Иониты на основе целлюлозы

В последнее время для разделения ферментов широко используют иониты на основе целлюлозы. [c.203]

В усовершенствованном варианте этого метода [6] возможно проведение процесса в микромасштабе. На рис. 24.2 показана используемая микроколонка. Для разделения 3—5 мкМ каждого гликозаминогликана берут 400 мг дауэкса 1-Х2 (100—200 меш) на колонку и элюирование выполняют с применением линейного солевого градиента в 8 М растворе мочевины. Кроме того, мочевина уменьшает до минимума неэлектростатические связи белков с ионитами на основе целлюлозы. Присутствие 8 М раствора мочевины в солевом градиенте сдвигает хроматографические зоны гликозаминогликанов в сторону более низких удерживаемых объемов, указывая тем самым, что в отсутствие мочевины значительную роль в процессе разделения играют гидрофобные связи. В присутствии мочевины пики лучше разрешаются, что свидетельствует о том, что неэлектростатическое связывание препятствует процессу разделения. Разделение микроколичеств гликозаминогликанов на дауэксе 1-Х2 является, согласно данным некоторых исследователей [6], лучшим классическим вариантом метода, использующего хлорид цетилпиридиния (без органических растворителей). [c.139]

Иониты на основе целлюлозы представляют собой замещенные ионообменными группами производные природной целлюлозы, в которых характерная субмикроскопическая структура целлюлозы остается более или менее неизменной. Они применяются для фракционирования высокомолекулярных ионных соединений, а также в биохимических исследованиях для разделения белков, сахаров, ферментов и др. [c.66]

ИОНИТЫ НА ОСНОВЕ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ [c.234]

И. X. применяется для разделения катионов металлов, напр, смесей лантаноидов и актиноидов, 2г и НГ, Мо и W, КЬ и Та последние разделяют на анионитах в виде анионных хлоридных комплексов в р-рах соляной и плавиковой к-т. Щелочные металлы разделяют на катионитах в водных и водно-орг. средах, щел.-зем. и редкоземельные металлы-на катионитах в присут. комплексонов. Большое значение имеет автоматич. анализ смесей прир. аминокислот на тонкодисперсном сульфокатионите.в цитратном буфере при повыш. т-ре. Аминокислоты детектируют фотометрически после их р-ции с нингидрином или флюориметрически после дериватизации фталевым альдегидом. Высокоэффективная И. X. (колонки, упакованные сорбентом с размером зерен 5-10 мкм, давление для прокачивания элюента до 10 Па) смесей нуклеотидов, нуклеозидов, пуриновых и пиримидиновых оснований и их метаболитов в биол. жидкостях (плазма крови, моча, лимфа и др.) используется для диагностики заболеваний. Белки и нуклеиновые к-ты разделяют с помощью И. X. на гидрофильных высокопроницаемых ионитах на основе целлюлозы, декстранов, синтетич. полимеров, широкопористых силикагелей гидрофильность матрицы ионита уменьшает неспецифич. взаимод. биополимера с сорбентом. В препаративных масштабах И. х. используют для вьщеления индивидуальных РЗЭ, алкалоидов, антибиотиков, ферментов, для переработки продуктов ядерных превращений. [c.264]

Как уже отмечалось, иониты на основе целлюлозы и декстрана не обладают необходимыми механическими и ионообменными свойствами и вследствие этого их редко используют для хроматографического разделения аминокислот. Карбоксиметилцеллюлозу применяли для отделения лизина от его олигомеров и полимеров [26]. Известны попытки модификации DEAE-и QAE-сефадексов путем введения дополнительных поперечных связей и применения их для разделения цистеина и глутатиона [27]. Использование дауэкса 1-Х8 и сефадекса G-10 означает переход от ионообменной хроматографии к гелевой [28]. [c.334]

При фракционировании белков обычно применяют иониты, содержащие карбоксиметильную и диэтиламиноэтильную функциональные группировки, однако эти иониты не вполне подходят для разделения пептидов. Как правило, почти все кислотные пептиды адсорбируются на катионите при pH 3,0—3,5 в буфер ном растворе с низкой ионной силой, откуда могут быть элюи рованы при рн 6—9 и при более высокой ионной силе. Карбо ксилсодержащие иониты слабо диссоциированы при pH 3, и следовательно, обладают пониженной емкостью. Кроме того в разбавленных электролитах, т. е. в условиях проведения сорб ции, слишком велика буферная емкость ионита. Скачкообразное изменение pH элюента приводит на практике к одновременному элюированию группы пептидов. Аналогичные недостатки свойственны ионитам с ВЕАЕ-группой, особенно при работе с летучими буферными растворами. Изменение ионной силы и значения pH во время элюирования вызывает сжатие столбика сорбента, нарушение скорости потока и искажение профиля элюирования. В наибольшей степени этот эффект выражен у ионитов на основе слабосшитых гелей, однако в какой-то степени это свойство характерно и для модифицированных целлюлоз. И тем не менее некоторые типы ионитов на основе целлюлозы находят применение для разделения небольших пептидов. К ним относятся фосфоцеллюлоза, ЗЕ-целлюлоза, 8Р-целлюлоза и РАЕ-сефадекс. [c.411]

Рабочие диапазоны ионитов на основе сшитого декстрана (по данным фирмы Pharma ia [15]) приведены в табл. 35.2. Примерно так же выглядит рабочая область ионитов на основе целлюлозы, хотя, например, гликопротеины хроматографируют на DEAE-целлюлозе даже при pH 9,9. Эффективность ионообменников на основе целлюлозы может быть выше, если более [c.432]

При разделении оснований, нуклеозидов и нуклеотидов используют различия в константах диссоциации рКа, табл. 37.5), коэффициентах распределения, в форме и размерах молекул. В качестве сорбента обычно используют синтетические иониты [32, 33] в сочетании с градиентным элюированием [34, 35]. При анализе последовательности нуклеотидов в нуклеиновых кислотах олигонуклеотиды—-продукты ферментативного гидролиза нуклеиновых кислот — разделяют на ионитах на основе целлюлозы или геля декстрана [36, 37] в градиенте pH и ионной силы в присутствии мочевины [38]. [c.40]

К анионитам на основе целлюлозы относятся диэтиламиноэтилцеллюлоза (ДЭАЭ-целлюлоза), триэтиламиноэтилцеллюлоза (ТЭАЭ-целлюлоза) эктео-ла-целлюлоза, аминоэтилцеллюлоза (АЭ-целлюлоза). К катионитам на основе целлюлозы относятся карбоксиметилцеллюлоза (КМ-целлюлоза), сульфо-этилцеллюлоза (СЭ-целлюлоза), фосфорилированная целлюлоза. Характеристика некоторых используемых в тонкослойной хроматографии типов ионитов на основе целлюлозы приведена ниже [c.111]

Для обмена с участием ионов большого размера следует применять иониты типа гелей с относительно небольшим числом поперечных связей, однако с уменьшением степени сшито-сти механическая прочность ионита снижается и в конце концов может оказаться ниже допустимого предела. В подобных случаях лучше пользоваться ионитами гетерогенной структуры с большой внутренней поверхностью, на которой идет процесс сорбции. К таким ионитам относятся макропористые (макро-ретикулярные) ионообменные смолы и иониты на основе целлюлозы. Первые приготавливают путем сополимеризации в присутствии инертного компонента, осаждающего образующийся сополимер. Сверхмикроскопические частицы (10—100 нм) образуют агрегаты с внутренними пустотами (макропорами) примерно одинаковых размеров (рис. 5.5). В целлюлозных ионитах агрегирование полисахаридных цепей обусловлено их ориентацией вдоль оси волокна, что приводит к образованию кристаллических областей. [c.238]

Сорбциоииая очистка. В молекуле фермента имеются функциональные группы, сообщающие ей при соответствующих значениях pH среды кислотные или щелочные свойства. Поэтому белки обычно способны сорбироваться по ионообменному механизму. Для сорбции белков чаще всего применяют иониты на основе целлюлозы катионит — карбоксиметилцеллюлозу (КМЦ) и анионит — диэтиламиноэтилцеллюлозу (ДЭАЭ). В последнее время появилось множество высокоселективных ионитов, из которых можно выбрать наилучший для каждого конкретного случая термически обработанный крахмал, сефадексы на основе [c.131]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология