Спектрофотометрия разностная

Обычный качественный и количественный биохимический анализ, включая многочисленные > колориметрические исследования. Количественные определения ферментов и кинетические исследования. Разностные спектры, спектры действия, турбидиметрия и нефелометрия Обычный количественный анализ, исследование свойств ферментов, кинетики реакций, конформационной подвижности полимеров. Большая по сравнению со спектрофотометрией чувствительность. Качественный анализ Качественный анализ. Идентификация молекул среднего размера по спектрам. В основном применяется в исследовательских целях Качественное и количественное определение металлов, особенно в клинической биохимии. Эмиссионная методика [c.182]

Дифференциальный метод (другие названия разностная фотометрия или спектрофотометрия, прецизионная фотометрия или спектрофотометрия, относительная фотометрия) [31—33] состоит в том, что поглощение раствора [c.19]

Изменения степени восстановленности всех компонентов дыхательной цепи определяют, применяя двухлучевой спектрофотометр другого типа (а split beam spe trophotometer). При этом через два образца пропускают два луча одной и той же длины волны. Допустим, что у одного образца компоненты дыхательной цепи окислены вследствие отсутствия субстрата. У другого образца в анаэробных условиях в присутствии субстрата компоненты дыхательной цепи находятся в восстановленном состоянии. Разница в оптической плотности двух образцов, определенная при нескольких длинах волн, позволяет получить разностный спектр. На фиг. 61 показано восстановление флавопротеида и цитохромов Ь, с, а и as при восстановлении митохондрий из клубней картофеля с ио.мощью НАД-Но в анаэробных условиях [17i. [c.222]

Если в распоряжении имеется подходящее вещество для сравнения, то для исследования толстых образцов в качестве альтернативного метода можно использовать разностную спектроскопию в сочетании с растяжкой по ординате. В таком случае чувствительность диспергирующих спектрофотометров ограничена только шириной рабочего элемента приемника, так как величина растяжки по ординате и толщина образца могут увеличиваться до тех пор, пока [c.272]

В последние годы вариант высокоточной фотометрии — дифференциальная (разностная) фотометрия дополнился вариантом прямого измерения абсорбции, основанным на использовании современной высокоточной микропроцессорной аппаратуры. Показано, что стандартное отклонение 5 измерения абсорбции вплоть до А 2 на микропроцессорном спектрофотометре Ри 8800 методом прямой фотометрии находится на уровне (1 2)-10 при времени интегрирования 10 с и ширине щели 8 нм. При Л>2,2 5 увеличивается в 2—3 раза. Дифференциальный вариант метода (абсорбция раствора сравнения Л 2) позволяет при этом уменьшить 5 примерно в 2 раза. [c.38]

Из дополнительных приспособлений к ИК-спектрофотометру, используемому в сочетании с разностной спектроскопией, особенно полезно устройство для растяжки по ординате. Оно имеется в продаже или его можно сконструировать в лаборатории [113]. Это приспособление производит электрическое умножение выходного сигнала, так что амплитуда отклонения пера увеличивается в 5, 10 или 20 раз и т. д. по желанию. Увеличение амплитуды сигнала полезно только при условии сохранения прежнего незначительного уровня шумов. Для этого необходимо увеличить ширину щели в корень квадратный раз из коэффициента растяжки и понизить усиление, чтобы ограничить уровень шума. Растяжка по ординате наиболее эффективно применяется в коротких интервалах длин волн, так как крайне трудно настолько хорошо отрегулировать кюветы, чтобы проводить сканирование в широкой области. [c.246]

Разностные спектры получают непосредственно простым приемом в спектрофотометре Бекмана (модель Ви), используя в качестве соответствующего фонового раствора нейтральный раствор. Приготовляют исходный раствор лигнина в буферном водно-щелочном растворителе и делят на две аликвотные части. Одну из них нейтрализуют, а затем оба раствора разбавляют до одного и того же объема. Таким образом, концентрация образцов в обоих растворах, несомненно, одинакова. Перевод наблюдаемого различия в величинах поглощения в содержание фенольных гидроксильных групп тре- [c.241]

Производную спектрофотометрию было бы логичнее называть дифференциал ной, поскольку в ней используется операция лифференцирования, в то время как ДJ спектрофотометрии, обычно называемой дифференциальной (см. раздел 1.4), бол( подходит термин разностная сп ктроЛотометрпя. Такая тепминология принята, напр мер, в полярографии и позволяет избежать многих недоразумений. Однако в данно случае авторы не рискуют отступить от традиций, устоявшихся в литературе, [c.22]

Жвдкие образ1щ при нагревании или охлаядении меняют свой объем, что приводит к изменению концентрации раствора. При разности температур в двух каналах спектрофотометра этот эф рект вызывает появление разностной оптической плотности, спектральный ход которой подобен обычному спектру. Это маскирует проявление изменения молекулярных характеристик при изменении температуры. В дальнейшем, говоря о дифференциальных спектрах, мы будем иметь в виду спектры коэффициента экстинкции, где исключено влияние изменения плотности раствора. Температурный дифференциальный спектр жидких растворов имеет в качестве линии фона спектральную кривую, которая была бы вызвана только изменением плотности раствора , кривая5). [c.221]

Поскольку основные принципы использования неавтономных ЭВМ при спектрофотомет рических исследованиях особых видов уже изложены, нет необходимости подробно описывать аспекты совместного применения ЭВМ и обычных спектрофотометров. Отметим только, что описанная в предыдущем разделе вычислительная система идеально подходит для сбора обычных спектров поглощения и спектров кругового дихроизма неавтономная ЭВМ производит коррекцию базовой линии (в большинстве случаев с помощью многопотенциометрических схем), сбор разностных дифференциальных спектров (полезных при анализе спектральных областей, для которых характерно наличие минимумов, максимумов и плечей) и усреднение (накопление) спектров для увеличения отношения Сигнал/Шум. Процедура накопления особенно полезна [c.216]

Растворы уреазы (25 нМ) в воде (pH 6) обрабатывали ВЧ-ультразвуком в течение 1.5-2 ч при температуре 56°С в присутствии возрастаюшдх концентраций полимерного антиоксиданта по-ли(ДСГ) в диапазоне от l( до 10- М. В табл. 5 представлены константы скорости инактивации уреазы ин и ку в поле УЗ-кавитации в присутствии поли(ДСГ). Величины и уз снижаются в 2 и 3 раза в присутствии 1.0 нМ поли(ДСГ), т.е. полимерный антиоксидант сильно тормозит УЗ-инактивацию уреазы в присутствии ингибитора в концентрации, которая в 25 раз ниже концентрации белка. Увеличение концентрации по-ли(ДСГ) в пределах 10- -10- М вызывает рост всех трех констант скорости инактивации уреазы пропорционально содержанию ингибитора, что связано с его непосредственным взаимодействием с ферментом. В нашей лаборатории показано, что поли(ДСГ) в воде представляет собой полиэлектролит [30], способный взаимодействовать с белками - амфолитами, что подтверждено на примере сывороточных альбуминов человека и быка методами разностной спектрофотометрии и флуориметрии [31]. Прочные нековалентные комплексы поли(ДСГ) с уреазой характеризуются снижением активности фермента в них в условиях УЗ-кавитации (повышение уз и ) и при [c.129]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология