Выделение митохондрий печени крысы

ВЫДЕЛЕНИЕ МИТОХОНДРИЙ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ [c.406]

Реактивы для выделения митохондрий печени и сердца крысы (с. 405, 406). [c.437]

Реактивы для выделения митохондрии печени крысы. [c.419]

И Цыбакова высказали предположение, что этот новый тип фосфорилирования сопряжен с переходом водорода от НАД-Нг к кислороду через реакции дыхательной цепи. Последующие работы подтвердили это предположение и показали, что при переходе каждой пары водородных атомов или электронов через реакции дыхательной цепи может происходить максимум три фосфорилирования. Прямое доказательство того, что фосфорилирование происходит не только на уровне субстратов, но и на уровне переносчиков водорода, было получено в 1951 г., когда Ленинджер показал, что при окислении НАД-Нг кислородом в митохондриях печени крысы отношение Р/0 близко к трем. Фосфорилирование в дыхательной цепи у растений впервые показали Миллер, Боннер, Аксельрод и Бандурский [22], которые использовали митохондрии, выделенные из проростков маша, и кислоты цикла Кребса в качестве субстратов. Эти авторы получили более низкое отношение Р/0 по сравнению с найденным для митохондрий животного происхождения. Поэтому возникло предположение, что митохондрии растений не эффективны как фосфорилирующие системы. Более поздние исследования показали, что митохондрии растений окисляют промежуточные продукты цикла Кребса, причем отношение Р/0 сравнимо с отношением, полученным для митохондрий животных. [c.243]

Реактивы для выделения митохондрий печени крысы (с. 406). [c.444]

Выделение митохондрий из клеток печени крыс [c.156]

Г. Электронная микрофотография, на которой видны две молекулы F Fi-АТРазы, выделенной из митохондрий печени крысы. [c.527]

Опыты ставились на гомогенатах в 0,25 М манните или в 0,125 М КС1 из мозга крысы, сердца кролика, печени мыши и из клеток мышиной асцитной карциномы Эрлиха. Из гомогенатов изолировались митохондрии - и надосадочная жидкость — растворимая фракция (РФ). При добавлении митохондрий к РФ в среде для гликолиза наблюдалось увеличение скорости гликолиза как при смешивании элементов одинакового происхождения, так и при смешивании элементов разного происхождения. Методика исследования изложена в предыдущей статье 18]. Особенностью нашей постановки опытов явился такой состав реакционной среды, при котором адениннуклеотиды, неорганический фосфат, магний и все активаторы и стабилизаторы гликолиза добавлялись в избытке, не лимитировали скорости, и, следовательно, возрастание скорости гликолиза не могло зависеть от выделения этих веществ из митохондрий в среду. [c.108]

Методом ТСХ исследованы липиды печени здоровых мышей [227], надпочечных желез крыс [228], почек кроликов [229], мозга и печени крупного рогатого скота [230], мозга свиней [231], синаптического сосуда головного мозга крыс [232], надпочечных желез собак [233], белых мышц тунца [234], печени зародыша цыпленка [235] и эритроцитов крупного рогатого скота [236]. Из митохондрии печени крыс выделен фосфатидилглицерин [237]. [c.96]

ДП оказывает влияние не только на печень и почки, но и на сердце. Так, отмечено, что потребление кислорода митохондриями сердца крысы угнетается 2,2 -ДП и притом сильнее, чем митохондриями печени [655]. Подавляется также активность аконитазы, выделенной из сердечной мышцы свиньи [271]. [c.67]

Метод замораживания и хранения изолированных митохондрий. Митохондрии — четко выраженная мембранная структура с весьма тонкой архитектоникой, содержащая системы дыхания и окислительного фосфорилирования. Митохондрии нельзя хранить в изолированном состоянии при комнатной температуре, так как они быстро разрушаются. При температурах порядка О—4°С митохондрии в средах выделения можно сохранять не более 1—2 ч, так как они подвергаются ишемии и гибнут в результате быстрого развития процессов перекисного окисления липидов и денатурации ферментативных комплексов, регулирующих окислительное фосфорилирование. Замораживать митохондрии можно под защитой криопротекторов — диметилсульфоксида (ДМСО) или полиэтиленоксида (ПЭО). Для этого свежую печень крыс измельчают ножницами в холодной стандартной среде выделения и навеску заливают 9-кратным объемом этой среды. После измельчения в гомогенизаторе типа стекло — тефлон в течение 30—40 с гомогенат центрифугируют при 600 об/мин в течение 10 мин, надосадочную жидкость — при 6000 об/мин в течение 15 мин. Митохондрии, находящиеся в осадке, суспендируют в 2 мл сре- [c.74]

Успехи в биохимии и биофизике последних лет также тесно связаны с развитием краун-соединений. Примером может служить валиномицин - антибиотик, который в 1955 г. был выделен из гadioЬa illi. Как установил в 1963 г. Шемякин с сотр. [ 47], структура валиномицина представляет собой циклический додекадепсипептид (52). Механизм действия этого антибиотика был исследован после того, как Прессман и Моор [ 48] отметили изменение активности митохондрии печени крысы под действием ионов щелочных металлов. Исследование показало, что валиномиЦин избирательно образовывал комплекс с катионом калия, который активно переносился в направлении, противоположном концентрационному градиенту. Добавление валиномицина к митохондриальной фракции приводило к расходованию энергии. Эго явилось важным открытием в понимании роли N3 -К -АТРазы в биологической мем- [c.26]

Согласно Хаугеру, Кришу и Стаудингеру [289], мономерный кремнезем оказывается более токсичным по отношению к выделенным митохондриям по сравнению с поликремневой кислотой. Мономерный кремнезем вызывал набухание митохондрии в печени крыс и подавлял окислительный процесс фосфорилиро-вания. Поскольку в этих экспериментах использовалась только [c.1062]

В ряде работ отмечалось, что 2,4-Д и 2,4,5-Т энергично вмешиваются в фосфорный обмен растений, вследствие чего содержание неорганического фосфора повышается параллельно снижению содержания органических фосфорных соединений [2—4]. Неоднократно наблюдалось ослабление зависящего от АТФ ио-ступления ионов в растения, обработанные 2,4-Д [5, 6]. В 1952 г. Броди [7] на митохондриях из печени крысы показал, что 2,4-Д способна разобщать окисление пирувата и сопряженное с ним фосфорилирование. Впоследствии, когда были освоены методы выделения митохондрий из растительных тканей, разобщающая активность галопдфеноксикислот была продемонстрировапа п на этих объектах [8—11]. Более того, в опытах Веддинга и Блэка [12] под влиянием 2,4-Д у хлореллы наблюдалось заметное ослабление включения в АТФ. Недавно выяснено, что [c.170]

Гетерогенность митохондриальной фракции привела де Дюва и других исследователей к необходимости разработки и использования для ее разделения центрифугирования в градиенте плотности i[1027]. Обычно центрифугирование проводят в градиенте концентрации сахарозы, хотя в растворах с высокой ее концентрацией и соответственно с высокой плотностью некоторые органеллы могут разрушаться. Используют также растворы с градиентом концентрации полисахаридов — высокомолекулярных соединений. С помощью этих методов удалось разделить митохондрии, лизосомы и пероксисомы и показать, что они содержат разные наборы ферментов. Эти органеллы не очень различаются по размеру (табл. 12.1) плотности указанных частиц из печени крысы в 0,25 М растворе сахарозы, примерно одинаковы и равны 1,100—1,103 для лизосом, 1,099 для митохондрий и 1,088—1,095 для пероксисом. Предварительная обработка животных препаратами, способными адсорбироваться клетками и накапливаться в лизосомах, приводит к уменьшению плотности этих органелл и при последующем выделении структур обеспечивает лучшее разделение их при центрифугировании. В настоящее время разработаны приемы, позволяющие разделять органеллы всех трех видов и получать их в больших количествах. [c.85]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология