Бактерии лиофилизация

Посевной материал выращивают в колбах на качалке, затем в аэробных условиях по методу глубинного культивирования в ферментаторе за 2—3 сут увеличивают сухую биомассу бактерий до 4—8 г/л. Бактерии этих групп, как и большинство микроорганизмов, лучше всего переносят высушивание в стационарной фазе роста. После центрифугирования получают пасту с 89— 92%-ным содержанием влаги. Для высушивания можно использовать контактный метод, применяя в качестве адсорбента сухой стерильный каолин, равномерно примешиваемый к биомассе в таком количестве, чтобы влажность смеси была 7%. В таком виде получают сухой препарат, в котором сохраняется 40—60% живых клеток. Хорошие результаты дает лиофилизация с применением защитных сред, например сахарозы — желатина и др. [c.131]

В сухом состоянии многие бактерии (если не большинство из них) на протяжении ряда лет сохраняют жизнеспособность. Для консервации бактерий в коллекциях вегетативные клетки подвергают, как правило, лиофильной сушке и хранят при комнатной температуре или при низких температурах в вакууме. Как рассчитал еще Беккерель, микроорганизмы при температуре, близкой к абсолютному нулю, могут оставаться жизнеспособными на протяжении миллионов лет. Кратковременные опыты с жидким азотом и экстраполяция их результатов позволяют заключить, что такие предположения вполне оправданны. Бактерии, не переносящие лиофилизации, выдерживают многолетнее хранение в суспензиях при температуре жидкого азота. [c.80]

Культуру грамотрицательных бактерий выращивают в подходящей среде и останавливают рост, добавляя фенол в таком количестве, чтобы концентрация его составляла 0,25%. Через 2—3 ч клетки отделяют центрифугированием, 2 раза промывают 0,9%-ным раствором хлористого натрия и 1 раз — водой. В результате лиофилизации клеток получается легкий пушистый порошок. Если бактерии не являются патогенными, в прибавлении фенола нет необходимости, и можно непосредственно проводить центрифугирование, промывать клетки, высушивать их ацетоном и лиофилизовать. [c.127]

Получение сухого нитрагина на основе лиофилизации клубеньковых бактерии [c.212]

Таким образом, исследования, проведенные по лиофилизации клубеньковых бактерий, выявили существенную роль защитных сред в предохранении микробной клетки от гибели при высушивании и в процессе хранения сухого нитрагина. Предложена защитная среда—меласса с тиомочевиной—для производства сухого нитрагина (Бородулина и др., 1967, 1971). [c.215]

Лиофилизация заключается в удалении воды из замороженных суспензий бактерий путем сублимации при низком давлении, т. е. при этом вода испаряется, минуя жидкую фазу. Высушенные клетки сохраняются довольно долго, если защитить их от действия кислорода, влаги и света. В любой момент клетки можно перевести в гидратированное исходное состояние. [c.518]

Для подготовки клеток к лиофилизации их суспендируют в среде, содержащей криопротекторы. Американская Коллекция типовых культур достигла успеха в длительном хранении физиологически различных бактерий, применяя в качестве криопротекторов либо 20%-ное снятое молоко (при использовании двойных ампул), либо 24%-ный раствор сахарозы, разведенный равным объемом ростовой среды (конечная концентрация сахарозы 12% при использовании одинарных ампул). В других лабораториях в качестве криопротекторов используют декстран (10%), лошадиную сыворотку, инозит и др. [8, 14, 20]. [c.521]

Некоторые виды бактерий, не поддающихся лиофилизации, удается длительно сохранять в замороженном состоянии при температуре жидкого азота (—196°С) или в его парах (—150 °С) в хорошо изолированных резервуарах. В Американской коллекции типовых культур успешно хранится таким способом множество привередливых бактерий, которые не утратили при этом свои фенотипические свойства в течение >15 лет. [c.526]

К настоящему времени многочисленные исследования показали повсеместное распространение вибриона-паразита в пресных и соленых водоемах, в почве, и особенно в сточных водах он оказался интегральным компонентом природной микрофлоры ряда европейских стран, Южной и Средней Америки, Африки, Австралии, Японии, Индии и Цейлона. Если заражение бактериальной культуры вести большим числом клеток вибриона-па-разита, эквивалентным числу клеток хозяина, то лизис наступает быстро — через несколько часов он может быть завершен. Учитывая, что Bdellovibrio консервируется лиофилизацией и поддается адаптивной изменчивости, можно предполагать возможность использования этого агента при микробной очистке промышленных сточных вод в качестве средства освобождения от бактериальных клеток производственной культуры путем их лизиса. Это лишь возможный перспективный путь исследований для практического использования хищника, паразита бактерий. [c.62]

При выращивании бактерий в ферментерах производство педио-кокков и стрептококков гораздо дешевле, чем молочнокислых бактерий. Они не так привередливы в пищевых потребностях, как лактобациллы, растут в ферментерах до большей плотности, лучше выдерживают лиофилизацию и более стабильны прн обычных условиях хранения на ферме. Выбор кокков для включения их в продукт должен диктоваться их способностью быстро размножаться в ограниченно аэробных и анаэробных условиях и достигать pH ниже 5,0 быстро, так чтобы клостри-дии и другие портящие силос микроорганизмы не смогли размножаться. [c.299]

Е. Отделение бактерий.. Процесс спорообразования необходимо систематически контролировать путем взятия проб. По окончании спорообразования разведение закончено. Для отделения биомассы применяют различные методы. Экономичность этих методов определяется, с одной стороны, размерами потерь биопродукции, с другой — расходами на эту операцию. Лучшим методом является лиофилизация, однако она пригодна только при небольшом объеме продукции. Другой хороший способ —сушка распылением через форсунки в струе нагретого воздуха, когда сушке подвергается вся питательная среда с содержащимися в ней спорами и кристаллами и конечным продуктом является тонкий порошок. Разделение на центрифуге типа ЗЬагркзз с большим числом оборотов (15 000 об/мин) дает довольно влажный концентрат, который можно высушивать в форсуночных или вакуумных сушилках, а также путем лиофилизации. [c.207]

Лысенко [137, 140], выделивший токсин, описывает его как продукт белкового характера, недиалистатирующий, термостабиль-ный, относимый к протеазам. Инактивируется при 60—75° С через 10 минут, при 25° С через 18 часов. После лиофилизации очень устойчив. В культуральной среде его можно осадить сернокислым аммонием. Ионы кальция не инактивируют токсин, и его можно подавить 10—4М фенилтиомочевиной. На некоторых средах токсин не образуется, хотя бактерии растут хорошо. Инъекция гусеницам большой вощинной моли этого возбудителя снижает активность дыхания и вызывает быстрое почернение гусеницы. Это, по-видимому, связано с метаболизмом фенолоксидаз и системой сильных протеолитических ферментов, которые образуются в токсине Р. aeruginosa. [c.247]

Представляют интерес данные но чувствительности к высушиванию клубеньковых бактерий. Все быстрорастушие клубеньковые бактерии чувствительны к лиофилизации, сохраняется в среднем от 10 до 30%. Напротив, медленнорастущие (люпин, соя, арахис) наиболее устойчивы, выживаемость их составляет 30—50%, а в отдельных опытах — 70—80% (Бородулина, 1964). [c.214]

По данным Кронгауз, Самсоновой и др. (1966), штаммы клубеньковых бактерий резко различаются по устойчивости к лиофилизации. Штамм гороха 227а значительно превосходил по выживаемости штамм 209. Сохранкость —соответственно 27 и 15 млрд. на 1 г. При хранении в течение 3 мес. выживаемость устойчивого штамма была 79%, а чувствительного — 4,7%. [c.214]

Сухая вакцина БЦЖ представляет собой культуру ослабленных туберкулезных бактерий штамма Кальметта — Герена, высушенных методом лиофилизации. [c.726]

Наилучшая форма сохранения организмов, при которой не теряется антибиотическая активность, — их лиофилизация. Метод пригоден как для спорообразующих, так и для бесспоровых культур микроорганизмов. Сущность метода состоит в том, что суспензия клеток или спор микроорганизма, приготовленная на среде, богатой белками (часто используется кровяная сыворотка), быстро замораживается при температуре от -40 до -60 °С и высушивается под вакуумом до остаточной влажности (0,5-0,7%). После такой обработки ампулы со спорами или клетками лио-филизированного микроба запаивают. Лиофилизированные бактерии сохраняются 16-18 лет, споры грибов не теряют основных свойств при хранении их в лиофилизированном виде в течение Шлет. [c.155]

Впервые этот метод был применен для гистологических исследований Альтманом (Altman, 1890). Первые опыты по лиофилизации бактерий провел Хаммер (Hammer, 1909—1914). В настоящее время лиофилизация широко используется в крупных коллекциях для длительного (более 30 лет) хранения ра ь ных бактерий, включая актиномицеты, микоплазмы, а также мицелиальных грибов, дрожжей, водорослей, простейших, вирусов, вакцин и плазмы, крови. Например, представители сапрофитных микроорганизмов в коллекции кафедры микробиологии МГУ хранятся в лиофилизированном состоянии свыше 25 лет микобактерии в коллекции в ЧССР — 25 лет. [c.154]

Ряд микроорганизмов, не выдерживающих лиофилизации, переносит высушивание под вакуумом на сухих таблетках пептона, крахмала, декстрана, а также на бумажных, целлофановых или желатиновых дисках. Густую суспензию бактерий смешивают с 10% расплавленной желатины и полученную смесь, содержащую около 10 ° клеток/мл, высушивают на стерильных дисках в вакуумной сушилке над РгОб. Диски с клетками микроорганизмов хранят в закрытых флаконах в рефрижераторе. Разновидностью этого метода является L-высушивание, или высушивание из жидкого состояния микроорганизмы в суспензионной среде высушивают под вакуумом в стеклянных ампулах, погруженных в водяную баню с контролируемой температурой. [c.160]

При лиофилизации колибактерииа к суспензии бактерий перед замораживанием добавляют 10% сахарозы. Обезвоживание замороженного субстрата производят в сублимационных камер--ных установках, обеспечивающих высокий вакуум (до 5-10 мм рт. ст.) и остаточную влажность конечного продукта на уровне 2—4%. [c.584]

Для работы с производственным штаммом бифидобактерий Bifidoba terium bifidum) и накопления биомассы используют питательные среды на основе печеночного бульона с добавлением хлорида натрия, пептона и лактозы. Для лиофилизации препарата применяют сахарозо-желатиновую смесь с добавлением обезжиренного молока (30—40%). Доза сухого бифидумбактерина при выпуске содержит 10 —10 живых клеток бактерий. Флаконы с сухим бифидумбактерином содержат 5 доз. [c.585]

Перед лиофилизацией в суспензию бактерий добавляют в качестве стабилизатора сахарозу, пептон и обрат молока в количестве 5—10%. Ампулы с сухим препаратом запаивают под вакуумом, флаконы укупоривают в атмосфере инертного газа. Одна доза сухого лактобактерина содержит 6—7 млрд. живых клеток бактерий. В ампулах может содержаться 1—3 дозы, во флаконах — до 20 доз. [c.586]

Относительно хорошие результаты были получены при использовании в качестве субстрата-носителя почвы, обычно садовой. Стерильную почву, размещенную в молочных бутылках, флаконах и в других сосудах, инокулируют жидкой культурой клубеньковых бактерий. Но высоких титров бактерий в почвенном нитрагине не удается достичь. Весьма заманчивой представлялась идея получения сухого нитрагина путем непосредственного высушивания жидкой культуры бактерий. На разработку такого вида нитрагина было затрачено много усилий, но результаты оказались негативными. Клубеньковые бактерии, как и другие неспоровые микроорганизмы, очень чувствительны к потере воды и, несмотря на добавку к культуре различных защитных веществ, щадящие методы высушивания (лиофилизации), высокие титры бактерий в препарате сохранить не удалось. [c.591]

В каждую пробирку помещают 0,2 мл высушенной среды и 1 петлю бактерий с тиосульфат-агаровой среды, или, например, 0,3 мл центрифу-гата (5 мин, при 6000 х g), полученного из 50 мл культуры, выращенной на среде с серой . При этом в сухую среду должно попасть некоторое количество серы, так как клетки T.ferrooxidans находятся в контакте с ней. Среда, используемая для лиофилизации T.ferrooxidans, действовала тормо-зяще на его рост при дальнейшем выращивании. Поэтому, при дальнейших [c.53]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология