Гены овальбумина

Рис. 30.8. В хроматине 14-дневных клеток эритроидного ряда Р-глобиновый ген взрослого типа высокочувствителен к ДНКазе 1, ген эмбрионального Р-глобина чувствителен, а ген овальбумина нечувствителен. В 5-дневных клетках ген эмбрионального глобина высокочувствителен, ген глобина взрослого типа чувствителен, а ген овальбумина нечувствителен.

Многие эукариотические гены (может быть, даже большинство их) обладают весьма загадочной структурной особенностью, которая состоит в том, что в их нуклеотидную последовательность вставлен участок ДНК, не кодирующий аминокислотную последовательность полипептидного продукта. Эти нетрансли-руемые вставки прерывают строго кол-линеарное соответствие между нуклеотидной последовательностью остальных участков гена и аминокислотной последовательностью полипептида, кодируемого этим геном (рис. 27-29). Такие не-транслируемые участки ДНК в генах называют вставочными последовательностями, или нитронами, тогда как участки гена, кодирующие аминокислотную последовательность полипептида, называют экзонами. Хорошо известным примером может служить ген, кодирующий единственную полипептидную цепь яичного белка,-овальбумина. На рис. 27-29 видно, что в этом гене присутствуют шесть интронов, которые разделяют ген овальбумина на семь экзонов. Видно также, что интроны в этом гене гораздо длиннее экзонов-суммарная длина всех интронов составляет 85% общей длины ДНК гена. За немногими исключениями, все изученные к настоящему времени эукариотические гены содержат интроны, которые различаются по числу, по месту расположения, а также по тому, какую часть общей длины гена они занимают. Например, ген сывороточного альбумина содержит 6 интронов, ген белка кональбумина куриных яиц -17 интронов, а ген коллагена-свыше 50 интронов. Исключение составляют гены гистонов, которые, по-видимому, не содержат интронов. [c.884]

Рис. 26.10. Структура гена овальбумина куриного яйца. Интроны (некодирующие участки) показаны желтым цветом, а экзоны - синим.

Нуклеосомы отсутствуют и в области потенциально активного промотора РНК-полимеразы II, даже когда транскрипция еще не началась. Так организована область вблизи начала транскрипции ранних генов ЗУ 40 (она же является областью начала репликации). Не обнаруживаются нуклеосомы и в регуляторных участках генов овальбумина кур, активных в клетках яйцевода, а также глобинов ых генов. [c.254]

Тот факт, что только небольшая часть генома представлена в виде гяРНК (скажем, менее 5% в случае клеток млекопитающих), указывает на первостепенную роль регуляции транскрипции в экспрессии генов. Нам известно, что некоторые гены транскрибируются только в тех клетках, где они экспрессируются. Два примера такого рода-гены глобина (которые транскрибируются только на определенных стадиях развития клеток эритроидного ряда) и гены овальбумина (которые транскрибируются только при воздействии эстрогенов на яйцеводы кур). Ко- [c.336]

Основные эффекты эстрогенов и прогестинов обусловлены их способностью присоединяться к внутриклеточным рецепторам. Образующийся гормон-рецепторный комплекс связывается со специфическими участками хроматина или ДНК, что приводит к изменению скорости транскрипции специфических генов. Большинство данных по этому вопросу было получено при изучении механизма, с помощью которого эстрадиол и прогестерон стимулируют транскрипцию генов яичного белка птиц (в частности, генов овальбумина и кональбумина). Точный механизм гормональной активации транскрипции генов интенсивно изучается. [c.243]

Рис. 27-29. Вставочные последовательности (интроны) в двух эукариотичеетсих генах. Ген овальбумина содержит шесть интронов (они обозначены серым цветом и буквами А-Р) и, следовательно, разделен на семь участков, или экзонов (указаны красным цветом и цифрами

Другие гены могут иметь большее количество интронов. Два примера приведены на рис. 20.17. Гены овальбумина и кональбумина курицы содержат соответственно 8 и 17 экзонов. В результате суммарные длины этих генов составляют 7500 и 10 000 п.н. по сравнению с длинами соответствующих им мРНК, равными 1859 и 2500 нуклеотидных оснований. [c.253]

Оказывается, что расщепление до кислоторастворимого состояния только 10% общей ДНК приводит к исчезновению более 50% ДНК активных генов. Следовательно, можно предположить, что при таком расщеплении происходит преимущественная деградация активных генов. Исчезновение активных генов можно подтвердить прямым сравнением судьбы двух генов, активного и неактивного. На рис. 30.8 показано, что происходит с генами (3-глобина и с геном овальбумина в хроматине, выделенном из куриных эритроцитов (в этом хроматине гены глобинов экспрессируются, а ген овальбумина неактивен). Рестрикционные фрагменты, соответствующие генам (3-глобина, быстро теряются, тогда как фрагменты, представляющие ген овальбумина, расщепляются незначительно. (Ген овальбумина фактически деградирует с той же скоростью, что и вся ДНК, хотя это и не следует из показанного на рисунке анализа ранних стадий реакции методом блотт-гибридизации. Противоположная картина наблюдается в ткани яйцевода, в которой преимущественно деградирует ген овальбумина, тогда как глобиновые гены устойчивы, как весь остальной хроматин. Это коррели- [c.382]

Таким образом, большая часть хроматина относительно устойчива к ДНКазе I и содержит неэкспресси-руемые гены (так же, как и другие последовательности). Гены овальбумина и глобинов становятся относительно чувствительными к ферменту специфически в тех тканях, в которых они экспрессируются. [c.382]

При исследовании вопроса о том, в равной ли мере сохраняется чувствительность к ДНКазе на протяжении всего домена, были получены некоторые расхождения в результатах отдельных опытов. В кластере (3-глобино вых генов цыпленка чувствительный домен тянется на 6-7 т.п.н. с 5 -конца кластера и по крайней мере на 8 т.п.н. с З -конца. Внутри самого кластера генов транскрибируемая область более чувствительна к ДНКазе I, чем ее нетранскрибируемые фланкирующие участки (которые называют участками промежуточной чувствительности.) Сходным образом ген овальбумина и родственные гены X и V могут находиться в домене, чувствительном к ДНКазе, который занимает около 100 т.п.н. Но в этом случае, по-видимому, нет каких-либо различий в чувствительности между кодирующей и некодирующей ДНК внутри домена. [c.382]

Разработанные сравнительно недавно методы работы с рекомбинантными ДНК (обсуждаемые в гл. 9) позволили сравнить нуклеотидные последовательности индивидуальных мРНК, кодирующих некоторые известные эукариотические белки, с соответствующими фрагментами последовательностей в хромосомной ДНК. Благодаря использованию этих методов в 1977 г. было сделано сенсационное открытие. Оказалось, что внутри кодирующих областей некоторых эукариотических генов содержатся нетранслируемые фрагменты последовательности. Так, некодирующие внутренние нуклеотидные последовательности были обнаружены в структурных генах р-цепей кроличьих и мышиных гемоглобинов, легких цепей иммуноглобулинов и куриного овальбуми-на (основного компонента яичного белка). На сегодняшний день ясно, что наличие внутренних некодирующих последовательностей является типичным, хотя и не обязательным свойством эукариотических генов. На карте структурной организации гена овальбумина (рис. 11.17) показано, как семь протяженных внутренних некодирующих участков последовательности (интронов) разделяют смысловую последовательность, кодирующую зрелую мРНК, на восемь фрагментов (экзонов). [c.55]

Размер транскриптов гена овальбумина, которые содержатся в ядрах клеток яйцевода, удалось определить с использованием высокорадиоактивных кДНК-зондов, полученных по овальбуминовой мРНК так, как [c.59]

Рис. 9-84. Первичный транскрипт гена овальбумина курицы. Для получения активной молекулы мРНК из него удаляется семь нитронов. 5 -сайты сплайсинга (до-норные сайты) обозначены буквой В. а З -сайты сплайсинга (акцепторные сайты) обозначены буквой А

Впервые влияние инсулина на транскрипцию генов было обнаружено при изучении механизма регуляции ФЕПКК, однако в настоящее время известны и другие примеры. Более того, представляется вероятным, что регуляция синтеза мРНК—главный эффект инсулина. Инсулин оказывает влияние на синтез многих специфических мРНК (табл. 51.4), в том числе на пока не идентифицированные мРНК в печени, жировой ткани и в мышцах (скелетных и сердечной). Доказано действие инсулина на транскрипцию генов овальбумина, альбумина и казеина. [c.262]

Сайленсеры выявляются по активации транскрипции, после того как из клонированного сегмента генома удаляют определенную последовательность. В настоящее время описан целый ряд последовательностей такого типа. Например, сайленсер перед геном овальбумина кур содержит участок связывания глюкокортикоидного рецептора. В присутствии гормона достигается высокий уровень [c.75]

В лаборатории Б, Ройзмана в 1983 г. в составе бактериальной плазмиды состыковали промотор гена а4 HSV-1 и кодирующую последовательность хромосомного гена овальбумина курицы. Экспрессия гибридного гена была подвержена ташй же регуляции, как и экспрессия вирусного гена 4. На следующем этапе (1984 г.) в той же лаборатории в ген тимидинкиназы вируса простого герпеса рекомбинационно встроили ген-эквивалент поверхностного антигена S вируса гепатита В, объединенный с промотором либо гена а4, либо гена tk HSV-1. Отобранные по фенотипу TK гибридные варианты HSV-1 направляли эффективный синтез HBsAg, который секретировался из клеток и формировал специфичные частицы диаметром около 22 нм. Причем в зависимости от использованного промотора гибридный ген S экспрессировался или как ранний ген, или как ген -типа. [c.386]

На рис. 7.2 представлены данные, касающиеся гена овальбумина курицы. Овальбумин-это белок, состоящий из одной полипептидной цепи (43500 Да) он синтезируется в яйцеводе курицы после стимуляции стероидным гормоном эстрогеном (или прогестероном) и накапливается в яичном белте. У кур-несущек стимуляция гормоном происходит в естественных условиях, а у цыплят [c.318]

Используя две космиды с перекрывающимися последовательностями, можно построить детальную генетическую карту области овальбуминового гена цыпленка. Сегмент размером 46 т.п.н. помимо гена овальбумина содержит два родст- 1 венных гена, X и Y, с неизвестными функциями. [c.334]

Определение числа копий. Одна полоска содержит Есо Rl-гидролизат 30 мкг ДНК цыпленка, другие - клонированный сегмент гена овальбумина длиной 2,35 т,п,н, в количествах, эквивалентных 0,5 1 2 и 5 копиям (на гаплоидный геном) овальбуминового гена в общем количестве, представленном в 30 мкг ДНК цыпленка. Электрофорез проводили в агарозном геле. На рисунке дано схематическое изображение радиоавтографа, полученного после отжига ДНК, перенесенной на фильтр, с Р-меченным фрагментом размером 2,35 т,п,н. Плотность полоски с ДНК цыпленка соответствует одной гаплоидной копии. [c.339]

Еще один прерывистый эукариотический ген-ген овальбумина куриного яйца, который состоит из восьми экзонов, разделенных семью длинными интронами (рис. 26.10). Еще более удивителен ген ко-нальбумина он содержит не менее 17 экзонов. Общее свойство эюгпрессии этих генов-то, что их экзоны располагаются в мРНК и в ДНК в одной и той же последовательности. Таким образом, прерывистые гены, подобно непрерывным генам, колли-неарны своим полипептидным продуктам. [c.79]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология