Электрофоретическая подвижность классы

Хроматография на ДЭАЭ-сефадексе очень удобна для выделения из сыворотки IgG и для разделения белков этой фракции, обладающих разной электрофоретической подвижностью. Стартовый буферный раствор сначала вымывает из колонки IgG, имеющие низкую электрофоретическую подвижность. Быстро мигрирующие белки этого же класса выходят только при градиентном элюировании. Хроматография, на ДЭАЭ-сефадексе является также общепринятой методикой очистки миеломных IgG. [c.217]

В больщинстве природных материалов жирные кислоты встречаются в виде эфиров глицерина (глицеридов) с одним — тремя кислотными остатками. В растительных маслах и животных жирах преобладают триглицериды, тогда как в сыворотке животных жирные кислоты обычно входят в состав липопротеидов. Их можно разделить, используя различия в плотности или электрофоретической подвижности. Липиды делят на следующие основные классы фосфолипиды, моно-, ди- и триглицериды и эфиры холестерина. Некоторые жирные кислоты могут находиться и в свободном состоянии. Нейтральные липиды можно относительно просто экстрагировать из сыворотки, кала, мочи, желчи, клеточных мембран, растительных и животных жиров и из почти всех других природных объектов. Описанный в работе [11в] метод выделения липидов представляет собой модифицированный вариант метода Нельсона [119, 1206]. К 3 мл метанола при перемещивании прикапывают 0,2 мл сыворотки и при тщательном перемещивании дважды добавляют по [c.102]

Липопротеины подразделяются на 4 основных класса в зависимости от плотности (определяемой с помощью ультрацентрифугирования) и электрофоретической подвижности. Признается следующая номенклатура (исходя из метода разделения ЛП) [c.210]

На рис. 2 представлена типичная картина электрофоретического разделения в агарозном блоке из сыворотки кролика 4184-изолировали три популяции антител к пневмококку типа III, обладающих различной электрофоретической подвижностью. Сыворотка содержала около 15 мг антител класса IgG в 1 мл. Получены четыре основные фракции, содержащие иммуноглобулины. Картина изоэлектрического фокусирования для трех из них (рис. 3) подтверждает эффективность электрофоретического метода можно видеть, что фракция 4 содержит в основном антитела с р1 7,7-—8 (медленно мигрирующий компонент), а фракция 2 (быстро мигрирующий компонент) — антитела с р 5,9—6,2. Фракция 3, как и следовало ожидать на основании электрофореграммы, содержит примесь фракции 2. Фракция 1 (на рис. 3 не Показана) по данным микрозонального электрофореза загрязнена другими сывороточными белками. С помощью количественной преципитации с полисахаридом пневмококка типа III было показано, что в элюат из геля выходит в общей сложности 74,2% антител, содержавшихся в нанесенном образце сыворотки. [c.66]

При изучении гемоглобина у гематологических больных, а также при обследовании здоровых людей было обнаружено более 100 мутантных форм гемоглобина. Гемоглобины, отличающиеся по электрофоретической подвижности от гемоглобина А, подвергают анализу методом пептидных карт ( отпечатков пальцев ) и затем определяют последовательность аминокислот того пептида, по которому исследуемый гемоглобин отличается от гемоглобина А. Выявлено несколько классов мутаций гемоглобинов. К мутациям первого класса относятся замены аминокислот на поверхности молекулы почти всегда эти замены безвредны, а гемоглобин 8 составляет поразительное [c.101]

У этого метода много преимушеств, главным из которых является высокая чувствительность детектирования, не зависящая от химического строения или каких-либо других свойств соединений, кроме тех, которые определяют их характеристическую подвижность в различных хроматографических или зонно-электрофоретических системах. Кроме того, выделение искомых соединений, по крайней мере на начальных этапах исследования, т. е. в небольших количествах, осуществляется непосредственно в процессе детектирования это зависит от эффективности хроматографической или электрофоретической методики, применяемой для разделения смеси на индивидуальные компоненты. Наконец, поскольку первичные предшественники известны, то искомые метаболиты можно сразу отнести к определенному биосинтетическому классу (ср. табл. 28.1.1), что дает полезную информацию об их структуре. [c.365]

В частицах лиофобных золей всегда содержится компактное ядро, лишенное электрических зарядов. Напротив, в частицах белков и полиэлектролитов подобное ядро отсутствует, и они по всей своей массе несут способные к диссоциации ионогенные группы. В белках ионогенные группы имеют различную химическую природу — кислые карбоксильные, основные амино-группы и др., вследствие чего белки относятся к классу амфотерных электролитов. При крайних рн резко преобладает диссоциация групп одного знака и, например, при рН-2 белковая молекула несет лишь положительные заряды. Однако тот же заряд при кислых рн можно представить, по Бьерруму и Линдер-штрем-Лангу, обусловленным не диссоциацией солеобразных аминогрупп, а адсорбцией Н+-ионов из раствора и подавлением диссоциации СОО -групп на белковой молекуле. При любом предположении белковая молекула при данном pH несет точно определенное число зарядов, а компенсирующие ионы располагаются в растворе с определенной плотностью распределения, что, соответственно, измеряется при помощи кривых титрования и электрофоретической подвижности (см. ниже). [c.105]

Данные табл. 39 полностью опровергают одно альтернативное нейтралистское объяснение, которое лежит в основе любых сравнений сходных частотных распределений. То, что мы называем аллелями , — это на самом деле классы электрофоретической подвижности. В любой данной последовательности аминокислот имеется немало единичных замещений, которые могут вызвать по существу одинаковый сдвиг изоэлектрической точки. Так, возможно — и в некоторых случаях неизбежно,— что некий класс электрофоретической подвижности на самом деле гетерогенен и состоит из набора аллельных форм. Если бы каждый класс подвижности состоял из огромного числа аллельных форм, то частота того или иного класса просто отражала бы число различных возможных мутаций в этом классе. Согласно закону больших чисел, следует ожидать, что независимо эволюционирующие популяции будут тем не менее иметь одинаковое частотное распределение классов. Данные по группе willistoni исключают это объяснение. Если D. equinoxialis и [c.223]

Большое преимущество этого метода — высокий выход антител в целом или отдельных иммуноглобулинов при фракционировании сывороток и возможность разделения двух или более видов антител, относящихся к одному классу Ig, но имеющих различную электрофоретическую подвижность. Кроме того, можно одновременно проводить электрофоретическое разделение нескольких образцов (Braun, Krause, 1968 Johansson, 1972). Однако в отличие от ранее упоминавшихся методов (хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе, гель-фильтрации) количество наносимого на гель материала здесь очень ограничено кроме того, эксперимент занимает много времени, но это окупается простотой отделения иммуноглобулинов от других белков и хорошей воспроизводимостью. [c.63]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология