Плазмы экстракт, анализ

Целью хроматографии липидов являются разделение липидов различных классов и последующее получение индивидуальных соединений с целью их идентификации и количественного анализа. В ходе изучения липидов с помощью хроматографических методов выяснилось, что многие организмы, ткани, клетки и субклеточные компоненты имеют характерный состав липидов, который можно определить, не прибегая к полному разделению и получению индивидуальных соединений. Количественный анализ липидов, полученных в результате частичного разделения первичного экстракта, часто является достаточным для установления источника, из которого были выделены эти липиды, и выяснения, с каким метаболическим состоянием (нормальным или аномальным) связан данный состав этих соединений. Практически все хроматографические методы могут быть применимы для выполнения этой задачи, однако более предпочтительны те, которые сочетают быстрое разделение с эффективной количественной оценкой. Такой подход имеет широкое применение — от определения полного состава липидов плазмы до характеристики индивидуальных липидов бактерий, основанной на анализе метиловых эфиров жирных кислот этих липидов или продуктов пиролиза последних. [c.204]

Применение ионной масс хроматографии низкого разрешения для непосредственного анализа экстрактов из исходной плазмы крови осложняется в ряде случаев из за присутствия мешающих примесей (плазма, растворители, используемые pea генты и др ) Поэтому для определения нанограммовых коли честв сверхчувствительными методами требуется предваритель ная очистка образца Для большинства ЛП процедура очистки сырого экстракта обычно связана с экстракцией кислыми раст ворителями и последующим удалением липидов путем отмыва ния неполярными растворами Такая очистка как правило, весьма трудоемка и продолжительна, что затрудняет автомати зацию процесса подготовки образца и анализа, и в итоге не позволяет проводить массовые клинические анализы [c.180]

Анализ физиологических жидкостей (плазмы крови, мочи, экстрактов тканей млекопитающих) проводят на длинной колонке (150 см) в несколько иных условиях. Эффективность разделения возрастает благодаря длительному (11ч, 330 мл) элюированию буферным раствором с pH 3,25 при 30 °С. При этом [c.344]

Этот хроматографический метод был первоначально разработан для анализа мочи, плазмы крови, тканевых экстрактов и Других физиологических жидкостей. Однако данный метод можно использовать и для других объектов, содержащих подобные [c.33]

Хотя стандартные методики ГЖХ применимы к большинству природных смесей липидов, наибольший прогресс в этой области достигнут в случае анализа липидов первичного экстракта плазмы [713—718] и отдельных классов липопротеинов [714, 719]. Это объясняется удачным распределением компонентов, смеси по их молекулярным массам и их относительным содержанием в смеси. Наиболее успешное разделение липидов первичного экстракта методом ГЖХ было получено на коротких неполярных колонках с силоксаном, первоначально использовавшихся для разделения природных триацилглицеринов [551]. Довольно удобными для такого рода разделений оказались колонки из нержавеющей стали или стеклянные (от 30 до 50 см длиной и внутренним диаметром от 0,2 до 0,3 мм), заполненные 1— 3% метилсилоксана или эквивалентными силиконовыми полимерами для высокотемпературной ГЖХ, нанесенными на внутренний инертный носитель. Колонки предварительно выдерживали в течение 2—3 ч при температуре 350 °С и проверяли их на способность необратимо сорбировать вещества. В зависимости от состава липидов использовали линейный градиент температуры в пределах 175—350 °С (со скоростью нарастания температуры 4—8°С/мин). Метод ГЖХ также широко применяется при анализе смесей нейтральных липидов плазмы [721—723]. [c.208]

Рис. 8—24. Анализ экстрактов плазмы, содержащих ПЭЛС групп 1 (а), 2 (б) аЗ (в) (см. табл. 8-12).

Эффективность разделения и концентрирования может быть улучшена при добавлении в исследуемый раствор комплексообразующих веществ. Так, микроколичества В1, Со, Си, Ре, 1п, РЬ при анализе металлического серебра и нитрата таллия можно извлечь в виде устойчивых комплексов с ксиленоло-вым оранжевым сорбцией активным углем, помещенным в виде слоя на фильтр. Некоторые примеры концентрирования микроэлементов приведены в табл. 7.5. Активные угли оказались весьма эффективными дпя извлечения биологически активных веществ разнообразных штассов из сыворотки и плазмы крови, мочи, желчи и экстрактов различных органов. [c.242]

Аналитическое применение катионоселективных стеклянных электродов поражает своим размахом и многогранностью. Эти электроды используют для потенциометрических титрований, исследования коэффициентов активности, измерений констант равновесия, непрерывного анализа и изучения кинетики процессов. Доступность стеклянных электродов и совершенство конструкции специальных миниатюрных и проточных электродов для определения натрия и калия, имеющих большую физиологическую важность, способствуют особо ценному применению этих электродов в медико-биологическом анализе. С их помощью можно измерять активности ионов натрия и калия в моче, сыворотке, спинномозговой жидкости, крови, плазме, желчи, коре головного мозга, почечных канальцах, мышечных тканях. Во многих случаях правильность результатов сравнима (если не лучше) с правильностью результатов, полученных методом пламенной фотометрии при этом измерения со стеклянным электродом подчас можно выполнить быстрее. Для экспрессного диагноза кистофиброза поджелудочной железы, для которого характерны аномально высокий уровень концентраций натрия в поту, определяют активность иона натрия на поверхности кожи. Можно привести многочисленные примеры применения натрий- или калийселектив-ных стеклянных электродов для анализа воды и экстрактов почв. Поскольку в будущем число катионоселективных стеклянных электродов будет, без сомнения, увеличиваться, следует ожидать и появления новых областей их применения. [c.382]

Образцы физиологических жидкостей (крови, плазмы, мочи, спинномозговой жидкости) освобождают от белков, осаждая их пикриновой или сульфосалициловой кислотой [75—77]. Осадок удаляют на центрифуге, надосадочную жидкость используют в последующей работе. Белки можно удалять, используя катиониты в Н+-форме [78] или центрифугируя смеси при высоких скоростях [43]. Аналогичным образом готовят для анализа экстракты гомогенатов тканей, также с использованием три-хлоруксусной и хлорной кислот [79]. Иониты используют для очистки от белков экстрактов большинства растительных тканей [80]. [c.352]

Описан новый метод определения фторида в биологических материалах [176], объединяющий диффузионный метод Холла, описанный выше, с поглощением фторида фосфатом кальция. По существу, метод заключается в кипячении раствора, содержащего фторид, в течение 5—10 мин с 20 мг фосфата кильция, не содержащего фторид. Раствор охлаждают, центрифугируют для отделения фосфата кальция, содержащего сорбированный фторид, и затем выделяют из осадка фторид диффузионным методом Холла. Метод применен для анализа воды, мочи, экстрактов растений и плазмы. [c.361]

Из экстрактов костного порошка был выделен гомогенный гликопротеин с высоким содержанием N-ацетилнейраминовой кислоты и гексоз (табл. 2). Из гексоз в гликопротеине идентифицированы галактоза, манноза и глюкоза галактозамин составлял 49% общего количества гексозаминов. С помощью качественного аминокислотного анализа в гликопротеине обнаружено 14 аминокислот [37J. Отмечено некоторое химическое сходство этого гликопротеина с aj-кислым гликопротеином плазмы крови быка однако, по-видимому, гликопротеин кости образуется в кости, а не попадает в нее из плазмы [44]. [c.266]

Фелл и Робисон [6] предложили технику часового стекла , согласно которой орган или часть органа выращивается во впадине часового стекла на поверхности сгустка, состоящего из плазмы цыпленка и эмбрионального экстракта кур. Это стало классической стандартной техникой морфогенетического анализа эмбриональных органов. Впоследствии метод был модифицирован для исследования действия гормонов, витаминов и канцерогенов на ткани взрослых млекопитающих [7], о чем более подробно сказано в гл. 3. [c.215]