общего количества углеводов антроновым методом [c.293]

Определение суммарного содержания сбраживаемых углеводов и нерастворенного крахмала. По этому методу определяют общее содержание сбраживаемых углеводов в бражке и барде, содержащих крахмал, декстрины, сахара и нерастворенный крахмал. Для этого проводят вначале гидролиз крахмала в 0,4%-ном растворе серной кислоты и в растворе определяют общие углеводы антроновым методом. [c.150]

Количественное определение сахаров по антроновому методу. Химизм реакции -см. с. 198. [c.225]

Тревельян и Гаррисон [14] применили его для определения углеводов дрожжей. Наконец, в последнее время антрон начинают использовать также и для определения углеводов в растительном материале [15]. Антрон является высоко специфичным реактивом на углеводы. Он дает положительную реакцию (зеленая окраска) не только с моно- и дисахаридами, но и с различными полисахаридами и производными сахаров. Чтобы охарактеризовать степень чувствительности реакции с антроном, достаточно упомянуть, что этот реактив при использ1вании его для онределения крахмала, является в 40 раз более чувствительным, чем иод [12]. Антроновый метод дает возможность определить сахара в пределах 20—200 мкг в пробе. [c.428]

Содержание редуцирующих сахаров рассчитывают по калибровочной кригзон, составленной гю стандартным рястворам глюко. зы (см. н ряботе Количественное определение сахяров по антроновому методу ). [c.226]

Широкое применение для определения моносахаридов находит антроновый колориметрический метод [61]. В пробирки, погруженные в баню с холодной водой (10—15°С), наливают по 10 мл антронового реагента (0,20 г антрона в 100 жл конц. серной кислоты) и затем осторожно по стенке приливают по 5 мл исследуемого раствора (20—40 мкг моносахарида в 1 мл). После добавления всего количества моносахаридов пробирки быстро встряхивают и опускают в баню с холодной водой. Затем пробирки нагревают 16 мин на кипящей бане и охлаждают. Измеряют оптическую плотность при 625 ммк по отношению к дистиллированной воде. [c.77]

Для определения содержания углеводов в исходном и про-гидролизованном остатках с бстрата используют ряд методов с применением концентрированной серной кислоты фенол-серно-кислый, орцин-сернокислый, антроновый [56]. Наиболее часто употребляемый и дающий более стабильные результаты — антроновый метод. Он основан на исчерпывающем гидролизе углеводов в концентрированной кислоте, образованием в условиях реакции производных фурфурола, которые при взаимодействии с антроном дают окрашенный продукт. Метод достаточно чувствителен и позволяет регистрировать до 10 мкг/мл сахаров в пробе. [c.134]

Ход определения. Для анализа отрубей (поверхностной культуры) берут среднюю пробу и отвешивают на аналитических весах 3 г (или 10 г культуры). Навеску количественно переводят в мерную колбу на 200 мл и гидролизуют крахмал в 0,4%-ной серной кислоте. После гидролиза и осветления от фильтрата отбирают 2 мл при анализе отрубей и 5 мл при анализе поверхностной культуры грибов. Это количество в мерной колбе разбавляют до объема 100 мл дистиллированной водой. В разбавленном растворе определяют углеводы антроновым методом. [c.149]

Как показали наши данные, определение сахаров с антроновым реактивом дает наиболее надежные результаты в том случае, когда для колориметрирования применяют экстракты, полученные при элюировании сахаров из бумаги или растворы чистых сахаров. Сравнительные определения сахаров в очищенных экстрактах из растительного материала (листья сахарной свеклы) с применением антрона и по методу Бертрана показало, что метод с применением антрона по сравнению с методом Бертрана дает весьма завышенные показатели (превышение при.мерно на 40—45%). Это происходит, по-видимому, вследствие того, что с этим реактивом реагируют не только редуцирующие сахара, но также и фосфатные эфиры сахаров, гликозиды, декстрины и другие соединения, содержащие в своем составе молекулу сахара, которые не определяются по Бертрану непосредственно или после 7-минутного гидролиза, или определяются лишь частично. [c.430]

Количественные методы определения сахаров, основанные на образовании окрашенных соединений при кислотной деградации, в настоящее-время более распространены, чем окислительные . Особенно обширное-применение нашли реакции сахаров с антроном и фенолом в концентрированной серной кислоте. Оба метода используются для количественного определения сахаров после элюирования соответствующих зон с бумажных хроматограмм, а также для определения сахаров в разнообразных объектах, в том числе гликозидах и полисахаридах, подвергающихся гидролизу в процессе реакции. По-видимому, фенольный метод, удобнее антронового, так как меньше зависит от посторонних примесей. [c.414]

Работа 74. Определение сахара в крови по методу Рое с антроновым реактивом [c.132]

Антроновый метод определения содержания глюкозы позволяет определять содержание истинных сахаров в том числе и полиглюкозидов. Норма содержания глюкозы по этому методу 60—100 мг/дл (3,3—5,5 ммоль/л). [c.132]

Ход определения. Для анализа берут в стаканчике 25 г полупродукта и переводят его в мерную колбу на 200 мл, 75 мл 0,53%-ного раствора серной кислоты. Получают 100 мл смеси, в которой содержится 0,4 % Н2504. В исследуемом растворе проводят гидролиз крахмала. Фильтрат гидролизата разбавляют в 10 раз (10 мл на 100 мл). В разбавленном растворе определяют общее содержание углеводов антроновым методом. [c.150]

Содержание и скорость обновления общей фракции липидов определяли по методу Фолча и др. [13] и Сперри [14] с внесенными в нашей лаборатории изменениями 1151. Тарановой [16] был разработан метод выделения и очистки цереброзидов и ганглиозидов, в осадке которых производили определение их удельной активности. Количество извлеченных цереброзидов определяли по галактозе [17], содержание которой в цереброзидах равно 22,2%. Содержание извлеченных ганглиозидов определяли антроновым методом, исходя из того факта, что содержание гексоз в ганглиозидах равняется 24% [4]. [c.166]

Более подробно были изучены полисахариды, входящие в состав комплексов. В кислотных гидролизатах изучаемых фракций проводили количественное определение сахаров. Для определения сахаров использовали водные элюаты, полученные из непроявлен-ных участков хроматограммы, соответствующих определенным сахарам. Гексозы определяли антроновым методом (7], пентозы — с помощью окраски орцином [8], гексозамин — методом Элсона и Моргана [9]. [c.289]

Колориметрический метод определения осахаривающей активности ферментов (метод ВНИИПрБ). Для определения осахаривающей активности используют ту же реакционную среду, в которой определяют а.милолитачеокую активность ферментов. Устанавливают в ней содержание растворимых в спирте сахаров -(в единицах глюкозы), образовавшихся в процессе ферментативной реакции, которые определяют в фильтрате после осаждения высокомолекулярных углеводов спиртом с применением антронового колориметрического метода. [c.165]

Методика опыта. В пробирки вносят по 3 мл антронового реактива, охлажденного во льду, и осторожно по стенке приливают 1 м/ водного раствора испытуемого сахара (глюкозу, галактозу и т. д.) Содержимое пробирок быстро перемешивают и помещают в водньи термостат. Для каждого сахара соблюдают определенную установленную температуру и продолжительность обработки глюкоза при 90° С — 16 мин манноза при 90° С — 15 мин галактоза при 90° С — 8 мин рамноза при 70° С — 13 мин фруктоза при 60° С — 10 мин. При на гревании следят, чтобы в пробирки не попала вода, которая мешае колориметрированию, создавая муть. По окончании нагревания пробирки быстро охлаждают во льду и содержимое колориметрируют сравнивая с контролем на бумагу. Колориметрирование проводя около 1 ч на фотоэлектроколориметре с красным светофильтром, толщи на кювет 0,5 см. Граница определения каждого сахара 10—100 мкг Количество сахара рассчитывают по определенной для него кривор рис. 37). Относительная погрешность этого метода составляет 5% Метод требует тщательного соблюдения разработанного режима. [c.160]

Настоящее руководство является плодом многолетней работы П. А. Розенберг и Н. К. Бялко в биохимической лаборатории Института гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР. Изучение различных биохимических изменений в организме людей или экспериментальных живогных, обусловленных. воздействием многообразных профеосиональных токсических факторов, представляет основное направление данной лаборатории. Этот профиль и определил характер и структуру книги. В ней приводятся методы исследования биологических субстратов, т. е. не только крови и мочи, но и тканей экспериментальных животных. Это обстоятельство является чрезвычайно существенным, так как исследование тканей имеет свои особенности, а соответствующее руководство, например Н. П. Мешковой и С. Е. Северина, уже 15 лет не переиздается. Из многих методов исследования авторы выбрали те, которые, являясь достаточно чувствительными, оказываются наименее трудоемкими. К таким можно отнести методику определения сахара в крови с антроновым реактивом, который значительно проще, чем классический метод Хагедорна, определение хлоридов непосредственным титрованием безбелкового фильтрата крови азотнокислым серебром и др. Это является отличительным признаком данной книги. [c.3]

Клетки собирают центрифугированием при 5000— 10 000 д в течение 15 мин, ресуспендируют в равном объеме физиологического раствора и снова центрифугируют. Еще раз промывают клетки, центрифугируют и лиофилизуют их (разд. 12.2.1). 100 мг сухих клеток помещают в пирексовую или кимаксовую пробирку, имеющую завинчивающуюся крышку с тефлоновой прокладкой, вносят в нее 1 мл 30%-ного КОН и инкубируют в паровой или кипящей бане в течение 3 ч при 100 °С. Если лиофилизация нецелесообразна, суспендируют 500 мг сырых клеток в 0,6 мл 50%-ного (вес/объем) КОН и нагревают при 100°С для солюбилизации гликогена. Охлаждают пробирку, не открывая ее. После охлаждения добавляют 3 мл дистиллированной воды и 8 мл этанола для осаждения гликогена. Центрифугируют при 10 000 д в течение 15 мин и осадок промывают 8 мл 60%-ного охлажденного этанола путем центрифугирования. Высушивают осадок в вакуумном эксикаторе. В промытом осадке можно определить глюкозу антроновым или фенольным методом (разд. 17.2.1 и 17.2.2). Можно также провести гидролиз для получения глюкозы и дальнейшего ее определения по глюкозооксидазной методике (разд. 17.2.3). Для полной экстракции гликогена из грамположительных клеток иногда требуется их механическое разрушение [9]. [c.299]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология