Зоны электрофоретического бумаге

Он выполняется следующим образом. На середину полоски плотной, гомогенной фильтровальной (хроматографической) бумаги, пропитанной буферным раствором с определенным значением pH, наносят каплю исследуемого коллоидного раствора. Затем на полоску бумаги накладывают разность потенциалов. Под влиянием образующегося электрического поля отдельные компоненты, содержащиеся в капле, обладающие разными электрофоретическими подвижностями, передвигаются по полоске с различными скоростями. Через некоторое время компоненты распределяются на бумаге в виде стольких зон, различно удаленных от исходной точки, сколько компонентов содержалось в растворе. Полоску высушивают и прогревают для денатурации и фиксации находящихся на ней белков и после этого окрашивают подходящими красителями. В результате проявляется распределение компонентов по длине полоски. Роль бумаги в этом методе сводится к устранению диффузионного и конвекционного перемешивания белков при электрофорезе. [c.210]

Важное преимущество электрофореза на бумаге перед методом подвижной границы связано с возможностью полного разделения компонентов путем элюирования соответствующих зон. С помощью комбинирования сте-кания раствора по наклонной фильтровальной бумаге с электрофоретическим отклонением создан метод, позволяющий беспрепятственно разделять компоненты. [c.158]

Электрофорез применяют для очистки различных фармацевтических препаратов. В Фармакопее СССР (изд. 10) предусмотрено установление степени чистоты по электрофоретической однородности ряда антибиотиков, витаминов и других веществ. Электрофорез (ионофорез) является одним из методов введения лечебных препаратов в организм человека. Широкое применение как аналитический и препаративный метод разделения и выделения различных лекарственных веществ и биологически активных соединений нашел электрофорез на бумаге, а также в агаровом или крахмальном геле. Эти методы применяют также при диагностике ряда заболеваний путем сравнения фракционного состава (по числу и интенсивности зон на электрофореграмме) нормальных и патологических биологических жидкостей. [c.408]

После окончания процесса выключают прибор и электрофоре-граммы извлекают из камер. Концы ленты, которые были погружены в буферный раствор, обрезают и удаляют избыток влаги фильтровальной бумагой и далее подсушивают. Чистоту арсеназо III оценивают непосредственно на электрофореграмме по числу окрашенных зон при сравнении с эталонным образцом и свидетелями . Препарат идентифицируют по величине электрофоретической подвижности при сравнении с эталонным образцом арсеназо III или с литературными данными для соответствующих условий. [c.57]

Электрофоретические разделения на полосах бумаги. Эксперименты проводятся во влажной камере на хроматографическом ватмане, смоченном каким-либо электролитом, содержащим комплексообразующий агент. Под действием электрического поля с градиентом 5—15 в см вещество из исходного пятна мигрирует к соответствующему электроду со скоростью, определяемой характером ионных форм и их соотношением, т. е., в конечном счете, концентрацией комплексообразующего агента и pH среды. После снятия электрического поля на полосе остаются разделенные зоны отдельных компонентов или их групп, которые соответствующим образом обнаруживаются и идентифицируются. [c.148]

Адсорбция на носителе. При работе с пористым носителем поверхность раздела фаз очень велика и даже сравнительно слабая адсорбция может привести к полной неудаче при электрофоретическом разделении. Причины адсорбции не всегда достаточно ясны. По-видимому, силы неэлектростатического происхождения играют большую роль по отношению к белкам, чем к малым ионам. Адсорбция последних (пептидов, аминокислот и т. д.) связана с наличием ионизованных групп на поверхности носителя. Установлено, что в целлюлозе и крахмале, например, имеется значительное количество карбоксильных групп. Так как эти группы заряжены отрицательно, опасность адсорбции относительно мала для отрицательных ионов, но велика для положительных. Делались попытки уменьшить заряд бумаги этерифи-кацией карбоксилов диазометаном. С белками рекомендуется работать при pH выше их изоточки, тогда электростатическое отталкивание препятствует адсорбции. Этот эффект можно усилить, используя ионообменную бумагу, в которой с поверхностью целлюлозных волокон химически связано значительное число ионизированных групп с зарядом, противоположным заряду исследуемого иона. Для уменьшения адсорбции белков применялись также детергенты иногда помогает предварительная обработка носителя раствором исследуемого белка. Хотя в некоторых случаях эти меры приносят желаемый эффект, адсорбция часто (для белков — почти всегда) наблюдается в той или иной степени при электрофорезе на твердом носителе. Обратимая адсорбция проявляется в уменьшении скорости движения и в образовании хвостов у движущихся зон, что ухудшает разделение и затрудняет количественный анализ. Необратимая адсорбция приводит к тому, что на всем пути зоны остается равномерный след — адсорбированный белок, а количество вещества в зоне постепенно уменьшается. Если это количество мало, зона может вообще исчезнуть по дороге. Иногда адсорбция сопровождается денатурацией белка, частичной или полной потерей его биологической активности. [c.81]

Электрофорез используется для выделения и разделения ферментов на конечных стадиях очистки, а также для препаративных и аналитических целей. Для препаративного выделения и очистки ферментов проводят зонный электрофорез па бумаге и в блоках или на колонках с различными наполнителями (целлюлозным порошком, крахмалом и другими), а также электрофорез в гелях — агар-агаровом, крахмальном, полиакриламидном. Электрофорез в гелях отличается от электрофореза на порошкообразных или пористых носителях. Здесь сочетаются два метода разделения ферментов — электрофоретический и метод, основанный на гель-фильтрации. Фракционирование ферментов на основе различной электрофоретической подвижности оказывается одним из самых эффективных методов. [c.201]

Электрофоретическое разделение полисахаридов может быть осуществлено различными путями под действием электрического тока в растворе (электрофорез с подвижной границей в ячейке Ти-зелиуса) на полосках бумаги, на листах бумаги из стеклянного волокна, на лентах из чистого отбеленного шелка, на колонках, заполненных стеклянным порошком (зонный электрофорез). [c.48]

Электрофоретические методы, отличные от описанных в данной книге, не нашли широкого применения для разделения меченых соединений. При разделениях смесей белков, пептидов и нуклеотидов в качестве носителя вместо бумаги лучше использовать ацетат целлюлозы, на котором указанные соединения практически не сорбируются. Такая замена позволяет получить четкие зоны при разделении, однако низкая емкость ацетата целлюлозы делает его пригодным лишь для аналитических разделений. [c.155]

В основу этого метода положен зонный электрофорез в электролите, который движется перпендикулярно направленик> электрического поля. Первоначальный вариант метода предназначен для разделения на бумаге. Позднее [2] он был применен в отсутствие носителя, при этом стабилизация зон осуществлялась ламинарным потоком достаточно тонкого слоя электролита. Электрофоретическая ячейка имела форму плоской квадратной или прямоугольной рамки, длина ее стороны составляла несколько десятков сайтиметров, а толщина слоя равнялась 0,25—0,60 мм. Вначале этот прибор использовался для разделения высоко- и низкомолекулярных пептидных соединений, нсь позднее выяснилось, что таким способом можно эффективно разделять не только растворимые электрофоретические соединения, но и коллоидные частицы, включая субклеточные частицы и клетки, если конструкция аппарата не допускает быстрого осаждения макрочастиц на стенках электрофоретической ячейки. Движение частиц в условиях непрерывного электрофореза описывается следующим простым соотношением [39] [c.285]

Обнаружение зон проводилось следующим методом снимали отпечаток на бумагу и окрашивали его одной или несколькими красками, обычно используемыми в электрофоретической работе. [c.517]

Метод электрофореза на бумаге. Изучение комплексообразования ионов металла электрофоретическим методом основано на исследовании зависимости подвижности ионов металла от pH раствора и концентрации комплексующего агента в растворе. Если в растворе протекают реакции образования ступенчатых одноядерных комплексных соединений, то в случае подвижного равновесия комплексообразования за время электрофореза не происходит разделения смеси на зоны отдельных компонентов. В случае образования одного комплекса по реакции [c.134]

Метод электрофоретического разделения азосоединений на хроматографической бумаге заключается в том, что при нанесении раствора исследуемого соединения на смоченную буферным раствором полоску бумаги, через которую пропускается постоянный электрический ток, молекулы начинают перемещаться к тому полюсу, заряд которого противоположен их заряду. Моно- и быс-азо-соединения, имеющие отрицательный заряд, перемещаются в электрическом поле к аноду. Ввиду того, что подвижность их различная, происходит разделение смеси азосоединений па отдельные зоны. Вначале перемещаются моноазосоединения, а затем бис-азосоединения. [c.99]

Как метод быстрого разделения ионов высоковольтный электрофорез на бумаге позволяет фиксировать изменения, происходящие в растворе. Это очень важно для изучения химии благородных металлов, трудности установления ионных состояний которых в значительной степени связаны с множеством валентных форм, тенденцией к образованию комплексов, гидролизу, полимеризации. К тому же растворы комплексов платиновых металлов, особенно хлорокомплексов, являются кинетически инертными системами, равновесия в которых устанавливаются чрезвычайно медленно. Ползгчение отчетливых электрофоретических зон дает возможность выделить в чистом состоянии даже промежуточные формы комплексов, определить скорость их образования, исследовать чистоту соединений, идентифицировать число и природу ионов в растворе, объяснить механизм реакции, а также разделить элементы. [c.281]

Наиболее полное разделение смеси белков на индивидуальные компоненты достигается с помощью электрофоретических методов. Как уже обсуждалось в разд. 5.2, проведение препаративного электрофореза, несмотря на то что он обладает значительными теоретическими преимуществами, сопряжено с большими трудностями. Поэтому он используется не часто. В аналитическом же варианте электрофорез — это один из наиболее широко применяемых методов исследования. Действительно, чтобы охарактеризовать очищенные препараты белков, их теперь почти обязательно подвергают электрофоретическому анализу. Для проведения аналитического электрофореза в гелях требуется всего 5—25 мкг белка это обычно не слишком значительная часть полученного препарата. До того как были предложены гелевые системы, электрофоретический анализ проводили в аппарате Тизелиуса методом движущейся границы. Хотя для этого приходилось расходовать десятки миллиграммов белка, разделения очень сходных белков не достигалось и анализ каждого образца требовал больших усилий и внимания. Затем был разработан аналитический электрофорез на бумаге и других целлюлозных материалах, используемых в качестве носителей, что исключило два из указанных выше недостатков метода Тизелиуса количество необходимого для анализа белка значительно сократилось и проводить электрофорез стало намного легче, так как для этого метода требуется только простое оборудование. Однако разрешение осталось примерно таким же, как н прежде, даже при использовании обладающих хорошими качествами современных ацетатцеллюлозных пленок это объясняется тем, что разделение компонентов смеси происходит в соответствии только с приблизительной величиной отношения заряд/размер и многие белки движутся вместе в виде одной зоны (ср. с разд. 5.2). [c.316]

Гомогенность образца по молекулярной массе может быть установлена с помощью методов ультрацентрифугирования или гель-фильтрации. Но эти методы менее чувствительны по сравнению с каскадными методами, в которых разделение макромолекул зависит от их суммарного заряда. Для установления чистоты белков, пептидов и олигонуклеотидов очень полезны методы зонного электрофореза, особенно при изучении электрофоретического поведения образца в нескольких буферных системах с различными значениями pH. С помощью ионообменной хроматографии также можно обнаружить присутствие примесей. Распределительная хроматография и противоточное распределение были успешно использованы при изучении лишь немногих белков из-за ограниченной растворимости и относительной нестабильности большинства белков в неполярных растворителях. Чистоту пептидов, содержащих до 40— 50 остатков аминокислот, можно во многих случаях установить с помощью хроматографии на бумаге. Часто макромолекулярное вещество, кажущееся гомогенным при исследовании одним мето- ом, оказывается негомогенным при использовании другого метода. На- [c.164]

И менее точен, но зато значительно проще, чем метод Тизелиуса. На полоску фильтровальной бумаги, увлажненной буферным раствором, наносят в форме поперечной черточки или пятна исследуемый биоколлоидный раствор. Полоску помещают в горизонтальном положении в закрытое пространство, а концы ее погружают в буферный раствор, где находятся электроды. После подключения источника электродвижущей силы электрическое поле вызывает движение компонентов, находящихся в черточке или пятне, вдоль полоски. Скорость перемещения компонентов зависит от их электрофоретической подвижности. Через некоторое время электрофорез прекращают, бумагу высушивают и погружают в раствор красителя, который на биоколлоиде адсорбируется сильнее, чем на бумаге. По полученному изображению видно положение компонентов в конце электрофореза, и можно судить об их числе и электрофоретической подвижности. Из сказанного выше видно, что бумага играет роль пористой среды, препятствующей растеканию компонентов и их конвективному перемешиванию со средой, в которой протекает электрофорез . В последнее время вместо бумаги используют гелеобразные среды (агар-агар, желатин), которые дают более резко очерченные зоны. Электрофорез на бумаге (и в других средах) сопровождается побочными явлениями, такими, например, как перенос вещества, вызываемый миграцией испаряющегося буфера (Машбёф, Ребейрот и др., 1953 г.). Кроме того, было установлено (Шелудко, Константинов, Цветанов, 1959 г.), что, например, в желатине не только сама электрофоретическая подвижность некоторых красителей меньше, чем в воде или водных растворах, но и соотношение между подвижностями компонентов в этом случае совсем иное. Эти особенности метода еще не до конца изучены. Поскольку рассматриваемый метод имеет важное практическое значение, различные проблемы создаваемой в настоящее время теории электрофореза в пористых и гелеобразных средах п разнообразные методы его использования являются предметом многих научных трудов. Некоторое представление о них читатель может получить из монографии [6 1. [c.158]

Наряду с разделением белков по величине электрофоретической подвижности ири использовании указанных носителей имеет значение молекулярно-ситовой эффект геля и размеры молекул Оелка ири прохождении их через ячеистую структуру геля. Так, если при электрофорезе иа бумаге белки сыворотки разделяются на 4—5 четких зон, то в полиакриламидном геле выявляется 13—16 полос, соответствующих отдельным белкам (рис. 98). [c.219]

Электрофоретический анализ на бумаге. Для анализа препаратов арсеназо III методом электрофореза синтезируют эталонный образец арсеназо III и свидетели — возможные примеси моно- и бисазосоединения. Эталонный образец и свидетели очищают до такого состояния, чтобы на электрофТ>реграмме наблюдалась одна зона или в зоне содержалось не менее 907о основого вещества. [c.56]

Идентификацию ДНС-Гли, ДНС-Сер и ДНС-Ала может осложнить сопутствующее пятно ДНС-ОН, однако все эти четыре компонента хорошо разделяются электрофоретически при pH 1,9. Участок электрофореграммы, содержащий эти четыре компонента (фиг. 62, Б), вырезают, пришивают к другому листу фильтровальной бумаги и проводят электрофорез при pH 1,9. На фиг. 62, Б показано распределение производных, полученное в этих условиях. Зоны, содержащие основные ДНС-производные (фиг. 62, В) и ДНС-Вал, ДНС-Иле, ДНС-Фен (фиг. 62, Г), анализируют таким же образом. [c.277]

Несмотря на то что применение электрофореза для разделения высокомолекулярных комплексов имеет ряд ограничений как в теоретическом аспекте, так и в отношении возмоишости точного предсказания получаемых в этом случае результатов, суш,ествует несколько электрофоретических методов, очень удобных для разделения вирусов. Классический метод электрофореза с подвижной границей в значительной степени вытеснен зонным электрофорезом. Часто применяют электрофорез на фильтровальной бумаге, смоченной подходяш,им буфером. Однако электрофорез в крахмальном или ацетатно-целлюлозном гелях имеет преимущества перед электрофорезом на бумаге. В настоящее время предпочтение часто отдают электрофорезу в полиакриламидном геле, однако этот метод применим, вероятно, только для мелких вирусов (см. гл. IV, разд. В). [c.43]

Сульфопроизводные удобно делить электрофоретически на бумаге или препаративно на носителе в специальной кювете. Обнаруживают зоны для неокрашенных веществ, проявляя пятна на бумаге, наложенной на носитель после электрофореза. [c.280]

Схема установни для зонного электрофореза приведена на рис. 14.66. Электрофоретическое разделение осуществляется в так назьшае-мой постели, состоящей из пористого материала — носителя. В качестве носителя используют различные вещества — бумагу,, полимерные пленки, гели, порошки. Постель пропитывают электролитом (обычно используют буферный раствор,) концы постели находятся в контакте со свободным раствором электролита, находящимся в двух сосудах в эти сосуды помещают два электрода, соединенных с источником постоянного тока. Электроды находятся в специальных секциях, отделенных от резервуаров с электролитом пористыми перегородками это позволяет [c.465]

При зональном электрофорезе необходимо принимать специальные меры для предотвращения конвекционного перемешивания зон. Это достигается применением поддерживающих пористых сред различных гелей, порошков, бумаги и т. д. В последнее время начал распространяться метод зонального электрофореза, в котором роль поддерживающей среды играет так называемый градиент плотности. Поддерживающая среда влияет на скорость электрофоретического перемещения, притом часто неконтролируе- [c.41]

Среди экорагентов, образующих внутрикомплексные соединения с катионами металлов, оксимы, в том числе диметилглиоксим, являются специфическими реагентами для экстракционного отделения и экстракционнофотометрического определения палладия. Электрофоретическое поведение палладия и платины в 0,1 М растворе НСЬ исследовали на бумаге, обработанной 2 -нш спиртовым раствором диметил-глиоксима. При этом палладий, образуя комплекс с диметилглиокси-мом, остается на линии старта, а платина смещается к аноду на расстояние около 100 мм, образуя компактную зону. Таким образом,этот вариант можно успешно использовать для экопресс разделений ионов Pd i) и Р1( У), а также для отделения их от ионов неблагородных металлов, которые в 0,1 М H L двигаются к катоду,например, ионов железа, кобальта, меди. [c.167]

При разделении платиновых элементов электрофоретическим методом возникает, естественно, вопрос о кинетике их реакции с электролитом поскольку от продолжительности электромиграции зависит, в первую очередь, возможность образования соответствующих соединений, а также интенсивность, число и размер зон. Так, при коротком периоде электрофореза взаимодействия между некоторыми комплексами и электролитами не наблюдалось (ацетатный буфер 0,5 и 2 М Na l 0,5 М НС1 0,2 N HaSOi) [6,8]. При достаточно длительном периоде электрофореза (>2 час.) такое взаимодействие отмечалось — образование хлорокомплексонатов ряда платиновых металлов происходило непосредственно при электрофорезе на бумаге [1]. Другими авторами [23] были замечены различия в скоростях электромиграции рутения, нанесенного в виде перхлората и фульвата на бумагу, пропитанную раствором фульвокислот, т. е. наблюдалось лишь медленное взаимодействие. [c.285]

Согласно электрофоретическим исследованиям [1], комплексообразование с НТА происходит не только в случае Pd(II) и Н11(П1) [49], но и у 1г(1У). Для идентификации соединения Р1(1У) одних только электрофоретических исследований недостаточно, и они должны быть подтверждены другими методами, например, снектрофотометрией. При pH > 5 подвижность соединения начинает убывать, что, по-видимому, связано с акватацией и гидролизом его комплексоната. Золото, как и в случае с ЭДТА, восстанавливается, хотя склонность к анодной миграции очевидна. При уменьшении концентрации НТА наблюдалось увеличение числа и размера зон, а также тенденция к сорбции бумагой. [c.288]

Электрохроматография щелочных металлов рассматривается в работах [74, 82—851, В качестве фонового электролита удобен 0,1 Л1 или 4%-ный раствор (МН4)гСОз, После проведения электрофореза (250—1000 в, 1U — 35 мин,) бумагу высушивают и определяют место нахождения зон металлов, смачивая раствором универсального индикатора или бромтимолового синего [85]. Легко разделяются Li, Na, К разделение Rb и s и отделение их от К требует применения высоковольтного электрофореза [851, так как их электрофоретические подвижности мало отличаются (К — 0,962, Rb — 1,00, s—0,988). Чувствительность открытия металлов —0,1 — 0,5 мкг, разделяемые количества до 100—1000 мкг. [c.43]

При применении этого метода наносят очень небольшие количества концентрированного раствора исследуемого препарата на старт в виде узкой полосы. В результате электрофореза (может быть приложена весьма высокая разность потенциалов, поскольку в геле подавляются конвекционные токи) смесь будет разделяться на ряд зон, что позволяет получить более высокое разрешение, чем при работе по методу свободной границы. Более того, можно варьировать средний размер пор и распределение пор по размерам для некоторых поддерживаюш,их сред (крахмал, агар, полиакриламид) таким образом, что действие одного из факторов, влияюш их на электрофоретическую подвижность, а именно гидродинамического сопротивления, будет столь велико, что часть молекул будет практически неподвижной [30]. Электрофоретические подвижности в гелях или на бумаге нельзя непосредственно сравнивать с электрофоретическими подвижностями, измеренными методом свободной границы, кроме тех случаев, когда рассматриваемые молекулы малы по сравнению с размерами пор в поддерживающей среде. Компактные белки с молекулярным весом вплоть до 50 ООО легко диффундируют в 5%-ном полиакриламидном геле, и даже с веществами большего молекулярного веса можно получить хорошие результаты. Бумагу или гелевый блок нужно окрасить, чтобы показать положение различных компонентов можно также сделать перенос на подходящим образом вырезанный кусок фильтровальной бумаги, хотя эта методика часто малочувствительна. Обычные красители, применяемые для обнаружения белков (нигрозин, амидовый черный), дают удовлетворительные результаты для многих гликонротеинов, но некоторые эпителиальные вещества, которые могут представлять собой по существу углеводы (до 90%), окрашиваются довольно плохо. Было найдено, что для кислых гликонротеинов лучше применять толуидиновый голубой [32] или муцикармин [33], а алциановый голубой окрашивает как кислые, так и нейтральные гликопротеины [34]. Наиболее общей методикой окрашивания является, по опыту автора, методика Райдона и Смита [35] (хлорирование и обработка смесью крахмала и иодистого калия), но она неприменима на полиакриламидных гелях. [c.47]

Самый простой способ обеспечения стабильности электрофоретических зон заключается в том, что в среду для электрофореза вводят вещества, образующие капиллярную структуру. Ан-тиконвекционные свойства такой системы весьма высоки, если площадь поперечного сечения капилляров достаточно мала, так как в канале круглого сечения скорость потока снижается пропорционально четвертой степени радиуса. В качестве поддерживающей среды чаще всего используются фильтровальная бумага, пленки из ацетата целлюлозы, колонки или блоки целлюлозного порошка, гранулированный крахмал или гранулы поливиниловых полимеров, а также агаровый, агарозный, крахмальный или полиакриламидный гели. Зональный электрофорез в поддерживающей среде имеет ряд важных преимуществ. При его проведении можно использовать какой-либо простой и сравнительно недорогой прибор и анализировать одновременно несколько различных препаратов. Процедуры визуализации зон и выделения фракций осуществляются довольно легко. Вещества, обладающие биологической активностью, можно выявить непосредственно на электрофореграммах. Метод легко приспособить как для крупномасштабного разделения веществ, так и для микроразделения. Удается достигнуть очень высокой разрешающей силы, особенно в среде, характеризующейся одновременно антикон векционными свойствами и эффектом молекулярного сита. [c.34]

НОЙ пластинке подходящего размера помещают в электрофоретическую камеру. Концы блока соединяют с электродными сосудами при помощи фитилей из фильтровальной бумаги. Для получения стартовой зоны на поверхности блока по линейке выдавливают булавкой ряд канавок. Необходимо следить за тем, чтобы случайно не проткнуть блок насквозь. Кончик булавки следует погружать не глубже чем на 2 мм при толщине блока 2,5 мм. Если разделяемые вещества бесцветны, то положение полученных фракций определяют при помощи реплики, которую делают, осторожно прижимая к поверхности блока пропитанную буфером и наполовину высушенную полоску тонкого целлогеля или ацетата целлюлозы. Затем полоску быстро окрашивают, пока электрофорез в блоке еще продолжается. Если положение фракций на ней можно выявить, электрофоретическое разделение прекращают и блок разрезают на сегменты в соответствии с обнаруженной картиной. Разделенные вещества можно получить, отжимая эти сегменты в пресс-шприце (фирма СЬете1гоп, Италия) или в обычном шприце. Согласно проспекту фирмы-изготовителя, в бло ке целлогеля толщиной 2,5 мм можно фракционировать 0,25—0,4 мл сыворотки крови или 0,1 мл 3%-ного гемолизата эритроцитов. [c.45]

Одной 1ИЗ наиболее сложных проблем, возникающих при проведении препаративного электрофореза, является извлечение из геля разделенных компонентов. Для этой цели можно использовать несколько способов агаровый гель подвергают элюции буферными растворами, центрифугированию, замораживанию и оттаиванию, обработке агаразой [1437]. Однако эта проблема до сих пор еще не решена, так как помимо самого агара в выделенные фракции могут попадать и содержащиеся в геле примеси. Наилучшие результаты были получены при использовашга для элюирования фракций электрофоретического процесса [451]. Местоположение разделенных зон выявляли при помощи реплики на фильтровальной бумаге. Выделение отдельной фракции осуществляли следующим образом. [c.66]

Аналитический диск-электрофорез в трубках проводят по существу так, как его описал Дэвис [281]. Обычно применяют стеклянные трубки, но некоторые авторы предпочитают трубки из плексигласа или поликарбоната. Внутренний диаметр трубок равен около 5 мм, а наружный 7 мм длина трубки составляет 65—70 мм. Внутренний диаметр должен быть постоянным по всей длине трубки, а ее края — идеально гладкими, так как иначе гель может быть поврежден при его извлечении из трубки. Острые края рекомендуется отшлифовать при помощи точила или наждачной бумаги. Ни в коем случае их нельзя оплавлять на стеклодувной горелке. Если разделяемые вещества характеризуются весьма близкими электрофоретическими подвижностями, целесообразно использовать более длинные трубки [962, 963] однако следует шомнить, что при этом увеличивается время разделения, а следовательно, получаются размытые зоны, которые трудно оценивать количественно. [c.94]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология