Анти антисыворотка

Например, если немеченая антисыворотка была получена путем иммунизации кроликов, то на втором этапе используют меченую антивидовую кроличью сыворотку, полученную путем иммунизации кроличьими гамма-глобулинами ослов или каких-либо других животных. При этом антиглобулиновые меченые АТ покрывают вторым слоем исследуемый АГ (первый слой — за счет немеченых АТ, которые, в свою очередь, служат АГ для анти-глобулиновой сыворотки). В результате этого АГ становится видимым в люминесцентном микроскопе (как и в прямом варианте РИФ). [c.75]

Теперь мы в состоянии изучить влияние тех или иных известных изменений химического состава перекрестно реагирующих антигенов на их серологическую специфичность. Допустим, что мы, заменили метаниловую кислоту, которую применяли для получения азо-сыворотки курицы (КМ), другим ароматическим амином, который обозначим М. Тогда при испытании КМ с нашей антисывороткой к белкам лошади с присоединенной метаниловой кислотой реакция произойдет лишь в том случае, если М окажется настолько сходным с М, что соединится с анти-М. Если,- например, М — это ж-аминобензойная кислота или jn-аминофениларсиновая кислота положительная реакция произойдет, правда, количество преципитата будет меньше. Это показывает, что антитела к метаниловой кислоте. Хотя и лучше адаптированы к гомологичному антигену, способны реагировать как с другими гаптенами, так и с другими кислотными группами в жега-положении. Если мы внесем более существенные изменения в молекулу гаптена, введя кислотную группу в пара-положение или применив гаптен вообще без кислотной группы,, то реакция либо будет слабо выражена, либо вовсе не произойдет. Схематически это можно изобразить так (схема III) [c.21]

Активность очищенных групповых веществ крови можно измерить как по торможению гемагглютинации, так и по специфической преципитации с соответствующей антисывороткой [29]. Групповые вещества А человека и животных, кроме специфической А-активности, обладают еще одной особенностью, так называемой активностью Форемана, т. е. способностью тормозить гемолиз бараньих эритроцитов под действием иммунной анти-А-сыворотки кролика в присутствии комплемента [88]. Все попытки разделить эти активности были неудачны, и в настоящее время активность Форемана рассматривается как неотъемлемая часть активной молекулы вещества А. Вещества В, Н и Ье этой активностью не обладают. [c.176]

IV. Антисыворотки к иммуноглобулинам мыши и крысы. Для общих целей анти-IgG, получают путем иммунизации животных фракцией IgG, полученной в результате аффинной очистки на колонке с протеинА-сефарозой (разд. 10.6.1). Для удаления антител к другим классам иммуноглобулинов сыворотки сорбируют моноклональными антителами или сывороткой, лишенной IgG. [c.104]

Для выполнения иммунологического анализа необходимо иметь, помимо испытуемой сыворотки, также и антисыворотки, специально полученные путем иммунизации животных различными белковыми фракциями (альбумин, а-, р-, Y глoбyлины и др.) или специфическими белковыми веществами (церулоплазмин, си-дерофилин и др.), — антиальбуминовые, анти-а-, р- или у-сыво-ротки и т. п. [c.241]

Кроличью антисыворотку против БСА и человеческого сывороточного альбумина (ЧСА) вводили анестезированным собакам одновременно, при разбавлениях, при которых антисыворотка связывает 957о соответствующих ей антигенов. Для анти-БСА — это разбавление 1 520, а для анти-ЧСА— 1 270. После уравновешивания в течение 12 мин. микросферы БСА вводили в экстракорпоральное кровообращение. Специфическое уменьшение количества БСА-сзязываю-щих антител у четырех собак обнаружено в течение первых 15 мин после введения микрокапсул БСА, в последующие 60 мин содержание антител уменьшалось значительно меньше. За те же интервалы времени количество анти-ЧСА оставалось постоянным. Для доказательства того, что наблюдаемое снижение связывающей способности БСА не является следствием отщепления БСА от микрокапсул в ходе эксперимента, жизненно важные органы и сыворотку крови собак анализировали на присутствие g конце экспериментов. Никакой суше- [c.384]

Данные, приведенные в табл. 1, показывают, что мононитрострихнин подавляет реакцию антисыворотки к стрихнину с конъюгированным стрихнин-анти- [c.28]

Специфичные для отдельных типов пневмококков антисыворотки представля]от собой набор реагентов, активность которых соответствует разнообразным структурным деталям, являющимся антигенными детер-минантными группами пневмококковых полисахаридов. Хотя информация о тонкой структуре антигенных детерминант этих полисахаридов нее еще отрывочна, о специфичности антисывороток против низших типов пневмококковых полисахаридов накоплено достаточно сведений, чтобы применять их в качестве таких реагентов. Обширные исследования перекрестных реакций многих полисахаридов известного строения с анти-пневмококковыми сыворотками, проведенные Хейдельбергером [12, 13а[, дали сведения об иммунохимической специфичности этих сывороток и одновременно — ключи к структуре тип-специфичных полисахаридов. [c.432]

S. Spring и соавт. [256], недавно были исследованы в рекомбинации при пермиссивной температуре с вирусом гриппа A/WSN. Ts-рекомбинанты селекционировали благодаря инкубированию урожая с гипериммунной анти-НЗ-антисывороткой до образования бляшек [c.199]

Анти-Н -антисыворотка мыши вступа- [c.167]

Рис. 91. Перекрестный иммуноэлектрофорез сыворотки козы (Л, КС) и лошади (/>, ЛС) с использованием кроличьей антисыворотки к белкам сыворотки козы (аити-КС) и лошади (анти-ЛС) соответственно. Для сравнения приводятся окрашенные электрофореграммы первого направления. [С любезного разрешения д-ра О. Косз1з (Будапешт).]

Рис. 92. Сочетание линейного иммуноэлектрофореза [717] с перекрестным иммуноэлектрофорезом и методом промежуточного геля Г1257 . А. Промежуточный гель состоит только из забуференной агарозы. Б, Гель первого направления отсутствует, промежуточный гель содержит очищенный антиген (1 (линейный иммуноэлектрофорез). 5. Гель первого направления содержит антигены а—е, а промежуточный гель — очищенный антиген й (компонент смеси <1 образует пик, сливающийся с продольным преципитатом). Г, Промежуточный гель содержит моноспецифические антите ла к компоненту (1. Антисыворотку подвергали истощению растворимым антигеном а, избыток которого образовал

Изотипические детерминанты. Для выявления этих детерминант получают антитела, иммунизируя соответствующими иммуноглобулинами данного вит,а особей другого биологического вида. Тем самым выявляются различия в строении соответствующих иммуноглобулинов донора и реципиента. Из этого вытекает, что чем более удалены друг от друга на эволюционной лестнице донор и реципиент, тем большее число изотипических детерминант удастся выявить в иммуноглобулине донора. Так, для наиболее полного анализа изотипа иммуноглобулинов млекопитающих следует получать антитела против них, иммунизируя птиц. На практике однако чаще используют анти-изотипические сыворотки млекопитающих. При этом для анализа того или иного иммуноглобулина целесообразно использовать антисыворотки от различных в видовом отношении реципиентов. Видовые различия в ответе на изотипическне детерминанты отчетливо видны из следующего примера при иммунизации козы IgG кролика образуются почти исключительно антитела против детерминант F -участка молекулы при иммунизации тем же белком осла образуется примерно равное количество антител против Fab- и F -участков молекулы. [c.76]

Как в гетерологичной, так и в изологичной антиидио-типической сыворотках содержатся антитела к детерминантам, находящимся непосредственно в активном центре антитела, а также детерминантам, удаленным от него. Первые из указанных анти-антител не взаимодействуют с антителом после блокирования его активного центра гаптеном. Используя этот методический прием, удалось показать, что в гетерологичной антисыворотке свыше 90% антител направлено к детерминантам, удаленным от активного центра, в то время как в изологичной антисыворотке содержатся преимущественно анти-антитела к детерминантам, непосредственно примыкающим к активному центру. Следовательно, гетерологичные и изо-логпчные антиидиотипические антитела направлены к различным, хотя и близко расположенным детерминантам. [c.89]

I. Преципитаты, получаемые в пробирке. С помощью небольших исходных количеств антисыворотки иммуноген может быть селективно осажден из смеои веществ в пробирке. Преципитации способствует добавление 3%-ного (вес на объем) раствора полизтиленгликоля (ПЭГ) (мол. масса 6000, см. приложение). Рекомендуется использовать очищенный IgG, чтобы избежать включения в состав комплекса компонентов комплемента. Реакцию лучше проводить в небольших прецн-литационных пробирках с одним и тем же количеством анти- [c.50]

Овцы хорошо отвечают на в/м и п/к введения 20—50 мкг очищенных гетерологичных белков с ПАФ. Примировать можно 3—4-месячных ягнят. Рекомендуем сделать перерыв на несколько месяцев, для того чтобы затем получить наиболее эффективный ответ на бустерные инъекции, в ходе которых вводят 250—500 мкг белка с ПАФ. Подкожные инъекции небольших объемов белка дают такие же хорошие результаты, что и глубокие в/м инъекции, не приводя к формированию больших грануломатозных повреждений кожи. Пробы крови берут через 1 нед после каждой бустерной инъекции. Такая методика позволяет /получить антисыворотки с высоким титром к широкому спектру гетерологичных сывороточных белков. Для получения антисыворотки к IgG человека в качестве им-адуногена используют очищенный F -фрагмент это позволяет избежать абсорбции для удаления антител к другим изотипам. Для получения анти-IgA и анти-IgM антисывороток используют целые молекулы Ig, так как последующая абсорбция для удаления антител к IgG не представляет затруднений (см. разд. 9.1.6, п. 2). [c.78]

РТГА часто пред почнтают ПГА как /метод количественного определения антигена. Он обладает рядом преимуществ. Так, напр[имер, нет необходимости, в получении очищенных ант ител из антисыворотки ил и асцитной (Жидкости антиген может быть мономерным использоваться в реа кции в нативном состоянии. [c.265]

В первоначальном варианте ОПЛГ-СБА класс-специфиче-ские антисыворотки готовили путем соответствующих истощений. Но мы нашли, что во многих случаях неистощенные анти- [c.218]

Выделение иммуноглобулинов, связанных с поверхностью клетки, а также их внутриклеточных предшественников (или предшественников секреторных Ig) всегда сопряжено со значительными трудностями. Радиомаркирование, позволяющее выявить следовые количества Ig, облегчает решение этой задачи. После маркирования клетки солюбилизируют в детергенте и обрабатывают лизаты сывороткой анти-Ig, полученной у другого вида иммунные комплексы обычно осаждают затем второй антисывороткой к Ig первой антисыворотки. Меченые клеточные lg, находящиеся в преципитате, исследуют методом электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (ДСН) в присутствии восстанавливающих агентов или без них (Laemmli 1970). Меченые полипептидные цепи, разделенные в геле, опре- [c.77]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология