Сшивание белков

Хотя облучение в умеренных дозах не приводит к сшиванию белка шерсти, было показано, что действие ионизирующих излучений вызывает сшивание ряда других белков. При облучении кератина шерсти дозой [c.436]

Внутримолекулярное сшивание фермента бифункциональными реагентами (рис. 24,6). Модификация фермента бифункциональными агентами в принципе может привести к наложению на белковую глобулу внутримолекулярных ковалентных сшивок. Следует ожидать, что сшивание увеличит конформационную жесткость белка и, следовательно, его стабильность. Этот подход (внутримолекулярное сшивание белка) активно используется в природе для увеличения стабильности белковых структур. К числу природных сшивок относятся как ковалентные S—S-связи, так и нековалентные солевые мостики , ионы Са " " и других металлов, связанные с молекулой белка, и т. п. [c.131]

Следует отметить, что эмпирический характер поиска оптимального сшивающего агента несколько снижает ценность метода внутримолекулярного сшивания белков для практических целей. Действительно, для каждого вновь взятого белка или при использовании нового гомологического ряда бифункциональных реагентов работу по подбору наилучшего сшивающего агента надо проводить заново. [c.131]

Применение активированного полимера-носителя для связывания белка позволяет в определенной мере экранировать белок в конъюгате от воздействия среды организма (например, от ферментативного протеолиза или взаимодействия с ингибиторами), сохраняя в то же время его способность к реакциям с низкомолекулярными субстратами (в меньшей мере — с высокомолекулярными). Сшивание белка дает возможность избежать про- [c.166]

Если один из сшиваемых белков гликопротеин, то он может быть превращен периодатным окислением углеводной части в диальдегид и сшит с другим или тем же белком без участия дополнительных реагентов. Для сшивания белков могут быть также использованы монофункциональные реагенты — водорастворимые карбодиимиды, реагент Вудворда и т. д., образующие [c.193]

Набор разнообразных молекул, присутствующих в реакционной среде при сшивании белков глутаровым диальдегидом, по-видимому, и обеспечивает высокую эффективность реакции наряду со стабильностью части образующихся связей [116]. То же относится и к другим алифатическим диальдегидам. Применение в медицинских целях сшитых белков неопределенной и трудно воспроизводимой структуры едва ли целесообразно. Предварительная очистка глутарового диальдегида не меняет положения, так как побочные продукты могут образоваться уже в ходе реакции с белком [122]. Несколько улучшить положение может восстановление или инактивация аминами продуктов сшивания, так как именно наличие свободных альдегидных групп обусловливает токсичность глутарового диальдегида [c.195]

Рис. 6.4. Некоторые бифункциональные реагенты для сшивания белков.

Более прямым методом локализации специфических контактов аминокислотных остатков, участвующих во взаимодействии с ДНК, является фотохимическое сшивание белка с ана- [c.95]

Сшивание белков типа альбумина бычьей плазмы и кератина шерсти [163] уя<е рассматривалось раньше в связи с реакциями сульфгидрильных групп с бмс-малеимидами. Данные о применении карбодиимидоп для сшивания желатины приведены в работе [348]. Александер, Фокс, Стаей [c.427]

Были описаны также результаты сшивания белков с белками с помощью диизоцианатов [349]. Кроме того, опубликованы некоторые примеры прививки полимеров на белки путем взаимодействия изоцианатной группы с аминной. Так, Крона и Найквист [350] показали, что шерсть реагирует с сополимером, полученным при совместной полимеризации 90% этилакрилата и 10% алилизоцианата. Этот сополимер наносят на шерсть из толуольного раствора, а затем обработанную таким образом шерсть прогревают непродолжительное время при 143°. Полимеры, полученные из мономеров общей формулы СН2=СН—Аг—N O, аналогичным образом реагируют с белковыми волокнами [351] и с кожей [352]. [c.428]

Препараты ферментов повышенной молекулярной массы могут быть изготовлены путем межмолекулярного сшивания белков бифункциональными реагентами. Такие препараты оказываются стабильными в физиологических условиях, повышенная молекулярная масса исключает немедленное их выведение почками. В ряде случаев показано (димеры и полимеры рибонуклеа-зы), что усиливается захват конъюгированных молекул культурами клеток. [c.125]

Процесс сшивания белка бифункциональными реагентами химически относительно прост и обеспечивает высокое содержание белка в конъюгате. Можно сшивать не только одинаковые, но и разные белки, в особенности при использовании гетероби-функциональных агентов, когда функциональные группы сшивающего агента активируются или реагируют в разных условиях. Недостаток подхода заключается в образовании не только межмолекулярных, но и внутримолекулярных сшивок, которые не всегда желательны, хотя в ряде случаев такие сшивки ( скобки ) предложены для стабилизации белковых глобул [5] (А и В — реакционноспособные группы бифункционального реагента) [c.165]

Для связывания белковых молекул друг с другом (межм лекулярное сшивание белка) предложено большое число б функциональных реагентов типа X — А — У, где X и У группы, способные реагировать с функциональными группа белка, а А — вставка , определяющая жесткость связи и рг стояние между белками [116—118]. Если группы X и У од наковы, то сшивающий реагент называют гомобифункциона/ ным, так как реакционная способность обеих его групп пр мерно одинакова. Если X и У — разные группы, то возника возможность селективного присоединения сшивающего аген к белку одним концом и после удаления избытка реагента взг модействия другого конца с тем же или другим белком, в иных условиях. Такие реагенты называют гетеробифункц нальными, и они предпочтительны почти во всех случаях, в е бенности при связывании различных белков. [c.192]

Основные проблемы, возникающие при сшивании белков л биомедицинского применения, можно свести к двум. Во-перв) в большинстве случаев нельзя допускать образования слишк крупных (состоящих из многих молекул белка) конъюгат а тем более получения плохо растворимых продуктов. Во-в [c.192]

Белковые МЧ, способные к биодеструкции, получают не только термической полимеризацией, но и сшиванием белка. Так, альбуминовые микросферы диаметром 10—25 мкм для внутриартериальной подачи ФАВ (5-фторурацил и блеомицин) в опухоль получены сшиванием эмульгированной смеси альбумина и ФАВ глутаровым диальдегидом [24]. Количество сшивающего агента определяло скорость высвобождения ФАВ 1п vitro. [c.227]

Детальное исследование реакции диальдегиддекстрана с Hi показало, что М конъюгата растет по мере прохождения реак ции (от 3 ч до 5 сут), причем уже через 6 ч свободный Hi практически исчезает из реакционной массы [26]. Одновре менно увеличивается сродство конъюгата к Ог после 6-часово1 реакции кислородно-диссоциационная кривая конъюгата очен близка к таковой для Нв, но через 32 ч или 5 сут сродство к О резко возрастает и форма кривой меняется. Это указывает hi то, что многоточечное сшивание белка полимером приводи к резкому изменению свойств Нв, возможно, связанному с по [c.248]

Взаимодействия между двумя белками чаще всего выявляют in vitro, используя биохимические процедуры, такие как кофракционирова-ние при хроматографии, шиммунопреципита-ция или химическое сшивание белков. [c.326]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология