Окситоцин, анализ

Прежде чем перейти к методам, которые химики применяют для разрушения ( анализа ) и получения ( синтеза ) биологически активных полипептидов, рассмотрим три полиамида, представляющие интерес с медицинской точки зрения,— окситоцин, вазопрессин и инсулин. Обратите внимание на то, что аминокислотная последовательность двух из них почти одинакова, хотя они выполняют совершенно различные физиологические функции. Все три полипептида содержат дисульфидную связь (—8—3—) и утрачивают [c.401]

Рис. 111.22. Схема конформационного анализа молекулы окситоцина

Близкие по молекулярному весу пептиды можно фракционировать за счет избирательной сорбции одного или нескольких компонентов смеси на матрице. Примером может служить разделение окситоцина и вазопрессина на сефадексе 0-25 [22] в 0,1 н. муравьиной кислоте (рис. 34.3). Порядок выхода оказался обратным тому, который был предсказан на основании анализа конформации этих пептидов в растворе. По-видимому, [c.401]

Вторая половина XX столетия характеризуется резко возросшим интересом к познанию механизмов жизнедеятельности. Эпоха наблюдения и достаточно поверхностного анализа мира животных, растений и микроорганизмоп сменилась периодом решительного проникновения на уровень молекулярных и межмолеку-лярных взаимодействий в живых системах, вторжением в биологию методов и подходов физики, химии и математики. Как следствие этого процесса началась постепенная дифференциация наук, изучающих материальные основы жизни стали одна за другой появляться новые дисциплины, отражающие различные уровни исследования живой материи, различные углы зрения, различные экспериментальные приемы и методологические концепции. Классическая биохимия, которой бесспорно принадлежит пальма первенства в симбиозе биологии и точных наук, постепенно уступала дорогу новым направлениям. Вначале, на волне революционных событий в физике, возникла биофизика, значительно окрепшая уже в предвоенный период. Конец этого этапа был ознаменован и резкой активизацией исследований в генетике. Однако наиболее серьезное наступление началось в начале 50-х годов, когда возникли молекулярная биология, рождение которой часто отождествляется с открытием двойной спирали ДНК, а также биоорганическая химия, первые победы которой по праву связывают с установлением структуры инсулина и синтезом первого пептидного гормона — окситоцина, [c.5]

Дю Виньо и сотрудники основывались главным образом не на анализе концевых аминокислот, а на идентификации компонентов большого числа низших пептидов. Они исследовали также реакцию окисленного окситоцина с бромной водой, в результате которой обра- [c.695]

Б. X, сформировалась как самостоятельная область во 2-й пол. 20 а на стыке биохимии и орг, химии, на основе традиционной химии прир. соединений. Ее развитие связано с именами Л. Полинга (открытие а-спирали как одного из главньп элементов пространста структуры полипептидной цепи в белках), А. Тодда (выяснение хим. строения нуклеотидов и первый синтез динуклеотида), Ф. Сенгера (разработка метода определения аминокислотной последовательности в белках и расшифровка с его помощью структуры инсулина), Дю Виньо (хим. синтез биологически активного гормона окситоцина), Д, Бартона и В. Прелога (конформационный анализ), Р. Вудворда (полный хим. синтез мн. сложных прир. соединений, в т.ч. резерпина, хлорофилла, витамина В] ) и др. крупных ученых. [c.288]

В эти годы созданы новые физ.-хим. методы аиализа. Были заложены основы хроматографич. методов (М. С. Цвет, 1906). В 20-х гг. Т. Сведберг предложил использовать для седиментации белков ультрацентрифугу, вскоре этим методом был выделен ряд вирусов. В 30-х гг. А. Тизе-лиусом заложены основы электрофореза, в 1944 А. Мартином и др. создана распределит, хроматография, для определения структуры прир. соед. впервые стал использоваться рентгеноструктурный анализ (Д. Кроуфут-Ходжкин, 40-е гг.). Благодаря использованию физ.-хим. методов в 50-х гг. достигнуты крупные успехи в изучении двух важнейших классов биополимеров-белков и нуклеиновых к-т Э. Чар-гафф провел детальный хим. анализ нуклеиновых к-т, открыта двойная спираль ДНК (Дж. Уотсон и Ф. Крик, 1953), определена структура инсулина (Ф. Сенгер, 1953), одновременно осуществлен синтез пептидных гормонов -окситоцина и вазопрессина (Дю Виньо, 1953), открыт один из элементов пространственной структуры белков- спираль (Л. Полинг, 1951). В эти годы Р. Замечником открыты рибосомы, что послужило стимулом для изучения механизма синтеза белка. [c.292]

Рассмотрим конформационные возможности линейного тетрапептидного фрагмента окситоцина y8 -Pro -Leu -Gly -NH2- Известно, что остаток Pro не только сам имеет ограниченную конформационную свободу в областях В и R, но и значительно затрудняет подвижность предшествующего остатка, обусловливая для него энергетическую предпочтительность форм В и L. Поскольку во всех предпочтительных структурах циклического гексапептида значения угла < 0°, то в анализе тетрапептида для остатка Су8 принята В-форма основной цепи. Всего для минимизации энергии было составлено 144 варианта фрагмента y8 -Gly -NH2 четырех возможных структурных типов пептидного скелета еее, eef, efe и eff). Как следует из расчетов, наиболее представителен по числу низкоэнергетических состояний тип основной цепи eff. Исходные приближения для анализа всей молекулы окситоцина были составлены соответственно из 8 и 10 низкоэнергетических конформаций гекса- и тетрапептидного фрагментов. Минимизация их энергии по всем двугранным углам основной и боковой цепей свидетельствует о нереальности подавляющего большинства рассмотренных конформаций. В широкий энергетический интервал 0-9,0 ккал/моль из 80 состояний попадает лишь 20. Глобальная конформация окситоцина состоит из самых выгодных состояний гексапептидного цикла и тетра- [c.330]

Эта последовательность была подтверждена тем, что в окисленном окситоцине только один цистеиновый остаток имел свободную аминогруппу (определено динитрофенилированием). В данной последовательности присутствуют все восемь аминокислот, обнаруживаемых в исходном окситоцине. Таким образом, остатки тирозина и изолейцина соединены друг с другом, образуя циклический пентапептид, — заключение, лодтверждаемое тем обстоятельством, что окисление бромом расщепляет связь тир—изл. Это предположение было также подтверждено концевым анализом по Эдману. Окисленный окситоцин обрабатывали ло Эдману и после удаления К-колцевой аминокислоты гидролизовали и определяли аминокислотный состав. Четырехкратное повторение такого расщепления привело к следующим результатам сначала отщеплялась цистеиновая кислота, затем тирозин, изолейцин [c.681]

N-Me Туг -Окситоцин. Синтез этого аналога вначале натолкнулся на ряд затруднений [1079]. Так, при конденсации -ни-трофенилового эфира М-карбобензокси-5-бензил-ь-цистеина с H-N-Me. Tyr-Ileu-Glu (NH2) -Asp (NH2)- ys (Bzl) -Pro-Leu-Gly-NHa (полученным из О, N-дикарбобензоксипроизводного при действии бромистого водорода в ледяной уксусной кислоте) образовался защищенный нонапептид, для которого были получены хорошие результаты элементарного анализа, но не обнаружено характеристического ультрафиолетового поглощения фенольной гидроксильной группы. По-видимому, в данном случае пониженная реакционная способность вторичной аминогруппы привела к побочным реакциям с участием оксигруппы. Попытка ацилирования 0-защищенного октапептида H-N-Me Туг (Tos)-Peu-Glu (NH2) -Asp (NH2) - ys (Bzl) -Pro-Leu-Gly-NH2 (полученного из соответствующего карбобензоксипроизводного) при помощи bo- ys (Bzl)-0NP также не привела к успеху. [c.402]

Разработал методы гидролиза, с помощью которых расшифровал структуру окситоцина (1932) и вазопрессина (1953—1954), выяснил, что каждый из них содержит восемь аминокислот, образующих цепь, замкнутую в кольцо дисуль-фидиым мостиком со связью 8 — 8. Осуществил (1932) синтез окситоцина (первый анализ и синтез полипептидного гормона). Разработал (1939) метод синтеза цистина на основе фталимидома-лонового эфира. Выделил (1952) окситоцин в кристаллическом состоянии, независимо от австрийского биохимика Г. Туппи установил (1953) последовательность в нем аминокислот и подтвердил [c.158]

Не будем обсуждать все этапы конформационного анализа каждого fopMOHa. Поскольку расчет всех нонапептидов вьшолнен по единому длану, будет достаточно остановиться на одном примере (выбран окситоцин), а затем сопоставить конечные результаты анализа, касающиеся конформационных возможностей четырех иейрогипофизарных гормонов. Изучению пространственного строения всей молекулы окситоцина предшествовало независимое рассмотрение двух ее частей гексапептид- [c.329]

Олигопептиды, пространственное строение которых было изучено теоретически другими авторами, перечислены в табл. Ш.ЗЗ. Такие исследования проводились, в основном, тремя группами исследователей С.Г. Галактионовым и сотрудниками, Г. Шерагой и сотрудниками, Дж Де-, Коэном и сотрудниками. Большая часть изученных соединений (1-15) - это пептиды, содержащие не более десяти аминокислотных остатков. Пространственное строение ряда молекул (пептиды 2, 3, 5, 8, 9, 10) было рассчитано сотрудниками сразу двух или трех групп строение некоторых молекул пептидов (8, 9, 10, 13, 14, 17) исследовалось одновременно в группах Галактионова и автора данной монографии. Следовательно, появилась возможность для сопоставления результатов расчета, если не с экспериментом, то хотя бы друг с другом. Сравнение данных конформационного анализа, полученных для ангиотензина II, окситоцина, вазопрессина, энкефалинов и а-меланотропина, уже было сделано (см. гл. 9-12). [c.389]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология