Инициация синтеза ДНК

Многие репликоны используют, по-видимому, совершенно иную стратегию регуляции собственного синтеза. Для инициации репликации этих репликонов необходим белок-инициатор (например, белок Е в случае плазмиды F). от белок специфически связывается с определенной последовательностью ДНК, многократно повторенной на данном репликоне. Связывание белка-инициатора с одной или несколькими такими последовательностями, находящимися в ориджине, необходимо для инициации. Одна из последовательностей находится в начале гена бел ка-инициатор а, так что связывание с ней белка подавляет его собственный синтез. Считается, что регуляция репликации осуществляется благодаря сложной конкуренции за белок-инициатор между участком ДНК, необходимым для собственной репрессии, участком (или участками), необходимым для инициации синтеза ДНК, и другими участками связывания. Хотя подобные репликоны пока еще недостаточно изучены и детальная картина регуляции репликации не ясна, очевидно, что наличие множественных мест связывания ключевого белка инициации репликации позволяет регуляторной системе очень чутко отзываться на изменение копийности репликона. Например, если плазмида содержит 10 повторенных мест связывания белка-инициатора, то появление за счет репликации од ой дополнительной копии плазмиды увеличит число участков связывания на 10. В определенном смысле многократно повторенные участки связывания белка-инициатора, суммарное количество которых пропорционально копийности репликона, аналогичны ранее рассмотренной ингибиторной РНК, концентрация которой также пропорциональна копийности. [c.67]

Поглощение С4-Днкарбоновых кислот Синтез ДНК, нарушение инициации Синтез ДНК [c.186]

Инициация синтеза ДНК - возникновение нескольких участков репликации (репликонов), где двухцепочечная молекула ДНК расплетается и возникает репликативная вилка. После расплетания цепи стабилизируются специальными белками. Здесь, в месте образования репликативной вилки, и происходит синтез новой ДНК в виде первой стадии - репликации. Родительская ДНК расплетена и находится в одноцепочечной форме. Каждая из цепей служит матрицей для синтеза новой ДНК. В ходе синтеза репликативная вилка перемещается вдоль молекулы, при этом расплетаются все новые участки, что происходит до тех пор, пока вилка не дойдет до точки окончания синтеза (точка терминации). [c.55]

Инициация синтеза ДНК в точке начала репликации [c.118]

Как, располагая температурочувствительной мутацией, блокирующей синтез бактериальной ДНК при рестриктивной температуре, определить, затрагивает ли она процесс элонгации цепи ДНК в репликативной вилке или инициацию синтеза ДНК на участке ori [c.129]

Поскольку концентрация ионов Са в цитозоле после оплодотворения повышается лишь ненадолго (примерно на 1 мин), ясно, что это не может непосредственно приводить к событиям, происходящим на более поздних стадиях активации яйцеклетки У морских ежей к таким событиям относятся повышение интенсивности синтеза белков, начинающееся через 8 мин после оплодотворения, и инициация синтеза ДНК спустя примерно 30 мин. Имеется большое число данных, указывающих на то, что активация протеинкиназы С играет важную роль на поздних стадиях активации, причем наиболее существенным в этот период является повышение внутриклеточного pH. [c.49]

Хотя молекулярный механизм, обеспечивающий лишь однократное воспроизведение ДНК, неизвестен, общий принцип решения такого рода задачи был раскрыт в экспериментах по слиянию клеток. Когда клетки в фазе 8 сливаются с клетками в фазе в ядре, находящемся в фазе 61, начинается синтез ДНК. Это позволяет предположить, что переход из Ох в 8 обусловлен воздействием какого-то диффундирующего инициатора синтеза ДНК. В то же время слияние клеток в фазе Ог с клетками в фазе 8 не приводит к инициации синтеза ДНК в ядре, находящемся в фазе Ог, хотя ядро, находящееся в 8-фазе, продолжает синтезировать ДНК. Это означает, что хроматин в фазе Сг не может реплицироваться, поскольку с ним прочно связан какой-то ингибирующий фактор, неспособный к диффузии. [c.168]

Инициация синтеза ДНК Синтез ДНК, корректорские функции Удаление РНК-затравки, заполнение однонитевых участков, корректорские функции [c.130]

Для инициации синтеза ДНК на отстающей цепи нужны короткие [c.22]

Инициация образования новых цепей ДНК. В отличие от РНК, синтез которой инициируется РНК-репликазами (разд. 2.5) и РНК-полимеразами (часть HI), для инициации синтеза ДНК требуется затравка (праймер). Сначала синтезируются короткие РНК-праймеры, которые затем наращиваются в виде цепей ДНК. Нри переводе кольцевой одноцепочечной ДНК фага М13 в двухцепочечную репликативную форму для синтеза коротких сегментов РНК в точке начала репликации используется РНК-полимераза-холофермент (рис. 2.27). Нри репликации других одноцепочечных кольцевых фаговых ДНК (G4) РНК-праймер синтезируется специальной [c.86]

Последовательность ориджина способствует необходимому для начала синтеза ДНК расплетанию двойной спирали ДНК и служит участком сборки, посадки на ДНК активного комплекса белков, осуществляющих репликацию. Чем же ориджины репликации отличаются от прочих последовательностей ДНК, что определяет их специфичность Для разных репликонов ответ может быть различным, однако часто оказывается, что специфичность ориджина определяется специальным белком, участвующим в инициации синтеза ДНК и способным избирательно связываться с последовательностью нуклеотидов данного ориджина. Наличие на одном репли-коне ориджина и гена, кодирующего специфичный к нему белок-инициатор, обеспечивает самоподдержаиие этого репликона Б клетке. [c.61]

Два фермента обеспечивают высокую избирательность инициации синтеза ДНК, ограничивая инициацию репликации только ориджином. Это топоизомераза I и РНКаза Я, избирательно гидролизующая РНК в составе гибридных дуплексов с ДНК-Действие этих фер.ментов направлено против гибридных ДНК—РНК-участков, которые могут случайно образоваться на ДНК при транскрипции и послужить затравками для начала синтеза ДНК. Возможная роль в этом процессе РНКазы Н очевидна она способна непосредственно гидролизовать РНК во всех таких участках. Что касается роли топоизомеразы I, то необходимо отметить, что гибриды ДНК— РНК образуются лишь в том случае, если ДНК сверхспирализована (образование гибридного дуплекса снимает часть избыточной энергии сверхспирализации), причем сверхспирализована достаточно сильно, чтобы локальные нарушения нормальной вторичной структуры ДНК могли способствовать гибридизации с РНК- Топоизомераза I может релаксировать сверхспиральную ДНК лишь в том случае, если она сверхспирализована отрицательно и достаточно сильно, т. е. в условиях, способствующих возникновению на ДНК упомянутых локальных нарушений вторичной структуры. Таким образом, можно думать, что одна из функций этого ( рмента состоит в поддержании нормальной вторичной структуры ДНК, препятствующей ее гибридизации с РНК и образованию затравки. В мутантах Е. oli по РНКазе Н (ген rnh) или по топоизомеразе I (ген [c.62]

Интересно отметить, что если бы инициация репликации происходила локально в одной точке хромосомы, то при скорости биосинтеза 50 нуклеотидов в минуту репликация одной молекулы ДНК потребовала бы 800 ч. Однако в реальности инициация синтеза ДНК происходит сразу в нескольких точках хромосомы, называемых точками инициации репликации, или ориджинами (от англ. origin — источник, начало, происхождение). [c.350]

Рис. 38.13. Инициация синтеза ДНК РНК-затравкой и последующее присоединение второго дезоксирибонуклеозидтрифо-

В каждом случае активность фермента увеличивается в течение фазы S и снижается в конце фазы 02 или самом начале фазы 01. Было показано (Bello, 1974), что стабильность тими-динкиназы слабо изменяется в течение клеточного цикла и инициация синтеза фермента происходит одновременно, но независимо от инициации синтеза ДНК. Окончание синтеза фермента требует завершения фазы S и оказывается зависимым от синтеза РНК в течение фазы 02. [c.144]

Достоверно установлено, что для инициации синтеза ДНК требуются полиамины (см. раздел 5.1). Хотя во время синтеза ДНК потребность в полиаминах высока, в фазе S концентрация полиаминов относительно низка (Heby et aL, 1976 Sunkara et aL, 1980). Не ясно, имеют ли клетки в этой точке клеточного цикла высокую интенсивность обмена полиаминов. В настоящее время имеется совсем мало информации о характере использования или катаболизма полиаминов во время цикла деления клеток млекопитающих. В связи с этим мы исследовали не только анаболизм, но также катаболизм полиаминов во время клеточного цикла и попытались выявить связь их метаболизма с концентрацией и различными клеточными функциями, продолжающимися в это время (Sunkara et al., 1980). [c.256]

Самые низкомолекулярные ДНК, обнаруженные к настоящему времени, содержат только несколько тысяч звеньев, тогда как наиболее крупные достигают длины целых эукариотических хромосом и содержат до 10 звеньев. Известны двухцепочечные молекулы, у которых одной цепью является РНК, а другой — ДНК. Они образуются как промежуточные формы, когда обратная транскриптаза синтезирует ДНК, комплементарную РНК. Такие комплексы возникают на короткое время — по крайней мере в ограниченной области — и при синтезе РНК на ДНК. Гибриды РНК — ДНК легко получаются in vitro путем отжига двух цепей с комплементарными последовательностями. Известно несколько случаев, когда участки РНК и ДНК ковалентно сшиваются с образованием одной цепи. Это происходит при инициации синтеза ДНК обратной транскриптазой, поскольку этот фермент использует РНК-затравку для начала синтеза новой ДНК. [c.156]

Высокомолекулярный шмир на фоне дискретных продуктов ПЦР или при полном их отсутствии. Шмир очень часто возникает при использовании плохо очищенных матриц. При появлении шмира светится вся дорожка в агарозном геле после проведения электрофореза и окрашивания его бромистым этидием. В этом случае имеют место множественные неспецифические инициации синтеза ДНК из-за присутствия в реакционной смеси низкомолекулярных затравок в виде неспецифических фрагментов ДНК или РНК, а также повторяющихся последовательностей в матрице, которые залипают друг на друга. Денатурированные белки, неспецифически удерживая концы фрагментов ДНК вблизи матрицы, могут создавать места множественной инициации синтеза ДНК и т.п. Имеются, по крайней мере, две возможности преодоления такого эффекта дополнительная очистка матрицы, например, с помощью фенольной депротеинизации или с использованием ионообменной смолы СЬе1ех-100 [270], а также, если по каким-то причинам хорошо очищенные матрицы недоступны, применение модифицированных ДНК-полимераз в ПЦР с горячим стартом (см. ниже). [c.206]

Молекула ДНК человека имеет очень большие размеры, репликация такой большой молекулы (скорость 50 нуклеотидов в минуту) шла бы в течение примерно 800 ч. Поэтому инициация синтеза ДНК происходит в нескольких точках хромосомы, которые называются точками инициации репликации, или ориджинами (origin) репликации (рис. 3.5). Ориджины репликации имеют определенную нуклеотидную последовательность. Единица репликации [c.64]

Транскрипты L-цепи существенны также для инициации синтеза ДНК в точке ORI-H. По-види-мому, некоторые из этих транскриптов разрезаются [c.219]

A. Какой дополнительной активностью кроме сайт-специфическог связывания с ДНК должен обладать Т-антиген Какую роль может играть такая активность в инициации синтеза ДНК [c.144]

Методом Ш-обмена получено несколько важных результатов. Например, установлено, что протоны, участвующие в образовании водородных связей двухцепочечной ДНК, обмениваются. Из данных по кинетике изотопного обмена и равновесному распределению изотопов и влиянию на них pH выяснено, что водородные связи в двухцепочечной ДНК постоянно разрушаются и образуются вновь этот процесс назвали дыханием и предположили-, что он лежит в основе возможного механизма таких процессов, как инициация синтеза ДНК и спаривание ДНК — ДНК при генетической рекомбинации. Второй пример — определение числа водородных связей в тРНК путем измерения доли быстро обмениваемых протонов эти данные были использованы для подтверждения одной из предложенных структур [c.522]

Влияние цитоскелета на экспрессию различных генов может осуществляться непосредственно либо через несколько промежуточных процессов. И микрофиламенты, и микротрубочки влияют на реакцию клеток ЗТЗ на сигналы, инициирующие синтез ДНК. Способность клеток реагировать на сыворотку и пять других факторов роста обратимо подавляется низкими концентрациями дигид-роцитохалазина В [195]. Этот препарат не снижает транспорта глюкозы или тимидина, так что вызываемое им подавление синтеза ДНК не является следствием дефицита питательных веществ. Микрофиламенты не влияют на инициацию синтеза ДНК у трансформированных клеток, судя по тому что два разных вызывающих транформацию агента делают клетки нечувствительными к цитохалазину. [c.102]

Смотреть страницы где упоминается термин Инициация синтеза ДНК: [c.66] [c.69] [c.279] [c.66] [c.69] [c.279] [c.159] [c.410] [c.406] [c.117] [c.118] [c.73] [c.73] [c.120] [c.73] [c.73] [c.120] [c.378] [c.146] [c.167] [c.87]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология