Зональный анализ

Тритий, излучающий р-частицы с очень низкой энергией, детектируется с наименьшей эффективностью, и поэтому его следует рассмотреть особо. В связи с тем что наиболее эффективным методом регистрации является жидкостный сцинтилляционный счет, наилучшие результаты при работе с этим изотопом дает метод зонального анализа. Тритий хорошо детектируется флюорографическим методом, так что совместное применение зонального анализа и флюорографии позволяет довольно точно зарегистрировать распределение веществ на хроматограмме. Большинство сканирующих приборов определяют тритий с низкой эффективностью и непригодны для работы с малыми количествами этого изотопа. [c.95]

Хорошее разрешение можно получить в зональном анализе, при этом снимаемые зоны должны быть достаточно узкими. На практике возникают трудности со строго количественным переносом зон адсорбента с пла- [c.98]

В продаже имеются соскабливающие приспособления для зонального анализа, но чаще всего соскабливание сорбента с тонкослойных пластин делается вручную. [c.99]

В связи с тем что в Великобритании принято постановление, касающееся здоровья и безопасности при проведении работ, необходимо учитывать степень опасности, возникающей при осуществлении различных радиохроматографических операций. Сейчас установлено, что работа с порошками силикагеля в лаборатории без определенных предосторожностей нежелательна, так как работающий при этом подвергается некоторому (хотя и меньшему, чем на промышленных предприятиях) риску заболевания силикозом. В связи с этим все методы исследования тонкослойных пластинок с силикагелем, которые включают процедуру соскабливания порошка с пластинки, например зональный анализ, анализ с элюированием или сжиганием, связаны с определенной сте- [c.101]

Такой способ позволяет сэкономить время, хотя при этом можно пропустить зоны, содержащие небольшое количество радиоактивности. Если такие потери недопустимы, то проводят зональный анализ всей хроматограммы. [c.116]

Важное условие зональной аналитической аффинной хроматографии состоит в том, что концентрация подвижного компонента [Р] по мере прохождения зоны через слой адсорбента постоянно изменяется. Поэтому члены, содержащие [Р], не включаются в выражения, относящиеся к объемам элюирования и константам диссоциации (см., например, приведенные выше уравнения). Пренебрежение [Р] допустимо только в том случае, если этот параметр мал по сравнению с константой диссоциации /Сь- Проведение экспериментов по зональному элюированию при низком [р] обычно легко осуществимо и особенно желательно при анализе труднодоступных биомолекул. Использование низких [Р] в зональном анализе аналогично применению низких концентраций фермента в твердофазном ферментативном кинетическом анализе [7]. Было экспериментально показано (например, в работе [5]), что при низком (по отношению к /Сх) количестве фермента, введенного в аффинную матрицу, рассчитанные константы диссоциации практически не зависят от количества использованного подвижного компонента. В то же время в работе [8] предложены уравнения расчетов по методу постоянного элюирования/фронтального анализа, в которые входит точное значение концентрации подвижного компонента, нанесен ного на аффинную колонку (см. также гл. 6). С практической точки зрения метод зонального элюирования экспериментально более удобен и требует гораздо меньшего количества подвижного компонента. Таким образом, зональное элюирование, по-видимому, наиболее подходящий метод для изучения большинства взаимодействий, представляющих биологический интерес. Следовательно, существует необходимость в чувствительных аналитических методах для проведения элюирования и детектирования малых количеств подвижного компонента. [c.223]

MefOA зонального анализа может занимать очень много времени, особенно если ТСРХ используется широко. То же самое можно сказать и в отношении анализа с сжиганием проб, даже три наличии автоматического прибора для сжигания. Ьремя проведения анализа обоими этими методами будет еще больше, если активность измеряется методом жидкостного сцинтилляционного счета. [c.100]

В начале этой главы отмечалось, что некоторые методы измерения радиоактивности в ТСРХ являются разрушающими и в этом случае обратное извлечение меченых соединений становится трудной задачей. Зональный анализ, анализ с элюированием, как и метод сжигания, относятся к числу разрушающих методов, и их нельзя применять в том случае, когда количество меченого вещества для хроматографии ограничено. Однако очень часто для анализа можно взять узкую полоску хроматограммы, при этом теряется лишь часть пробы. Если же потери недопустимы, то можно воспользоваться методами радиосканирования или авторадиографии. [c.100]

Ранее уже упоминалось об увеличении чувствительности регистрации при использовании метода флюорографии. Однако если на хроматограмме присутствуют достаточно большие количества трнтированных соединений и можно обеспечить хороший контакт между пленкой и хроматограммой, то применяется обычная авторадиография. При очень малых количествах веществ нужны очень большие выдержки, и тогда лучше использовать зональный анализ с жидкостным сцинтил-ляционным счетом. [c.113]

В недавнем обзоре методов ТСРХ Снайдер [3]i утверждал, что зональный анализ в сочетании с жидкостным сцинтилляционным счетом является наиболее чувствительным и точным методом определения меченых [c.115]

При определении радиохимической чистоты вычисляют относительные концентрации основного меченого вещества и примесей. Обычно применяют метод зонального анализа с измерением активности суспензии или метод радиосканирования с последующим сравнением [c.122]

В литературе появилось несколько сообщений об использовании ТСРХ в качестве метода анализа при биохимических исследованиях липидов [62, 63]. Вопросы количественного определения меченых липидов затронуты в обзоре Прайветта и др. [64], в который включены статьи, опубликованные до 1966 г. Несколько позже Снайдер [65] предложил использовать зональный анализ для определения липидов в ТСХ и подробно рассмотрел вопрос о детектировании меченых соединений, для которых не существует соответствующих эталонных веществ. После разделения смеси трех липидных соединений, меченных С и Н, проводилось сравнение результатов, полученных при анализе зон щириной 10, 5 и 2 мм. На рис. 4.26, где представлены полученные результаты, ясно видно преимущество анализа зон щириной 2 мм. Аналогичные результаты были получены для смесей веществ, меченных С и Н. В следующей работе [66] с участием того же автора описано разделение образцов липидов, меченных обоими [c.123]

Обычно с помощью ТСХ проводят сравнение хроматографического поведения радиоактивных метаболитов, выделенных из растений, почвы или животных, и немеченых эталонных соединений. В качестве эталонных используют вещества, которые могут быть продуктами разложения изучаемых лекарств или пестицидов. Детектирование меченых соединений обычно проводят с помощью радиосканирования, авторадиографии, зонального анализа или комбинации этих методов. Немеченые эталонные вещества можно детектировать по ультрафиолетовому поглощению, и в этом случае в адсорбент нужно добавлять флуоресцирующие вещества. Эти вещества можно также наносить на хроматограммы распылением. [c.127]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология