Вирус лейкоза мышей MLV

Рис. 9.5. Геном вируса лейкоза мышей Молоки-ретровируса (РНК-вирус, содержащий ген фермента обратной транскриптазы), ДНК-тран-скрипт которого встраивается в геном млекопитающего и может использоваться в качестве вектора для переноса генов млекопитающих в клетку [2296].

Вирусы саркомы и лейкоза грызунов, вирусы саркомы и лейкоза птиц, вирусы Т-клеточного лейкоза человека типа I и II Вирус рака молочной железы мышей [c.356]

Как уже было сказано в начале этого раздела, другим методом получения трансгенных животных (в частности, мышей) является заражение предимплантированных эмбрионов рекомбинантными ретровирусами, которые оказались удобными объектами для этих целей. Геном ретровирусов сравнительно небольшой и с ним относительно легко манипулировать, вводя в него чужеродные гены ретровирусы достаточно инфекционны в отношении пермис-сивных клеток (почти 100% заражение их), а единственна копия ретровирусного генома ДНК прочно и строго определённым образом интегрируется с ДНК клетки-мишени и эти последние способны экспрессировать привнесенные вирусом гены. Уровень экспрессии клонированных генов заметно повышается вследствие того, что в ретровирусах имеются весьма активные транскрипционные энхасеры, или усилители (см.). Известные ретровирусные векторы ведут свое происхождение от вирусов лейкоза мышей (MLV) или от вирусов птиц (ALV). [c.584]

Цель настоящей главы — очертить рамки практического использования ретровирусов в качестве экспрессирующих векторов общего назначения и описать методы размножения вирусов, тестирования и инфицирования, которые являются общими для большинства процедур, описанных выше. Всех деталей специализированных экспериментов мы касаться не будем. Большинство ретровирусных векторов, описанных на сегодняшний день, ведет свое происхожедние либо от вирусов птиц, либо от вирусов лейкоза мышей (ВЛМ, МЬУ). В данной главе мы сконцентрируем внимание на векторных системах типа МЬУ и экспериментальных процедурах, связанных с использованием этих векторов. [c.274]

Ретровирусы представляют семейство РНК-содержащих вирусов, репликативный цикл которых отличается тем, что вирусный РНК-геном транскрибируется в ДНК-форму эту функцию обеспечивает обратная транскриптаза —фермент, кодируемый вирусным геномом. Жизненный цикл типичного ретровируса, такого, например, как вирус лейкоза мышей (МЬУ), показан в упрощенном виде на рис. 9.1. Вирусные частицы, каждая из которых содержит две копии одноцепочечного РНК-генома, образованы центральным нуклеопротеиновым кором, окруженным мембраной, которая несет на своей наружной поверхности специфическую оболочку из гликопротеинов. Инфицирование [c.274]

Другая важная задача — выведение трансгенных животных, устойчивых к заболеваниям. Потери в животноводстве, вызванные различными болезнями, достаточно велики, поэтому все более важное значение приобретает селекция животных по резистентности к болезням, вызываемых микроорганизмами, вирусами, паразитами и токсинами. Пока результаты селекщш на устойчивость животных к различным заболеваниям невелики, но обнаде-живающи. В частности, созданы популяции крупного рогатого скота с примесью крови зебу, устойчивые к некоторым кровепаразитарным заболеваниям. Установлено, что защитные механизмы от инфекционных заболеваний обусловлены либо препятствием вторжению возбудителя, либо изменением рецепторов. Вторжению возбудителей, равно как и их размножению, препятствуют в основном иммунная система организма и экспрессия генов главного комплекса гистосовместимости. Одним из примеров гена резистентности у мышей служит ген Мх. Этот ген, обнаруженный в модифицированной форме у всех видов млекопитающих, вырабатывает у Мх -мышей иммунитет к вирусу гриппа А. Ген Мх был вьщелен, клонирован и использован для получения трансгенных свиней, экспрессирующих ген Мх на уровне РНК. Однако данные о трансляции Мх-протеина, обусловливающего устойчивость трансгенных свиней к вирусу гриппа А, пока не получены. Ведутся исследования в целях получения трансгенных животных, резистентных к маститу за счет повышения содержания белка лакто-ферина в тканях молочной железы. На культуре клеток из почек трансгенных кроликов было показано, что клеточные линии, содержащие трансгенную антисмысловую РНК, имели резистентность против аденовируса Н5 (Ads) более высокую на 90 — 98% по сравнению с контрольными линиями клеток. Л. К. Эрнст продемонстрировал также устойчивость трансгенных животных с геном антисмысловой РНК к лейкозу крупного рогатого скота, к заражению вирусом лейкоза. [c.130]

В случае простейшего ретровирусного вектора транс-дейст-вующие вирусные структурные гены удаляют и на их место встраивают один или несколько рестрикционных сайтов для клонирования. Известно несколько векторов этого типа (см., например, [18, 19]). В качестве примера вектора, рассчитанного на клонирование одиночных генов, можно назвать вектор на основе вируса лейкоза мышей Молони (Mo-MLV), обозначаемый рМХ1112 (рис. 9.3, а). В этой конструкции полилинкер содержащий множественные рестрикционные сайты для клонирования, введен на место удаленных вирусных генов gag, pol и env. Клонированный в данном векторе чужеродный ген эффективно экспрессируется благодаря промотору в составе вирусного 5 -LTR, а наличие ч с-действующих вирусных последовательностей позволяет этой системе формировать инфекционные части- [c.279]

Энхансеры обладают слабой видовой специфичностью. Они способны проявлять свою активность в клетках отдаленных видов например, энхансер гистоновых генов морского ежа работает в клетках лягушки, энхансер гена теплового шока дрозофилы — в клетках млекопитающих. Тем не менее в своих клетках энхансеры работают несколько лучше. Энхансер обезьяньего вируса SV40 в 3 раза более активен в клетках обезьяны, чем в клетках мыши, а энхансер вируса лейкоза мышей — наоборот. [c.72]

Для некоторых линий мышей характерна спонтанная активация эндогенных РНК-содер-жащих онкогенных вирусов, приводящая к развитию лейкоза. У животных других линий опухоли, которые могут экспрессировать вирусные антигены и продуцировать инфекционный вирус лейкоза мышей (МииУ), образуются в том случае, если им вводить канцерогенное химическое соединение. Такие опухоли экспрессируют как общие опухолеассоциированные антигены, так и опухолеспецифические антигены, рассматриваемые ниже. У организма-хозяина, однако, эндогенные РНК-содержашие вирусы вызывают лишь слабый иммунный ответ, возможно, из-за иммунологической толерантности (см. гл. 14). [c.379]

Вирусы лейкозов. В эту группу входят вирусы, вызы-вающие опухолевые заболевания домашних животных, в гом числе птиц, а также мышей. Это вирусы саркомы Рауса, эритробластоза, миелобластоза и лимфоматоза кур и лейкозов мышей [c.9]

Большинстворетровирусных векторов создано на базе вируса лейкоза мышей (MT.V) Векторы, в которых сохранились только концевые повторы LTR и is- действующие сайты Р, Ри и psi си. рис. 13.4, а), позволяют клонировать до 8 т.п.н. чужДНК. Полезным свойством таких векторов является полное отсутствие вирусных белков в трансдуцированных клетках, и поэтому in vivo эти клетки не будут восприниматься иммунной системой организма как чужие. Это обстоятельство совместно с фактом, что терапевтический ген интегрируется в клеточную хромосому, обеспечивают стабильность терапевтического эффекта. Однако рет- [c.422]

Обычно энхансеры соверщенно разных генов класса II взаимозаменяемы. В качестве примера можно привести энхансеры регуляторных областей вируса лейкоза мышей и 8У40. Более того, энхансер 8У40 может функционировать в самых разных дифференцированных тканях млекопитающих он также стимулирует транскрипцию у амфибий, в клетках растений и даже у дрожжей 5. ротЬе. Энхансер часто обусловливает временную и клеточную специфичность активации транскрипции гена. Например, как мы увидим позже, при обсуждении регуляции транскрипции клеточных генов, энхансеры, ассоциированные с некоторыми генами, оказываются активными только на определенных стадиях развития (разд. [c.52]

Ретровирусы Вирус саркомы Рауса Вирус лейкоза мышей Молони [c.253]

Вирус лейкоза мышей Адельсона Эритроблас-тозные клетки птиц [c.350]

Как было обнаружено во многих работах, индуцированное интерфероном подавление размножения ретровирусов не всегда коррелирует с индукцией антивирусного состояния против литических вирусов [11]. Например, обработка хронически зараженных вирусом RD-114 клеток а-ИФН или -ИФН приводит к подавлению размножения ретровируса, но репликация VSV или вируса ЕМС устойчива к интерферону в этих клетках [97], что коррелирует с отсутствием образования киназы и синтетазы [244]. Исследовано влияние интерферона на образование вируса лейкоза мышей Молони в двух клонах клеток мышей Swiss. Образование этого вируса подавлялось в одинаковой степени, хотя один клон был значительно чувствительнее к интерферону, чем другой, когда индукцию антивирусного состояния измеряли по степени подавления репликации вируса ЕМС [45]. Судя по подавлению размножения вируса MoLV, клетки NIH/3T3 очень чувствительны к интерферону, но, судя по подавлению репликации вируса ЕМС, они устойчивы к нему. В отличие от этого в клетках А204 как репликация ретровируса М7 и вызываемое им слияние клеток, так и размножение вируса ЕМС и VSV очень чувствительны к интерферону [244]. [c.66]

Липосомный гелиомицин проявил активность против вируса лейкоза Раушера -скорость развития опухоли уменьшалась в 2 раза, хотя терапевтический индекс остается низким (около 10). Определена переносимая доза для мышей при внутрибрюшинном введении - 50 мг/кг, ЬВзо 75 мг/кг. [c.182]

Все, что мы уже рассмотрели, относилось преимущественно к миксовирусам — одним из наиболее хорошо изученных вирусов, имеющих оболочку. Судя по имеющимся данным, оба опухолевых РНК-содержащих вируса (вирусы лейкозов) — вирусы птиц и мышей — содержат большое количество липидов (30—35% по-видимому, разное у разных частиц одного вируса) и мало углеводов. Для белка (или белков), входящего в состав оболочек этих вирусов, характерна штаммо- (илн тино-)специфич-ность в отличие от внутренних белков нуклеокапсида, различающихся только у разных групп вирусов (группоспецифичные), белок (или белки) оболочки обнаруживает [c.138]

Некоторые функции дифференцированных клеток интерфероны подавляют, другие усиливают. Например, интерфероны подавляют секрецию активатора плазминогена меланогенез, стимулируемый гормоном меланоцитов [68] превращение мышиных фибробластов в адипоциты (123]. Но вместе с тем они стимулируют индукцию дифференцировки клеток миелоидного лейкоза мышей [243], индуцируют дифференцировку лейкозных клеток в макрофаги и гранулоциты и стимулируют миогенез в культуре миобластов человека. Они также способствуют восстановлению контактного торможения и усиливают отбор ревер-тантов из клеток, трансформированных вирусом. Не исключено, что противоопухолевое действие интерферона связано с его способностью модулировать клеточную дифференцировку [69]. [c.71]

Первая четкая идентификация онкогенного вируса относится к 1911 году, когда Раус обнаружил, что фактором, вызывающим саркому у кур, является вирус. С тех пор, и особенно после 1950 года, было открыто много других вирусов, вызывающих либо плотные опухоли, либо опухолевые заболевания лимфатической системы (лейкозы) у птиц и мышей. Все эти вирусы оказались более или менее родственными как с химической, так и с биологической точек зрения (табл. И). Вирус Биттнера (фактор молока) [41] также обнаруживает сходные физические и биологические свойства и поэтому может быть включен в число этих так называемых лейковирусов, хотя серо.яогпчески он, по-видимому, им не родствен. [c.273]

В заключение этого раздела необходимо подчеркнуть роль генетических факторов в возникновении аутоиммунных заболеваний. Их возникновение прямо связано с активностью Т-системы иммунитета и прежде всего тех ее механизмов, которые отвечают за генерацию Т-супрессоров. Дефгщит последних несомненно способствует возникновению аутоиммунной патологии, разумеется при наличии в том числе перекрестно реагирующих антигенов. Большую помощь в понимании этих важных вопросов оказывают работы по изучению аутоиммунных заболеваний лабораторных животных. В гл. 2 уже говорилось о новозеландских мышах (NZB и NZW) и некоторых других линиях мышей, у которых спонтанно возникает аутоиммунный процесс. При этом доминирует иммунный ответ против jXHK и собственных эритроцитов с образованием соответствующих по специфичности антител. Существенно, что эти мыши инфицированы вирусом мышиного лейкоза. Выделенный из мышей NZB переносит подобное заболевание нечувствительным реципиентам. Предположение, что вирус нарушает процесс генерации Т-супрессоров, представляется нам весьма перспективным для понимания патогенеза аутоиммунных заболеваний. [c.237]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология