мозаики костра

Рис. 9. Схема вероятной вторичной структуры З -концевого домена РНК вируса мозаики костра

НОЙ концентрации соли, и поэтому некоторые методы очистки для работы с такими вирусами непригодны. Под влиянием крайних значений pH и высоких температур разрушаются все вирусы, но при этом они сильно различаются между собой по стабильности в различных пределах значений pH и по чувствительности к температуре. Примером может служить, с одной стороны, высокая чувствительность к низким pH вируса ящура, который теряет свою инфекционность при pH ниже 6,5. С другой стороны, вирус мозаики костра разбухает при нейтральных pH и устойчив только при pH 4—6. Таким образом, при выделении вирусов часто можно подобрать такие условия pH и температуры, которые, оказывая неблагоприятное и денатурирующее воздействие на примеси, не влияют на выделяемый вирус. [c.34]

Ф и г. 5. Спектры поглощения вирусов и вирусных компонентов. I — вирусная РНК ВТМ в HjO (в гиперхромном состоянии) II — изометрический вирус, содержащий 21% РНК (вирус мозаики костра безостого) [c.52]

Вирус мозаики костра безостого 4,6 86 26 21 1,0 — — — 180 20 [c.156]

Многие вирусы содержат несколько молекул нуклеиновой кислоты, но покрывающая их оболочка часто может быть образована только каким-либо одним белком. Эти вирусы составляют несколько обособленных классов. Один класс включает в себя чувствительные к солям вирусы растений (например, вирус мозаики костра безостого), содержащие РНК, молекулярный вес которых может быть равен 1,0-10 0,7-10 и 0,3-10 Д [42]. Инфекционность присуща только высокомолекулярной РНК две [c.162]

В частицах различных вирусов (вирусы мозаики костра безостого, мозаики коровьего гороха, гриппа, [c.285]

Вирус мозаики костра [c.20]

ВМК — вирус мозаики костра ВМЛ — вирус мозаики люцерны ВТМ —вирус табачной мозаики ХВК — Х-вирус картофеля. [c.24]

Если белки капсида синтезированы, то само Образование из них капсида может происходить не трлько в клетке, но и in vitro путем самос рки. Простейшие примеры самосборки наблюдались на вирусе спирального типа -вирусе табачной мозаики (ВТМ) и вирусе шарового (точнее см. ниже) типа - вирусе мозаики костра (ВМК). [c.92]

Прежде чем приступить к очистке вируса или к использованию его в экспериментальных целях, следует убедиться в его стабильности, о которой судят по потере инфекционности в различных условиях. Находясь в инфицированной ткани, вирусы при замораживании обычно не повренч-даются, поэтому их лучше хранить при низких температурах, за исключением, однако, таких вирусов, которые при замораживании разрушаются. Многие очищенные вирусы (например, ВТМ) повреждаются при повторном замораживании и оттаивании. Большинство вирусов хорошо переносит воздействие высоких концентраций солей однако некоторые из них (например, вирус мозаики костра) разрушаются под действием одномоляр- [c.33]

Идеальным объектом для выделения белков служат, по-видимому, нестойкие вирусы, такие, например, как вирус крапчатости конских бобов, вирус мозаики костра безостого и вирус огуречной мозаики, разрушающиеся при нейтральном значении pH и высокой ионной силе. Однако конформация белков этих вирусов тоже исключительно лабильна, и поэтому при хранении они легко изменяются даже в присутствии дитиотреитола, предотвращающего самоокисление. Методика выделения таких белков состоит в следующем. Раствор, содержащий вирус, подвергают диализу против 1 М раствора СаС1г или КаС1, забуференных до pH 7 и содержащих 10 М дитио-треитол. В результате РНК выпадает в осадок, после чего ее можно удалить с помощью центрифугирования [572]. [c.50]

Другую интересную группу составляют мелкие изометрические вирусы вирус мозаики костра безостого, вирус хлоротичной пятнистости коровьего гороха и вирус огуречной мозаики. В то время как вирионы этих вирусов имеют одинаковый размер, у них обнаружено три вида РНК, различающихся по размерам (например, 26S, 22S, 14S) [28, 42]. Молекулярные веса двух мепыпих компонентов обычно в сумме равны молекулярному весу более крупного компонента (например, 1 -10 , 0,7 -lO и 0,3-10 ), причем инфекционность присуща только более крупному компоненту. Эти данные убедительно показывают, что меньшие компоненты представляют собой отдельные фрагменты большого. Почему и как происходит в этих вирусах такая специфическая фрагментация, пока не ясно. Сейчас ведутся работы по изучению концевых групп, которые позволят полнее охарактеризовать природу данных фрагментов. [c.112]

По-видимому, близкое к только что рассмотренному и столь же непонятное явление представляет собой следующее наблюдение. РНК фага QP крайне чувствительна к РНК-азе. В опытах in vitro молекула этой РНК распадается на отдельные фрагменты в результате даже незначительного воздействия РНК-азой (0° С, 30 мин, отношение РНК/фермент = 200 ООО). Разрывы имеют специфическую локализацию. Под действием РНК-азы молекула РНК распадается с образованием прежде всего фрагмента (несущего З -конец), на долю которого приходится 68% всей РНК. Остаток насчитывает 32% [29, 30]. Высказывалось предположение, что столь избирательная чувствительность к ферменту обусловлена некоторыми особенностями конформации вирусной РНК. Довольно высокие константы седиментации фаговых нуклеиновых кислот и РНК вируса мозаики костра безостого по сравнению с РНК ВТМ (около 28 и 30S для молекулярных весов i -10 и 2-10 ) наводят на мысль, что нуклеиновые [c.112]

Можно утвернч-дать, что, как правило, относительная инфекционность голых нуклеиновых кислот тем ниже, чем стабильнее вирус и прочнее его белковая оболочка. Так, инфекционность вирусов, диссоциирующих в нейтральных растворах солей (вируса мозаики костра безостого и других представителей группы вирусов растений), не намного выше, чем инфекционность их изолированных РНК. [c.176]

Успешную реконструкцию изометрических вирусов удалось осуществить лишь в последние годы. Некоторые мелкие вирусы растений (вирус мозаики костра безостого, вирус хлоротичной пятнистости коровьего гороха, вирус крапчатости бобов обыкновенных) диссоциируют при повышении концентрации солей до 1 М. Образующиеся при этом белки могут снова агрегировать с образованием вирусоподобных частиц в присутствии нуклеиновой кислоты при понижении концентрации солей путем диализа [26, 27, 202, 536]. Таким образом, условия, необходимые для реконструкции этих вирусов, резко отличаются от условий, необходимых для реконструкции ВТМ, причем реконструкция протекает даже значительно быстрее и не требует повышенной температуры (1 ч при 0°). Но в среде обязательно должны присутствовать тиоловые соединения (типа дитиотреитола), чтобы защитить от окисления ЗН-группы белка. [c.221]

Рис. 77. Зависимость логарифмов молекулярных масс белков от их относительных подвижностей в полиакриламидных гелях разных концентраций, содержащих 0,1 % ДСН [325]. Л. 5%-ный гель. Б. 10%-ный гель. В, 15%-ный гель. 1 — пентамер БСА 2 — тетрамер БСА 3 — тример БСА 4 — у глобулин 5 — димер БСА 6 — БСА 7—овальбумин 8 — пепсин 9 — карбоксипептндаза 10 — химотрипси-ноген А 11 — трипсин 12 — вирус мозаики костра 13 — р-лактоглобулин 14 — миоглобин 15—белок вируса табачной мозаики 16 — лизоцим 17 — Р-оксиметиллизоцим 18 — РНКаза А 19 — ацетилцистамннил-РНКаза А 20 — В-цепь химотрипсина 21 — белок вируса К17 22—цитохром С 23—С цепь химотрипсина 24 — инсулин.

ВМК — вирус мозаики костра, 320 =87 ВЮМБ — вирус южмй мозаики бобов, 32(щ,=1 5 ВТМ —вирус табачной мозаики, 32о-( = 194. [c.17]

Потенциально векторами могут быть и кДНК РНКовых вирусов, особенно у нитевидных, поскольку упомянутое ограничение здесь не так жестко. Проводятся эксперименты с вирусом табачной мозаики (TMV) и вирусом мозаики костра (BMV) [c.380]

Еще один важнейший аспект получения белков для практических целей был обозначен акад. А. С. Спириным в докладе на юбилейной сессии Академии наук СССР (март 1987 г.). Он сводится к преодолению клеточного уровня биосинтеза белков и переходу к масштабированному их синтезу в бесклеточных системах трансляции непрерывного действия, работающих в проточном режиме. Это откроет возможность получать биологически значимые белки (интерферон, инсулин, ах-антитрипсин) и пептиды медицинского назначения, позволит конструировать и производить белки с любыми заданными свойствами, поднимет на новый уровень изучение закономерностей химической коэволюции белков и нуклеиновых кислот. Решающую роль здесь играет наработка необходимых количеств соответствующих мРНК в системах, содержащих РНК-зависимую РНК-полимеразу типа репликазы фага Qp. Уже создана и опробована на РНК-4 вируса мозаики костра, РНК фага М82 и мРНК кальцитонина установка для твердофазной трансляции типа реактора непрерывного действия. Указанные работы по внеклеточному синтезу белка ведутся в рамках Государственной научно-технической программы Новейшие методы биоинженерии . Уже сегодня в лабораторных условиях на небольших биореакторах этим методом можно получать достаточное для дальнейших исследований количество пептидных гормонов, антигенов для диагностических целей, белковых токсинов и антитоксинов, антивирусных защитных белков, некоторых ферментов. Революция в молекулярной биологии и биотехнологии продолжается. [c.305]

Хлорйстый кальций. Диализ в течение ночи па холоде против 1 М СаСЬ при pH 6,0 является причиной деградации вируса мозаики костра и вируса пятнистости бобов, при этой РНК преципитируется количественно [860, 861]. Белки в этих условиях остаются в растворе. Нерастворимый преципитат промывают дважды 1 М СаСЬ и растворяют путем диализа суспензии в течение ночи против дистиллированной воды или фосфатного буфера на холоде. [c.166]

Для уменьшения инфекционности необходимо не только осаждение вируса. Кассанис и Клечковский [942] показали, что два вируса, очень сильно различающиеся по изоэлектрической точке (для ВТМ она соответствует pH 3,5, а для вируса мозаики костра — pH около 8,0), взаимно-осаждают друг друга из раствора в отсутствие соли. Суспензия таких преципитатов вызывает столько же местных поражений у N. glutinosa, как и ВТМ в растворе той же концентрации. [c.354]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология