Мембранные везикулы

Аппарат Гольджи выполняет также такую важную функцию, как сортировка белков, углеводов, липидов и мукополисахаридов, предназначенных для различных внутриклеточных органелл. Пройдя через слой мембран Гольджи. они собираются в мембранных везикулах, которые отделяются от цистерн и транспортируются [c.589]

ЭКЗОЦИТОЗ, слияние везикул в цитоплазме, поглощение одной везикулы другой (аутофагия), почкование, по транс-механизму протекают захват мембранных везикул, разделение везикул, эндоцитоз [c.133]

Дж/м , т. е. до значения поверхностного натяжения жидких углеводородов. Аналогичное явление наблюдается на границе водный раствор ПАВ — углеводородная жидкость, что создает предпосылки для образования мелкодисперсных систем за счет возникновения структур типа мицелл, микроэмульсий, бислойных мембран, везикул (пузырьков) и т.п. [c.268]

Так как фосфолипиды содержат фосфатные группы, с помощью ЯМР Р можно наблюдать фосфорсодержащие липосомы. Выше температуры фазового перехода при благоприятных условиях в искусственных мембранных везикулах можно наблюдать сигналы от различных фосфолипидов (рис.3.47). В малых везикулах удается различить линии, соответствующие фосфолипидам, находящимся на внутренней и внешней сторонах мембраны (химические сдвиги отличаются на несколько Гц), Для более надежного отнесения соответствующих резонансных линий фосфолипидов на внутреннюю или внешнюю поверхность мембраны, необходимо добавить парамагнитное вещество, для которого проницаемость мембраны невелика, и в основном будет наблюдаться связывание этого вещества с фосфолипидом, находящимся на одной из сторон поверхности. Резонансные линии липидов, связанных с парамагнитным веществом, в этом случае сильно уширяются и практически не наблюдаются в спектре. Спектры ЯМР Р липосом также являются подтверждением сделанного ранее вывода о том, что увеличение напряженности магнитного поля далеко не всегда обеспечивает более высокое разрешение, так как для ядер фосфора вклад в релаксацию за счет анизотропии химического сдвига будет значительным. В этом случае скорость релаксации возрастает как квадрат напряженности магнитного поля (см. формулу (1.38)),а разность значений химических сдвигов увеличивается с ростом поля линейно, поэтому уширение линий может компенсировать воз- [c.157]

Транспорт электронов и молекул через мембраны представляет другую область исследования, основанную на понимании структуры и организации мембран. Везикулы — это трехмерные органеллы или сфероидальные тела, включающие в себя один или более концентрических бислоев. [c.179]

Лизосомы - мембранные везикулы, имеют трехслойную мембрану, которая может быть гофрирована. Мембрана удерживает внутри лизосом гидролитические ферменты, участвующие в гидролизе биополимеров самой клетки белков, полисахаридов, липидов и нуклеиновых кислот. Если клетка разрушается под действием дг-фактора мембраны, лизосомы становятся проницаемыми для ферментов. Они попадают в цитоплазму и гидролизуют все компоненты клетки, т.е. осуществляют автолиз клетки (подробнее см. тему 4). [c.42]

Клеточный материал может быть отделен от клетки внутрь ограниченных мембраной везикул экзоцитоз). Жидкий характер клеточной мембраны проявляется и при слиянии везикул с плазматической мембраной, что происходит в многочисленных секреторных процессах. К сожалению, невозможно наблюдать последовательные стадии процесса отделения везикул и их слияния с клетками, требующие быстрой перестройки фосфолипидных бислоев. [c.282]

НОЙ скорости, после чего удаляют надосадочную жидкость. Этот метод полезен для разделения частиц, сильно различающихся по скорости седиментации. Например, центрифугирование в течение 5—10 мин при 3000— 5000 д приводит к осаждению интактных бактериальных клеток, тогда как большинство клеточных фрагментов при этом остается в надосадочной жидкости. Фрагменты клеточной стенки и большие мембранные структуры можно осадить центрифугированием при 20 000—50 000 g в течение 20 мин, в то время как маленькие мембранные везикулы и рибосомы требуют для осаждения центрифугирования при 200 000 д в течение 1 ч. [c.149]

Мягкая осмотическая обработка применяется также при выделении протопластов и мембранных везикул грамположительных бактерий. Выделенные с ее помощью препараты чрезвычайно полезны при изучении транспорта веществ через бактериальную мембрану. Способы их получения обсуждаются и описываются в следующей главе (разд. 19.3). [c.381]

Как мы уже говорили, ферменты, ответственные за синтез фосфолипидов, располагаются на цитоплазматической стороне везикул эндоплазматического ретикулума. По мере синтеза фосфолипидов происходит их самосборка с образованием термодинамически стабильных бимолекулярных слоев, которые включаются в мембрану везикул. Липидные везикулы, происходящие от эндоплазматического ретикулума, по-видимому, перемещаются к аппарату Гольджи, фрагменты которого в свою очередь сливаются с плазматической мембраной. Мембраны аппарата Г ольджи и везикул эндоплазматического ретикулума асимметричны в поперечном направлении как по фосфолипидам, так и по белкам, и эта асимметрия сохраняется до слияния с плазматической мембраной. Внутренняя поверхность везикулярных мембран оказывается с наружной стороны плазматической мембраны, а цитоплазматическая остается на ее цитоплазматической стороне (рис. 42.10). Поскольку поперечная асимметрия в мембранах везикул, происходящих из эндоплазматического ретикулума, существует еще до слияния с плазматической мембраной, основной проблемой сборки мембран становится вопрос о том, каким образом интегральные белки асимметрично включаются в липидный бислой эндоплазматического ретикулума. [c.135]

Измерение посредством связанных с мембранными везикулами [c.9]

В соответствии с указанным механизмом увеличение концентрации Са в цитоплазме должно вызывать угнетение активности Н -АТФазы. Действительно, как показывают опыты на мембранных везикулах [355. 5881. ионы Са в миллимолярных концентрациях являются сильным и даже весьма избирательным ингибитором Н+-АТФазы плазмалеммы. [c.45]

Проведенные на изолированных мембранных везикулах с помощью гидрофобного флуоресцентного зонда МБА исследования показали, что в липидной области плазматических мембран действительно имеет место структурная перестройка вблизи 18 1190]. Позднее эта структурная перестройка была зарегистрирована также в опытах с липофильным зондом пиреном [215] (см. раздел 7). [c.167]

Богатые рецепторами мембранные везикулы служат прекрасными модельными системами они содержат очень мало посторонних белков, и с их помощью можно тестировать и связывание медиатора, и регуляцию ионной проницаемости. Изучение такой регуляции невозможно на очищенном рецепторе, так как он лишен своего липидного окружения. Следует также иметь в виду количественные различия между потоком ионов in vivo и их потоком через мембрану таких везикул. Как и все [c.261]

Если постсинаптическая мембрана подвергается действию увеличенных концентраций ацетилхолина (и если одновременно блокируется ацетилхолинэстераза), то наблюдается медленное снижение постсинаптпчеокого ответа. По-видимому, мембрана становится менее чувствительной к агонистам. Это явление, называемое десенсибилизацией, наблюдается на всех трех уровнях организации в интактной ткани, в мембранных везикулах и в изолированном рецепторе. Ионный поток через мембрану ингибируется, но не потому, что рецепторы связывают агонисты слабее, а потому, что ионные каналы не открываются. Фармакологическая десенсибилизация наблюдается не только для ацетилхолинового рецептора, но и для многих других систем, например для рецепторов пептидных гормонов и р-адренэргиче-ских рецепторов. [c.263]

Эндосома — это мембранная везикула (от лат vesi ula — пузырек), возникающая в результате эндоцитоза, под термином эндоцитоз понимают проявления общего механизма захвата плотных частиц (ф а г о ц и т о 3, от греч phagos — поедание), вирусов [c.129]

Первыми стабильными продуктами фотосинтеза являются АТР и восстановительная сила. Эти продукты можно обнаружить как в интактных клетках и выделенных из них хлоропластах (у зеленых растений), так и в суспензиях фотосинтетических мембранных везикул из пурпурных бактерий. Фиксация СОд не обязательно сопряжена со световой реакцией. Она может происходить и как темновая реакция , не зависящая от пигментсодержащих структур, при наличии АТР и NAD(P)H2. Эти два процесса разделены и в пространстве фотосинтез [c.384]

Синтез АТФ из АДФ и Фн может происходить в мембранных везикулах и в отсутствие переносчиков электронов. Для этого необходимо лишь тем или иным образом создать трансмембранную разность электрохимических потенциалов Н+ на мембране, в которой находится АТФ-синтетаза. Такого рода процессы синтеза АТФ наблюдаются в липосомах из фосфолипидов, в состав которых помимо АТФ-синтетазы входит бактериородопсин (см. гл. XXIX), способный под действием света переносить Н+ через мембраны. Аналогично, синтез АТФ можно осуществить, создав разность АрН с помощью кислотно-щелочного удара или прикладывая разность электрических потенциалов. В действительности проблема состоит в том, чтобы понять, каким образом компоненты АрН+ взаимодействуют с Н+-АТФазой, не вовлекая непосредственно перенос электрона в ЭТЦ. [c.219]

Поскольку скорость седиментации частицы постепенно снижается по мере достижения ею той области градиента, где она имеет плотность одинаковую с плотностью раствора, для достижения равновесия центрифугировать требуется очень долго. Это особенно важно для маленьких мембранных везикул, таких, как хрома-тофоры, или для фрагментов цитоплазматических мембран клеток, разрушенных на прессе Френча, так как скорость седиментации этих частиц низка даже в отсутствие градиента. Если применять центробежные ускорения порядка 100 000—200 000 для более или менее хорошего разделения требуется не меньше 24 ч, а для полного — 72 ч. [c.150]

Рамос и сотр. [35, 36] разработали и подробно описали метод проточного диализа, не требующий разделения клеток и суспендирующей среды. Этот метод особенно полезен при исследовании мембранных везикул. [c.459]

Использование мембранных везикул, предложенное Кабаком и Штадтманом [19], становится все более популярным. Обзор их применения при изучении транспорта был сделан недавно Конингсом [23]. [c.464]

Достаточно распространенной является точка зрения, согласно которой редокс-цепь плазмалеммы является альтернативной Н -АТФазе электрогенной системой, осуществляющей активный транспорт Н из клетки [93, 172, 234, 347, 417, 447, 490, 539]. Об этом свидетельствуют прежде всего результаты опытов, моделирующих работу редокс-цепи плазмалеммы in vitro. Показано, например, что добавление НАДН в среду вызывает у мембранных везикул клеток колеоптилей кукурузы генерацию Е ("плюс" внутри везикул), сопоставимого по знаку и величине с АТФ-зависимым Е на тех же везикулах [93]. Конечным акцептором электронов, переносимых редокс-цепью, при этом выступал, очевидно. Oj. На везикулах плазматических мембран корней хлопчатника [4171 генерация Е ("плюс" внутри везикул) происходила, когда донором электронов внутри везикул выступал аскорбат, а их акцептором снаружи везикул — феррицианид. [c.41]

Что касается другой электрогенной системы тонопласта — Н -пирофосфатазы. то она привлекла внимание исследователей, по-види-мому. в связи с установлением важной роли пирофосфата в энергетике растительной клетки [310]. Ее относят к четвертому типу №-фосфогидролаз, встречающихся в мембранах растений [592]. Свойства зтой мембранной системы исследованы на мембранных везикулах тонопласта. а также в солюбилизированном виде [344, 512, 591, 687]. Показано, что она имеет оптимум pH в щелочной среде (pH 7—8). стимулируется К+, ингибируется ДЭС. ДЦКД. КаР, МДФ. [c.44]

Так. есть достаточно весомые основания считать, что фитогормоны способны стимулировать активный транспорт Н. осуществляемый Н+-АТФазной системой плазмалеммы. Об этом свидетельствует, например, продемонстрированная в опытах на мембранных везикулах регуляция активности Н -АТФазы ауксином и фузикокцином [314, 395,586, 6161. [c.62]

С термодинамической точки зрения обе эти компоненты должны быть равноценны. Это не только вытекает из концепции Митчела, но и подтверждается экспериментально. Так, если искусственно создать на мембране везикул из плазмалеммы флоэмы борщевика Е или АрН, примерно равные в энергетическом отношении, то в обоих случаях наблюдается сходный выход сахарозы из везикул [101. 457]. [c.80]

Значимость этой роли отчетливо показали опыты по искусственному исключению термотропной структурной перестройки липидов из цепи подпороговых изменений, развивающихся в плазматических мембранах возбудимых клеток проростков тыквы при действии постепенного охлаждения. Для этого с помощью процедуры умеренного холодового закаливания проростков, описанной нами ранее в работе [216], смещали протекание структурной перестройки в липидном матриксе плазматических мембран в более низкотемпературную область. О наличии смещения интервала перестройки судили по эксимеризации пирена, связанного с изолированными мембранными везикулами. Было установлено, что у закаленных проростков данная структурная перестройка протекала при 13—14°, в то время как у контрольных незакаленных — при 17—18° (рис. 44). Столь небольшое различие в термотропных свойствах липидного матрикса плазматических мембран существенным образом сказывалось на кинетике подпорогового изменения возбудимых клеток при постепенном охлаждении от 23°. Если подпороговая деполяризация клеток контрольных проростков имела характерный нелинейный вид с перегибом в области 18°, то у большинства закаленных проростков деполяризация развивалась почти линейно, со сравнительно невысоким коэффициентом крутизны (см. рис. 28). Медленное развитие подпороговой деполяризации, обусловленное исключением резкой термотропной структурной перестройки липидов из механизма подпороговых изменений, способствовало тому, что генерация ПД у вoзiбyдимыx клеток закаленных проростков имела место лишь при весьма значительном температурном перепаде. [c.167]

TOB контролируют на каждом этапе выделения и разделения мембран в исходном гомогенате и в каждой фракции с целью определения стадии осаждения и выхода исследуемых мембранных структур, а также потерь мембранных фракций. Гомогенность выделенного препарата мембран анализируют на основании увеличения активности маркерного фермента (-ов) в нем по сравнению с исходным гомогенатом клеток. Часто используют не один, а два-три мембранных маркера. Однако необходимо помнить, что и мембраны одного типа способны проявлять гетерогенность, связанную с асимметрией белкового, липидного и углеводного состава мембран, в результате чего фермент может находиться в латентной форме из-за нарушения ориентации мембраны и недоступности активного центра для субстрата, например, в обращенных мембранных везикулах. Наиболее легко из внзпрри-клеточных органелл идентифицируют митохондрии и ядра, затем — лизосомы и пероксисомы, наиболее трудно — плазматические мембраны и мембраны эндоплазматической сети. Сложность разделения последних обусловлена близостью величин диапазона плотностей этих структур, поэтому разделение по скорости седиментации осуществляется в том случае, если плазматические мембраны представлены крупными фрагментами. [c.223]

К сожалению, многие маркерные ферменты (например, Ка, К-АТФаза, 5 -нуклеотидаза, сукцинатдегидрогеназа) при выделении или хранении могут терять активность. Кроме того, большинство встроенных в мембрану ферментов характеризуется асимметричной локализацией активного центра. По этой причине их активность в замкнутых фрагментах не удается определить из-за недоступности для субстрата. Это так называемая латентная активность фермента. Она может быть выявлена в присутствии низких концентраций детергента или ионофоров (типа ала-метицина), образующих крупные каналы в замкнутых мембранных везикулах. [c.67]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология