Пресс Френча, разрушение

Клетки продавливают через маленькое отверстие под очень большим давлением они разрушаются под действием силы сдвига Ультразвуковые волны создают высокий локальный градиент давления в результате клетки разрушаются под действием напряжения сдвига и кавитации Разрушение клеточной стенки происходит под действием быстрой вибрации стеклянных шариков Действует так же, как и пресс Френча, но позволяет обрабатывать большие количества материала [c.40]

В общем наиболее распространенные физические методы разрушения клеток можно классифицировать следующим образом в порядке уменьшения их дезинтегрирующего действия пресс Хьюза > вибрационные мельницы>пресс Френча>ультразвук>растирание с окисью алюминия. По устойчивости к разрушению клетки различных микроорганизмов можно расположить в последовательности (в порядке уменьшения) дрожжи> >мицелий грибов>грамположительные кокки>грамположительные палочки>грамотрицательные палочки >галобактерии>-микоплазмы. [c.385]

Клетки разрушают с помощью ультразвукового дезинтегратора, механической мельницы или пресса Френча (разд. 5.1). Сразу же после разрушения суспензию [c.329]

Разрушение клеток и экстракция. Растительные клетки разрушаются труднее, чем клетки животных, из-за наличия у них целлюлозной оболочки. При их разрушении применяют следуюш ие методы механическое разрушение крупных клеток и отделение друг от друга мелких с помош ью лопастного гомогенизатора растирание в ступке с абразивом (происходит разрушение клеточных стенок за счет шероховатостей на ступке и пестике) использование пресса Френча (клетки продавливаются через маленькие отверстия под давлением). [c.50]

Соответствует ли метод разрушения клеток типу исследуемого организма Единой методики, которая давала бы хорошие результаты для всех типов бактерий, не существует. Например, один из возможных методов разрушения большинства грамотрицательных бактерий— продавливание клеток в прессе Френча — не очень эффективен по отношению к грамположительным коккам. Во встряхивающем гомогенизаторе Брауна полностью разрушаются клетки грамположительных кокков (Braun MSK shaker) и значительно повреждаются клетки грамотрицательных бактерий. [c.138]

Пресс Френча эффективен при разрушении грамотрицательных и некоторых грамположительных бактерий (особенно бацилл). Эндоспоры и грамположительные кокки в нем не разрушаются, для этих устойчивых клеток более действенно баллистическое разрушение или обработка лизоцимом. [c.142]

Опубликованы обзоры по различным физическим и химическим методам дезинтеграции бактериальных клеток [6, 22]. В них, особенно во втором, читатель найдет более подробную информацию, касающуюся применения этих методов. Из всех имеющихся средств эффективными для разрушения клеток бактерий (и дрожжей) являются пресс Френча или подобные ему устройства, вибрационные мельницы, ультразвуковые дезинтеграторы, некоторые ручные мельницы и пресс Хьюза. Большинство других устройств предназначено для специальных целей или же эффективно при обработке организмов, которые разрушаются легче, чем бактерии (например, ткани простейших или ткани животных). Наиболее полезный и эффективный химический способ дезинтеграции клеток включает использование литических агентов (таких, как лизоцим или лизоцим в сочетании [c.381]

Ячейка Френч-пресса (Френч-пресс) предназначена для разрушения микроорганизмов, основанного на перепаде давления в пробе от высокого (550—1400 атм) к атмосферному. Быстрое изменение давления взрывает клетки изнутри и таким образом разрушает их. Метод наиболее применим к суспензиям объемами от 10 до 30 мл разрушение меньших объемов сложно технически, а больших—-занимает много времени. Время, требуемое для разру-шенця одной порции клеток небольшого объема, обычно не превышает 10—15 мин. В перерывах необходимо тщательно промывать ячейку от предыдущей пробы и постоянно контролировать состояние полиэтиленового шарика, регулирующего на ячейке степень перепада давления. [c.136]

В большинстве экспериментов для выделения и определения внутриклеточных компонентов применяют различные методы разрушения микроорганизмов. Это могут быть ручные и механические гомогенизаторы, растирание клеток с абразивами, растирание замороженных клеток, перемешивание биомассы со стеклянными бусами. Наиболее полное разрушение клеток достигается в случае применения декомпрессионных методов (Х-пресс,Френч-пресс) или ультразвука. Реже применяют осмотический шок и метод замораживания-оттаивания. Описаны также комбинированные методы разрушения микроорганизмов, сочетающие обработку клеточных стенок ферментами с последующим осмотическим шоком полученных сферопластов (протопластов) или растиранием их в гомогенизаторе. [c.133]

Разрушение клеток с применением Х-пресса основано на том же принципе, что и на Френч-прессе, за исключением состояния разрушаемой суспензии. Перед разрушением приготовленную суспензию клеток в буфере замораживают в ячейке при —70° и затем продавливают через тонкую фильеру с помощью гидравлической системы. Микроорганизмы при этом подвергаются перепаду давления от 500 до 1000 атм и дополнительно абразивному действию кристалликов льда внутри клеток. Под действием давления [c.136]

В работах последних лет с хлоропластами шпината, разрушенными не детергентами, а пропусканием через пресс Френча, удалось дифференциальным центрифугированием отделить ламеллярные системы гран от ламелл стромы. Изучение локализации фотосистем в полученных фрагментах показало, что в исследованных хлоропластах тлеются две Ьотосистемы I. одна из которых связана с ламеллами стро-мы, а другая с ламеллами гран. Фотосистема II локализована только в гранах. Первая фотосистема I может сравнительно легко Оыть отделена от фотосистемы II при дифференциальном центрифугировании разрушенных хлоропластов, а вторая тесно ассоциирована с фотосистемой 11 и труднее от нее отделяется. Функция фотосистемы I в ламеллах стромы пока неизвестна, высказываются предположения [c.191]

Поскольку скорость седиментации частицы постепенно снижается по мере достижения ею той области градиента, где она имеет плотность одинаковую с плотностью раствора, для достижения равновесия центрифугировать требуется очень долго. Это особенно важно для маленьких мембранных везикул, таких, как хрома-тофоры, или для фрагментов цитоплазматических мембран клеток, разрушенных на прессе Френча, так как скорость седиментации этих частиц низка даже в отсутствие градиента. Если применять центробежные ускорения порядка 100 000—200 000 для более или менее хорошего разделения требуется не меньше 24 ч, а для полного — 72 ч. [c.150]

При разрушении клеток силами сдвига некоторые цитоплазматические мембраны сильно дробятся (вероятно, до небольших, открытых мембранных фрагментов) и их нельзя уже осаждать ультрацентрифугированием. Поэтому первую надосадочную цитоплазматическую фракцию (надосадочная жидкость I на рис. 5.1) инкубируют при 21 °С. При температуре выше температуры фазового перехода мембранных липидов крошечные фрагменты агрегируют, т. е. сливаются в мембранные фрагменты больших размеров, которые можно затем осадить [6]. В некоторых случаях неосаждаемая фракция мембран может составлять до 20—30% цитоплазматических мембран. Она образуется при разрушении клеток не только с помощью пресса Френча, но и при обработке их ультразвуком или даже при быстром лизисе протопластов или сферопластов. [c.159]

Существуют три группы прокариот, способных катализи ровать фотосинтетический перенос электронов, — это зеленые бактерии, пурпурные бактерии и цианобактерии (или сине-зеленые водоросли). Пурпурные бактерии разделяют на две группы Rhodospirilla eae (или несерные) и hroniatia eae (или серные). Цианобактерии способны катализировать нециклический перенос электронов (разд. 6.4), используя в качестве донора электронов воду, и в этом отнощении они сходны с хлоропласта-ми. Из перечисленных выше групп организмов наиболее интенсивно изучается биоэнергетика пурпурных бактерий. Это происходит по двум причинам. Во-первых, механическое разрушение этих клеток (например, при продавливании суспензии под очень высоким давлением через узкое отверстие в ячейке пресса Френча) позволяет получить замкнутые пузырьки внутренней мембраны, которые называют хроматофорами (рис. 1.7). Хроматофоры сохраняют способность к фотосинтетическому сопряжению и имеют ту же ориентацию мембраны, что и субмитохондриальные частицы. Они служат наиболее удобным объектом для изучения цепи переноса электронов и хемиосмотического сопряжения. Второе преимущество пурпурных бактерий состоит в том, что из них могут быть выделены так называемые реакционные центры— первичные фотохимические комплексы (разд. 6.2). [c.17]

Пигментные системы, а следовательно, и соответствующие фотосистемы, можно частично разделить при механическом разрушении хлоропласта (с помощью пресса Френча илн иод действием ультразвука) или путем обработки детергентами (например, дигитонином или ipnTOHOM Х-100). Частицы, обогащенные ФС I, содержат главным образом Хл а и реакционный центр Р 700, в то время как частицы, обогащенные ФС II, содержат Хл а и Хл Ь. В хлоропластах Сз-растений соотношение между общим количеством хлорофилла и количеством Р 700 составляет 300/1500/1. В частицах ФС I это соотношение равно 200/1. [c.66]

Клетки Е. oli могут быть лизированы ферментами, такими, как лизоцим, в сочетании с детергентами [12]. Можно использовать также и методы механического разрушения клеток (гидродинамические), например, с помощью Френч-пресса или гомогенизатора Мэнтон-Голина. Третья возможность — разрушение ультразвуком, но этот метод применяют только в случае небольших объемов растворов. [c.99]

Разрушение клеток с помощью высокого давления. Этот метод применяется в основном для разрушения микробных клеток. Для этой цели пользуются специальными прессами, например френч-прессом (Fren h Pressure), в котором создается давление до 10,4-10 Па. . - [c.39]

В подавляющем большинстве случаев в опытах по выделению рестриктаз для разрушения клеток используется ультра-ввук [31, 100, 106, 126, 152, 186, 218, 219, 249, 288]. Иногда клетки перед этим обрабатывают лизоцимом [20, 28, 31, 123, 126, 146, 152] или лизостафином [264, 265]. Реже поставленная цель достигается при помощи Френч пресса [89, 169, 235, 289]. Имеются указания на использование в единичных случаях растирания клеток со смесью алюминия [113] и разрушение при помощи стеклянных шариков [88, 180]. [c.144]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология