Галактозидаза

Рис. 14. Сопоставление величин стандартной свободной энергии активации А Gf для реакции гидролиза и-алкил-Р - )-галактопиранози-дов Р-галактозидазой [6] с соответствующими инкрементами свободной энергии переноса -алкильной труп-ПЫ из воды в октанол если заместитель

Пример, иллюстрирующий получение частично очищенного препарата -галактозидазы из мутанта Е. соИ, представлен на рис. 4.2. Схема очистки включает отделение клеток микроорганизма по [c.79]

Рассматривается возможность уменьшения лактозы в молоке путем создания животных, у которых присутствует специфический для молочной железы промотор, соединенный с геном фермента -галактозидазы, катализирующей распад лактозы. Молоко таких животных, не содержащее лактозы, могут использовать люди, у которых не синтезируется -галактозидаза. Ведутся работы по введению генных конструкций в организм трансгенных животных, вырабатывающих антитела, предотвращающие маститы. [c.130]

Полученный синтетический ген был встроен вместе с фрагментом природной ДНК, содержащим промотор и проксимальную часть гена белка -галактозидазы кишечной палочки Е. сой, в плазмиду- [c.133]

Этот вопрос может быть решен при рассмотрении результатов частичного гидролиза раффинозы, проводимого действием специфических ферментов. Так, под действием инвертазы — фермента, гидролизующего сахарозу, раффиноза распадается на фруктозу и дисахарид мели-биозу, состоящую из галактозы и глюкозы. С другой стороны, ферментативный гидролиз а-галактозидазой дает галактозу и сахарозу. [c.148]

Работы по генно-инженерному получению инсулина начались около 20 лет назад. В 1978 г. появилось сообщение о получении штамма кишечной палочки, продуцирующего крысиный проинсулин (США). В этом же году были синтезированы отдельные цепи человеческого инсулина посредством экспрессии их синтетических генов в клетках Е. соИ (рис. 5.11). Каждый из полученных синтетических генов подстраивался к 3 -концу гена фермента -галактозидазы и вводился в векторную плазмиду (pBR322). Клетки Е. соИ, трансформированные такими рекомбинантными плазмидами, производили гибридные (химерные) белки, состоящие из фрагмента -галактозидазы и А или В пептида инсулина, присоединенного к ней через остаток метионина. При обработке химерного белка бромцианом пептид освобождается. Однако замыкание дисульфидных мостиков между образованными цепями инсулина происходило с трудом. [c.133]

В общем случае значение а — это характеристика сорбционной способности активного центра данного фермента. Если а <С 1 (как, например, в рассмотренном катализе (3-галактозидазой), то субстратная группа К, по-видимому, либо погружаетгя (переносится из воды) в органическую среду белка не полностью, либо связывание ее требует термодинамически невыгодных затрат на конформационное изменение структуры того или другого реагента. Гидрофобное ферментсубстрат-ное взаимодействие может быть термодинамически более выгодным, чем это предполагает простая экстракционная модель (где а= 1). В этом случае активный центр должен содержать локальный участок с относительно невыгодной поверхностной энергией пограничного слоя белок — растворитель например, с гидрофобными боковыми группами [c.44]

В работе [17] исследовали гидролиз о-нитрофенилового эфира р-О-галактопиранозида под действием р-галактозидазы (мол. вес 540000), иммобилизованной в 15%-иом геле полиакриламида. Эксперимент проводили следующим образом в раствор субстрата ([3]о= 1,66-10 2 М) помещали пластинку определенной толщины, вырезанную из куска геля, с равномерно распределенным в ней ферментом, и регистрировали реакцию по образованию в растворе о-нитрофенолят-иона. Ферментативная реакция, катализируемая ферментом в гомогенном водном растворе, характеризуется значениями /гкат = 273 сек- Лт(каж)= 1,73-Ю М. Коэффициент распределения субстрата между водой и гелем равен единице, коэффициент диффузии субстрата в геле равен 1-10 см /сек. [c.274]

На спирт полностью сбраживаются сахароза, инвертированный сахар и манноза. Раффиноза под действием р-фруктофуранозидазы (сахарозы, инвертазы) дрожжей расщепляется на фруктозу и ди-сйхарид — мелибиозу. Так как в спиртовых дрожжах рас Я и В нет а-галактозидазы (мелибиазы), то раффиноза сбраживается ими только на 34%. Однако новые гибридные расы дрожжей (Г-67, Г-73 и некоторые другие) содержат этот фермент, и раффиноза почти полностью сбраживается. Содержание других сахаров обычно невелико, они или частично сбраживаются, или (как пентозы) не сбраживаются, и потому к сбраживаемым сахарам обычно относят сахарозу, инвертированный сахар и 7з раффинозы, при этом два последних сахара пересчитывают на сахарозу. [c.22]

При гидролизе полисахаридов кислотами или специфическими ферментами глюкозидные связи разрушаются и в зависимости от условий образуются различные остатки полимерных звеньев вплоть до моно- или дисахаридов. Полисахариды — основной источник углеводов в питании человека. Они в организме расщепляются различными ферментами крахмал — а-амилазой поджелудочной железы, мальтоза — мальтазой, изомальтазой, сахароза — сахара-зой (инвертазой), лактоза — р-галактозидазой, часть целлюлозы — ферментами микрофлоры толстого кишечника. При гидролизе одной гликозидной связи для сахарозы выделяется 29,3 кДж, а для олиго- или полисахаридов — [c.30]

Фермент -галактозидаза гидролизует только р-галактозидные связи, например, в р-лактозе (при этом образуются глюкоза и галактоза). Будет ли этот фермент действовать на а-лактозу Объясните ваш ответ. [c.456]

Гидролиз мелибиозы катализирует фермент t-галактозидаза. На основании всех этпх данных напишите структурную формулу мелибиозы. [c.464]

Среди тысяч энзимов, присущих микроорганизмам, одни, например ферменты гликолиза, синтезируются постоянно и их образование не зависит от состава питательной среды. Такие ферменты называют конститутивными. Другие энзимы, адаптивные или инду-цибельные, возникают только в ответ на появление в питательной среде индукторов — субстратов или их структурных аналогов. Так, добавление -галакгозида — лактозы к питательной среде, на которой культивируются клетки кишечной палочки Е. соН, вызывает мгновенное появление -галактозидазы в них, биосинтез которой в последующий период времени возрастает в 10 ООО раз. Установлено, что регуляция объема биосинтеза ферментов осуществляет- [c.35]

Лактозный оперон (1ас-оперон) включает структурные гены трех ферментов X, V и А (отвечают за взаимозависимый синтез Р-галактозидазы, галактозилпермеазы и ацетилтрансферазы), контролирующих метаболизм лактозы в клетке (рис. 3.2). Экспрессия ферментов регулируется белком-репрессором — продуктом гена-регулятора (К), пространственно удаленного от гена-оператора (О). Субъединищ.1 репрессора (38кДах4) возникают с постоянной скоростью. Репрессор обладает высоким сродством к соответствующему оператору (К = моль/л). Именно белок-репрес-сор, будучи присоединен к гену-оператору, препятствует транскрипции структурных генов X, V и А. [c.38]

Далее, поскольку а-галактозидаза специфически расщепляет а-гала,к-тозиды, ясно, что в раффинозе имеется а-галактозидная связь, т, е. остаток сахарозы играет роль агликона, и раффнноза является а-галактози-дом сахарозы. [c.149]

Биохимия Том 3 (1980) -- [ c.200 , c.201 ]

Биологическая химия Изд.3 (1998) -- [ c.320 , c.536 , c.537 ]

Молекулярная биотехнология принципы и применение (2002) -- [ c.121 , c.121 , c.382 ]

Микробиология Издание 4 (2003) -- [ c.120 , c.210 ]

Теоретические основы биотехнологии (2003) -- [ c.66 ]

Жидкостная колоночная хроматография том 3 (1978) -- [ c.3 , c.12 ]

Основы биохимии Т 1,2,3 (1985) -- [ c.238 , c.644 , c.747 , c.953 , c.954 , c.955 ]

Новые методы анализа аминокислот, пептидов и белков (1974) -- [ c.396 , c.402 ]

Общая микробиология (1987) -- [ c.474 , c.479 , c.482 , c.483 ]

Химия и биохимия углеводов (1978) -- [ c.43 ]

Современная генетика Т.3 (1988) -- [ c.11 , c.173 , c.174 ]

Методы общей бактериологии Т.3 (1984) -- [ c.0 ]

Биохимия человека Т.2 (1993) -- [ c.100 , c.315 , c.316 ]

Жизнь микробов в экстремальных условиях (1981) -- [ c.140 , c.308 ]

Иммуноферментный анализ (1988) -- [ c.14 , c.18 , c.30 , c.31 , c.104 , c.106 , c.106 , c.112 , c.112 , c.247 , c.247 , c.248 , c.248 , c.251 , c.251 , c.264 , c.264 , c.265 , c.267 , c.269 , c.271 , c.304 ]

Гены и геномы Т 2 (1998) -- [ c.58 , c.174 , c.175 , c.229 , c.241 , c.356 ]

Молекулярная биология клетки Сборник задач (1994) -- [ c.102 , c.103 ]

Основы биохимии (1999) -- [ c.210 ]

Структура и механизм действия ферментов (1980) -- [ c.230 , c.231 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология