Ультрацентрифугирование Арчибальда

Интерпретация данных диффузии и ультрацентрифугирования оставалась сложной и противоречивой до тех пор, пока исследованию подвергали только пеидеальные растворы с концентрационной зависимостью. Позже при исследовании близких к идеальным растворов [19] удалось получить более точные распределения по молекулярным весам по данным диффузии и ультрацентрифугирования. В настоящее время кривые распределения по молекулярным весам наиболее часто строят по данным ультрацентрифугирования, что объясняется развитием метода неустановившегося равновесия Арчибальда [31] Маккормиком [32] и метода скоростной седиментации в идеальном растворителе Кантовом [27]. Методы изотермической диффузии редко используют для определения кривых полидисперспости. Тем не менее Даун с сотр. [5—7, 25, 26, 30] в значительной мере развил теоретические и экспериментальные основы метода диффузии. Но даже после таких экспериментальных и теоретических разработок метод изотермической диффузии остается менее популярным, поскольку в этом случае пе происходит разделения макромолекул по длинам в процессе диффузии, как это имеет место при ультрацеитрифугировании. Перекрывание границ диффузии макромолекул с большими и средними молекулярными весами ограничивает разрешающую способность метода диффузии. [c.262]

Молекулярный вес образца может быть определен по одновременному измерению скорости седиментации в очень больших полях центробежной силы и коэффициента диффузии полимера в растворе. Ультрацентрифугирование нашло широкое применение при определении молекулярных весов таких компактных макромолекул, какими являются белки. Для статистических клубков применение метода скоростной седиментации осложняется тем, что при конечной концентрации раствора макромолекулы, перекры-ваясь, оказывают взаимное влияние друг на друга при седиментации. Это затрудняет интерпретацию экспериментальных данных. Средневесовой молекулярный вес полимеров, макромолекулы которых представляют собой статистические клубки, обычно определяют методами равновесного центрифугирования или методом Арчибальда. Однако для определения молекулярных весов кристаллических полиолефинов метод ультрацентрифугирования не применялся быстрый и удобный метод скоростной седиментации с успехом может быть применен для оценки молекулярно-весового распределения полиолефинов. [c.156]

Общие замечания [53, 54]. Большинство видов нативной ДНК являются малопригодными объектами для изучения методами равновесного ультрацентрифугирования из-за их высокого молекулярного веса и низких коэффициентов диффузии. Оказалось, что очень длительное центрифугирование и (или) низкие скорости вращения ротора совершенно неприемлемы для ДНК. Однако для ДНК с небольшим молекулярным весом этот метод в принципе может быть использован. Один из таких образцов (ДНК, дегра,дированная нод действием кислоты до молекулярного веса 25 ООО) был изучен методом Арчибальда [114]. [c.240]

ИЗ работы Лундберга и Доти [17], медленная реакция, имеющая первый порядок в начале процесса, в дальнейшем становится быстрой, хотя и на второй стадии общий первый порядок реакции сохраняется. Достаточно резкое изменение скорости процесса происходит в тот момент, когда DP продукта достигает значенияв—10. И действительно, если полимеризацию инициируют полипептидами DP > 10 с концевой аминогруппой, удается наблюдать лишь быструю стадию реакции. Молекулярновесовое распределение образующегося полимера оказалось очень широким [26]. Это установлено для полимера молекулярного веса около 20 ООО методом Арчибальда (ультрацентрифугирование при подходе к равновесию). Если в системе существует обрыв, то ожидаемое пуассоновское распределение должно уширяться, однако расчеты, выполненные Качальским [37], показали, что учет обрыва не может объяснить такого широкого молекулярновесового распределения, которое наблюдал Доти [26]. Более того, последние исследования Собера [93] указывают на бимодальное молекулярновесовое распределение продукта. [c.564]

Болдуин [46] и Гехатиа [135] описали методы вычисления коэффициента диффузии из данных по скорости седиментации, в которых, однако, не учтена зависимость 8 от с. Недавно был предложен другой метод, подобный методу Болдуина, но более простой по вычислениям [1361. Точность всех этих методов, вообще говоря, невелика. Следует отдать предпочтение методу Арчибальда, дающему 1М и 5, из которых в случае необходимости можно вычислить О. В 1958 г. было предложено два других способа определения О из данных ультрацентрифугирования [137, 138]. Оба метода основаны на наблюдении скорости достижения седиментационного равновесия. Здесь также необходимо отсутствие межмолекулярного взаимодействия, поэтому требуется экстраполяция получаемых данных к нулевой концентрации. Этот метод применим к веществам с относительно низким молекулярным весом его использование может быть удобным в тех случаях, когда желательно из одной серии экспериментов по седиментационному равновесию получить одновременно М и Д. Модификация уравнения Назариана [1381 была успешно применена для определения коэффициента диффузии лизоцима [ИЗ]. [c.62]

Тем не менее упомянем о двух публикациях, в которых аналитическое ультрацентрифугирование использовалось для определения молёкулярной массы белков- по методу, Арчибальда [Bernstine, 1979 Ta k et al., 1979]. [c.277]