Срезы образцов толстые

Если наблюдаемый материал слишком толст для того, чтобы через него могли проходить электроны, необходимо получить из него тонкий срез. Для этого материал должен быть достаточно жестким. Жесткость достигается с помощью процесса, называемого заливкой, который заключается в постепенном замещении воды в образце органическим мономером (например, метилмет-акрилатом), который при полимеризации дает твердый материал. После затвердевания считается, что полимерный блок содержит неразрушенный образец, который затем разрезают с помощью ультрамикротома на слои толщиной от 500 до 1000 А. Эти срезы затем окрашивают (иногда окрашивание проводят перед заливкой), выдерживая их в растворах солей молибдена, вольфрама, свинца или урана, либо в парах тетраокиси осмия. (Термином окрашивание обозначается процесс введения атомов тяжелого металла с помощью химической реакции или в результате образования комплексов с некоторыми компонентами образца для увеличения электронной плотности.) Таким способом атомы тяжелых металлов вводятся в белки, а также в другие макромолекулы и агрегаты, создавая тем самым в образце участки с высокой электронной плотностью. Окрашенные препараты дают прекрасные картины (рис. 3-4) со множеством важных деталей, которые интерпретируются по распределению атомов металлов, т. е. по функциональным группам, с которыми способен реагировать конкретный окрашивающий агент. Следует иметь в виду, что при этом могут возникнуть артефакты. Например, при включении осмия с обратной стороны толстой мембраны на изображении получаются две черные линии, разделенные неокрашенным пространством, что может привести к ошибочному заключению [c.67]

Более точное определение толщины пленки производят методом косого шлифа. Для этого из пластины, подлежащей исследованию, вырезают полоску (5 х 10 мм) при помощи линейки и корундовой иглы. Полученный образец приклеивают пицеином к косой площадке 3 оправки 2 приспособления для изготовления косого шлифа,(рис. 91). Угол среза площадки 3 должен быть точно известным. Его величина меняется в пределах 5—10° в зависимости от предполагаемой толщины пленки (чем больше толщина, тем больше должен быть угол среза однако при увеличении угла уменьшается точность определения). Затем оправку с образцом 4 вставляют во втулку 1 и сОшлифовывают необходимое количество материала. Шлифование производят вручную, вращательными движениями приспособления по толстому зеркальному стеклу, на которое предварительно нанесена водная суспензия микропорошка карбида кремния MIO. После из- [c.148]

Толстые срезы (т. е. между 0,2 и 2,0 мкм) являются полез-ным компромиссом, поскольку при использовании растровых изображений на просвет может быть получена достаточно хорошая морфологическая информация, а образцы являются довольно толстыми и содержат достаточное количество материала, который можно проанализировать с хорошим пространственным разрешением. Поскольку большинство растительных и животных тканей являются очень мягкими, перед изготовлением срезов их прежде всего нужно стабилизировать и упрочнить. Как будет обсуждаться ниже, большинство из этих способов препарирования может привести к серьезным потерям из тканей растворимых субстанций и должно использоваться с большой осторожностью. Альтернативный путь — производить анализ срезов, высушенных лиофильной сушкой или замороженных в гидратированном состоянии. [c.273]

Изготовление срезов при низких температурах является непростой процедурой, будучи даже более сложной для растительного материала, и рабочие параметры должны быть оптимизированы для каждого образца. Контраст изображения нефиксированного материала является слабым, и часто бывает трудно распознать знакомые клетки и ткани. Эти обескураживающие замечания не должны, однако, удерживать людей от попыток использования этого метода, потому что, несомненно, анализ срезов, и в частности толстых, замороженных в гидратированном состоянии срезов, дает количественно аналитические результаты, наиболее точно напоминающие условия, существующие в живой ткани. Важно распознавать артефакты, связанные с переходным таянием или полным оттаиванием, случайной регидратацией срезов, полученных лиофильной сушкой, перераспределением электролитов за счет мигрирующей рекристаллизации льда и загрязнением замороженных срезов. [c.313]

Испытание клеевых соединений на сдвиг (срез) под действием сжимающих нагрузок (рис. .9) применяется для соединений материалов значительной толщины. Иногда этим методом испытывают и образцы из тонких слоев металла, но в таких случаях к ним подклеивают для устойчивости толстые деревянные бобышки [84]. [c.222]

Микрорадиография весьма подходящий метод для анализа растянутых резин, так как позволяет исследовать относительно толстые образцы. Срезы резин толщиной 20—40 мк можно легко брать пинцетом, тогда как более тонкие (2 мк) срезы, пригодные для световой микроскопии, без толстой поддерживающей пленки сворачиваются в маленькие цилиндры. Кроме того, для таких срезов значительно большее значение имеют различные дефекты, например следы от ножа или отверстия от выкрошившихся агломератов различных ингредиентов поэтому тонкие срезы без поддерживающей пленки, как правило, разрушаются прежде, чем их удается растянуть до значительных удлинений. [c.180]

Для анализа металлич. фольги, а также толстых (1-3 мкм) срезов др. материалов используют высоко- и сверхвысоковольтные ТЭМ с ускоряющими напряжениями соотв. 200-300 и 1000-3000 кВ. Это позволяет снизить энергетич. потери электронов при просвечивании образцов и получить четкие изображения, свободные от хроматич. аберрации. [c.440]

При обсуждении методов количественного анализа удобно рассмотреть по отдельности различные типы образцов. Массивными образцами являются такие, толщина которых значительно превышает глубину проникновения падающих электронов толстые среды на массивных подложках — это такие образцы, толщина которых немного меньше глубины проникновения электронов, а тонкие образцы на очень тонких подложках — это образцы, толщина которых много меньше глубины проникновения падающих электронов. К этим трем категориям можно добавить еще два рода образцов, требующих краткого рассмотрения толстые образцы на очень тонких подложках и микрокапеаьки. Следует, однако, напомнить, что в основном рентгеновский микроанализ биологических материалов производится на срезах, монтируемых на тонких подложках. [c.70]

Инкапсуляция. Если из образца будут изготавливаться срезы или изломы, то может оказаться необходимой инкапсуляция в инертном веществе, растворимом в физиологически совместимой жидкости. Инкапсуляция накладывает дополнительные механические напряже11ия на образец при замораживании. Эта процедура особенно важна для небольших мягких биологических образцов и для растительного материала с его толстыми целлюлозными стенками. Типы материалов, которые могут быть использованы, включают агар, сыворотку бычьего альбумина, декстран, поливинилпирролидон, оксиэтилированный крахмал в концентрации 10—30%. Наиболее важной является проверка того, какое физиологическое воздействие эти вещества могут оказать на функциональную активность исследуемой ткани. [c.288]

С этой точки зрения интересно рассмотреть результаты окисления борида циркония. По мере увеличения времени окисления цвет поверхности образца изменяется от иссиня-черного, через мутно-черный и серый, к серо-белому. Одновременно характер поверхности изменяется от совершенно гладкой глянцевой ( лаковой ) к матовой. При исследовании поперечных и косых срезов окалины (рис. 8) и препарированных участков отчетлцво обнаруживается черная прослойка между боридной основой и толстым [c.71]

Как уже отмечалось, тонкие срезы резин, нанесенные на толстую пластичную подложку, при растяжении не разрушаются. Однако при очень больших удлинениях в образце возникает множество маленьких трещин в местах наибольшего напряжения. Эти трещины, которые наблюдал также Круз, появляются, как правило, при удлинениях, значительно превышающих нормальное удлинение при разрыве. Величина удлинения, при котором наблюдаются трещины, зависит от типа полимера и наполнителя, а также от степени вулканизации и скорости растяжения. Чем больше скорость растяжения, тем при меньшем удлинении образуются трещины. Динамическая деформация резины до резания также влияет на величину этого удлинения, обычно уменьшая ее. На рис. 6.15 показано разрушение срезов протекторной резины на основе натурального каучука, наполненной сажей ISAF. Исследование различных саженаполненных протекторных смесей показало, что образцы на основе натурального каучука обычно разрушаются при меньших удлинениях по сравнению [c.181]

Помимо тонких срезов применяют также тонкие шлифы. Очен толстые пленки можно утоньшить ножом. Известен метод получе нпя пленок толщиной около 10 мкм из отвержденных смол [1712] Он заключается в механическом шлифовании образца, На пре цизионном токарном станке можно отделить от фольги пленк нужной толщины с точностью до 1—3 мкм [1397], При это образец закрепляют с помощью вакуумных присосок на диск имеющем отверстия. [c.64]

Описан еще один метод получения продольных срезов волокон [732]. Продольные срезы с белковых волокон толщиной до 1 мкм можно получить, используя резец с углом заточки 90° [18]. Волокна, слишком толстые для прямых исследований на просвеТ можно утоньшать путем шлифования на шлифовальном камне из окиси алюминия [386]. Рассеяние света на неровностях поверхности образца снижают погружением его в иммерсионную жидкость. Например, для этого использовали четырехбромпстый углерод, расплавленный в обогреваемой кювете [1127]. Он не поглощает в области ог 4000 до 700 см . [c.72]

Для получения срезов различных материалов были разработаны специальные методики. Например, древесину перед приготовлением среза можно распарить или размягчить обработкой либо плавиковой кислотой под давлением или при обычном давлении, либо ледяной уксусной кислотой и перекисью водорода. Можно также подготовить его к исследованию размачиванием. Рендл и Франклин [199] установили, что вымачивание обычной фанеры в холодной воде в течение 24 час или в кипящей воде в течение 0,5 час, как правило, размягчает ее в достаточной степени для приготовления среза. Если образцы слишком толсты или изготовлены из необычно твердой древесины, то можно увеличить продолжительность обработки горячей водой и провести дополнительную обработку смесью равных частей глицерина и спирта. Срезы толщиной 10—20 мк получают на специальном микротоме, приспособленном для срезания древесины. Часто вполне удовлетворительными оказываются и срезы, полученные вручную. В составленном [c.257]

Для исследования элементного состава гранул мы использовали толстые неокрашенные срезы не обработанной осмием ткани. Для уменьшения зарядных эффектов и дрейфа образца срезы были покрыты спектрально-чистым углеродом. На рис. 7.6 представлена микрофотография такого среза, сделанная на просвечивающем электронном микроскопе. Электронный луч сужен до пучка, дающего в фокусе пятно с диаметром 0,5 мкм, и нацелен на одну из мелких плотных гранул эноцита. После 200 пробегов был получен рентгеновский спектр, представленный на рис. 1.1, А. Скорость счета составляла около 60 в 1 с, а время простоя [c.258]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология