Полинуклеотидфосфорилаза

Аналогичные закономерности наблюдаются прн катализированном ферментами синтезе (биосинтезе) полимеров. Мономеры в этом случае являются бифункциональными соединениями, но вследствие высокой специфичности катализатора оказывается возможным взаимодействие лишь одной из функциональных групп мономера с определенным концом растущей полимерной цепи. Например, фермент полинуклеотидфосфорилаза, с помощью которого происходит биосинтез полирибонуклеотидов из нуклеозиддифосфа-тов, катализирует взаимодействие концевой 3 —ОН группы растущей полинуклеотидной цепи с пирофосфатной связью в мономере [c.368]

Исключительно важные исследования в этой области, связывающие химию белка с химией нуклеиновых кислот, осуществлены в СССР Ю. А. Овчинниковым с сотр. В частности, из Е. СоИ выделены полинуклеотидфосфорилаза, ДНК-полимераза-1, полинуклео-тидлигаза. Определена полная последовательность аминокислот цитоплазматической аспартатаминотрансферазы, состоящей из 824 аминокислотных остатков. [c.180]

Полинуклеотидфосфорилаза ДНК-полимераза I ДНК-полимераза II Катаболитная репрессия [c.187]

Синтез олигорибонуклеотидов ферментативным путем осуществляют обьино с использованием рибонуклеаз (РНаз) или полинуклеотидфосфорилаз (ПНФаз). В первом случае р-цию осуществляют по схеме [c.301]

Полинуклеотидфосфорилаза, являющаяся примером третьего класса полинуклеотидразруишющих ферментов, обратимо расщепляет полирибонуклеотиды в присутствии неорганического ортофосфата, давая нуклеознд-5 -дифосфаты [33]. Хотя этот фермент известен уже более 25 лет, его биологическая функция непонятна. Полинуклеотидфосфорилаза была первым ферментом, для которого установлено, что он способен полимеризовать нуклеозид-5 -дифосфаты схема (10) . [c.145]

Для полимеризации без начального лаг-периода чистому ферменту из некоторых бактерий, например из Е. oli, необходима затравка. Полинуклеотидфосфорилаза до сих пор не получена в чистом виде и нет информации о аминокислотных остатках, формирующих ее активный центр. Однако несмотря на отсутствие данных о детальном механизме ее действия, фермент интенсивно [c.145]

Фермент полинуклеотидфосфорилаза широко использовался для присоединения рибонуклеозид-5 -пирофосфата к З -гидроксильной группе динуклеозидфосфата или к акцептору большего размера. Недостатком используемого метода является образование в ходе реакции неорганического фосфата, который ускоряет обратный процесс, т. е. частичный фосфоролиз З -концевого остатка. Это затруднение было преодолено удалением фосфата из реакционной смеси по мере его образования [15]. [c.187]

Основные научные работы посвящены биохимии нуклеиновых кислот, ферментативным превращениям углеводов и жиров, механизму фотосинтеза. Используя фермент полинуклеотидфосфорилазу, выделенную из бактерий, синтезировал (1955) РНК (в отличие от природной она не обладала стереоспецифичностью и в ее молекулу входили не четыре типа нуклеотидов, а лишь один). Участвовал в работах по расшифровке генетического кода. [c.378]

Реакция, катализируемая полинуклеотидфосфорилазой, легко обратима. Фермент расщепляет РНК из самых различных источников, хотя S-PHK, по-видимому, устойчива к его действию. [c.479]

Механизм синтеза РНК в растениях in vivo не установлен. Свойства РНК-полимеразы позволяют полагать, что этот фермент участвует в синтезе по крайней мере какой-то части клеточной РНК. Роль полинуклеотидфосфорилазы неясна. Отсутствие способов для точного копирования и ограниченное распространение полинуклеотидфосфорилазы (очевидно, она отсутствует у животных и некоторых растений) свидетельствуют против участия этого фермента в синтезе РНК. Возможно, что основная его функция заключается в расщеплении РНК. [c.481]

При использовании бесклеточных экстрактов было получено подтверждение того факта, что т-РНК служит матрицей. Добавление очищенной РНК к хорошо отмытым рибосомам Е. oli значительно ускоряет включение аминокислот в белки. Данные, что именно добавленная РНК определяет специфичность образованного белка, были получены в опытах, в которых РНК заменяли синтетическими полирибонуклеотидами известного состава. Эти полимеры готовили, инкубируя соответствующие субстраты с полинуклеотидфосфорилазой. Ниренберг и Маттеи нашли, что добавление вместо РНК полиуридиловой кислоты приводит к заметному усилению включения фенилаланина. В такой степени не включалась ни одна другая аминокислота. Дальнейшие исследования показали, что фенилаланин включается в полифенилаланин в результате реакций, подобных тем, которые осуществляют включение аминокислот в белок. Одновременно было установлено, что, изменяя состав добавленных полирибонуклеотидов, можно специфически стимулировать включение других белковых аминокислот. Например, сополимер цитидиловой и гуаниловой кислот стимулирует включение пролина, тогда как сополимер адениловой и гуаниловой кислот усиливает включение лизина. На основании этих опытов можно заключить, что строение добавленной РНК определяет состав продукта реакции. [c.487]

Первые успехи в этой области относились еще к синтезу полирибонуклео-тидов (гомополимеров) с помощью фермента полинуклеотидфосфорилазы (Очоа и Гринберг-Манаго). Мономерами служили нуклеозиддифосфаты, поликонденсация шла с выделением ортофосфата. [c.197]

Полинуклеотидфосфорилаза позволяет осуществлять синтез РНК-подобпых полимеров с неспецифической нуклеотидной последовательностью [c.922]

Полинуклеотидфосфорилаза не требует матрицы и не синтезирует полимер со специфической нуклеотидной последовательностью. Цепь РНК необходима ей лишь в качестве затравки, которая просто обеспечивает наличие свободного 3 -гидроксильного конца, к которому могут присоединяться дополнительные остатки. Реакция протекает как в присутствии всех четырех исходных мономеров, так и в присутствии только одного из них. Нуклеотидный состав образующегося полимера отражает относительное соотношение в среде 5 -дифосфатов-пред-шественников. Поэтому маловероятно, чтобы в естественных условиях полинуклеотидфосфорилаза выполняла функцию РНК скорее она участвует в деградации РНК. [c.922]

Полинуклеотидфосфорилаза - очень ценный инструмент исследования, поскольку ее можно использовать для получения в лабораторий многочисленных РНК-подобных полимеров с различной нуклеотидной последовательностью и разным содержанием оснований. Такие синтетические РНК-полимеры позволили, как мы увидим дальше (гл. 29), составить словарь кодовых слов для аминокислот. [c.922]

В бактериальных клетках, зараженных некоторыми РНК-содержащими вирусами, были найдены РНК-зависимые РНК-репликазы. Они обладают специфичностью по отношению к вирусной РНК-матрице. Вьщеленная из бактерий полинуклеотидфосфорилаза может обратимо синтезировать РНК-подобные полимеры из рибонуклеозид-5 -дифосфатов. Хотя этот фермент способен добавлять рибонуклеотиды к З -гидроксильному концу полимера и удалять их оттуда, обычно он выполняет функцию деградации РНК. [c.923]

Различия между РНК-полимеразой и по-линуклеотидфосфорилазой. РНК-полимераза требует для транскрипции в качестве предшественников нуклеозид-5 -трифос-фаты, а с нуклеозид-5 -дифосфатами она не работает. Полинуклеотидфосфорилаза, наоборот, требует нуклеозид-5 -дифос-фаты, а с 5 -трифосфатами она не работает. [c.925]

Использовавшиеся в этих экспериментах синтетические полинуклеотиды были получены с помощью полинуклеотид-фосфорилазы (разд. 28.28), которая легко образует РНК-подобные полимеры из ADP, UDP, DP и GDP. Этому ферменту не нужна матрица он синтезирует полимеры, нуклеотидный состав которых отражает относительные концентрации исходных нуклеозид-5 -дифосфатов, присутствующих в среде. Если в среде содержится один уридиндифосфат, то полинуклеотидфосфорилаза синтезирует только polyU. Если исходная смесь состоит из двух частей ADP и одной части GDP, то синтезируется полимер, в котором около двух третей составляют остатки А и одну треть - остатки G. В таком полимере с неспецифической нуклеотидной последовательностью, вероятно, много триплетов ААА, меньше триплетов AAG, AGA и GAA, сравнительно мало триплетов AGG, GGA и GAG и очень мало триплетов GGG. Используя разные синтетические полирибонуклеотиды, полученные при помощи полинуклеотидфосфори-лазы из различных исходных смесей ADP, UDP, GDP и DP и выполняющие роль мРНК, вскоре удалось определить состав триплетов для всех аминокислот. Однако эти эксперименты не давали возможность выявить нуклеотидную последовательность в каждом кодирующем триплете, т.е. понять, в каком порядке расположены буквы, составляющие этот кодон. [c.948]

При помощи фермента полинуклеотидфосфорилазы (см. стр. 252) можно получить биосинтетические полирибонуклеотиды с некоторыми довольно интересными свойствами. Если в качестве субстрата используют аденозиндифосфат (АДФ), то образующийся полимер представляет собой рибополинуклеотид, содержащий только одно основание — аденин. Обычно он обозначается как поли-А. Таким же образом из субстрата УДФ можно получить лоли-У, а из эквимо.т1ярной смеси АДФ и УДФ — продукт поли-АУ. [c.55]

Рибонуклеаза разрушает также некоторые полирибонуклеотиды, образующиеся под действием полинуклеотидфосфорилазы. [c.87]

Полинуклеотидфосфорилаза может быть отнесена к депо.лиме-разам РНК. Фермент катализует обратимый процесс, в ходе которого полирибонуклеотид реагирует с неорганическим фосфатом при этом образуется рибонуклеотиддифосфат. Более детально этот вопрос рассматривается в гл. ХП. [c.88]

Продолжительность жизни т-РНК в клетке коротка возможно, что она разлагается под действием полинуклеотидфосфорилазы [98—100]. Для бактериальных клеток, у которых одно поколение [c.243]

В Е. oli, зараженной фагом MS2, специфичная РНК-зависимая РНК-полимераза (РНК-синтетаза) появляется вскоре после заражения и достигает максимума через 30—45 мин. Эта полимераза была выделена в очищенном виде из экстрактов зараженных клеток и отделена от ДНК-зависимой РНК-полимеразы и от полинуклеотидфосфорилазы [142, 171—173]. В очищенной форме она представляет собой голофермент, тесно связанный со своей природной матрицей, двухцепочечной репликативной формой РНК фага MS2. Этот голофермент синтезирует in vitro вирусную РНК фага MS2 тина родительской в присутствии четырех рибонуклеозид- [c.249]

Смотреть страницы где упоминается термин Полинуклеотидфосфорилаза: [c.686] [c.57] [c.145] [c.150] [c.150] [c.601] [c.368] [c.101] [c.498] [c.778] [c.101] [c.498] [c.922] [c.922] [c.1004] [c.278] [c.281] [c.62] [c.88] [c.229] [c.252] [c.252]

Молекулярная биология Структура рибосомы и биосинтез белка (1986) -- [ c.14 , c.57 ]

Биохимия (2004) -- [ c.423 ]

Аффинная хроматография (1980) -- [ c.315 ]

Основы биохимии Т 1,2,3 (1985) -- [ c.922 , c.925 , c.948 ]

Биохимия нуклеиновых кислот (1968) -- [ c.58 , c.88 , c.243 , c.248 , c.252 , c.256 , c.275 ]

Биологическая химия Издание 4 (1965) -- [ c.379 ]

Основы биологической химии (1970) -- [ c.512 , c.515 ]

Органическая химия нуклеиновых кислот (1970) -- [ c.97 , c.100 , c.103 , c.104 , c.289 ]

Неорганическая биохимия Т 1 _2 (1978) -- [ c.630 ]

Молекулярная генетика (1974) -- [ c.436 , c.437 ]

Биохимия Издание 2 (1962) -- [ c.455 ]

Искусственные генетические системы Т.1 (2004) -- [ c.116 , c.187 ]

Гены и геномы Т 2 (1998) -- [ c.282 , c.285 ]

Основы биохимии (1999) -- [ c.230 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология