Белки получение

В данном разделе изложены методы и результаты анализа строения а-спиральных глобулярных белков. Полученные закономерности важны для моделирования формирования пространственной структуры этих белков. [c.132]

Трансферрины (сидерофилины) — группа сложных белков, полученных из разных источников и характеризующихся способностью специфично, прочно и обратимо связывать ионы железа Fe (III) и других переходных металлов. Наиболее подробно из этой группы белков изучен трансферрин сыворотки крови. Функция трансферрина заключается в транспорте ионов железа в ретикулоциты, в которых осуществляется биосинтез гемоглобина. Система трансферрин—ретикулоцит считается весьма перспективной для изучения взаимодействия металла с белком и белковой молекулы с клеткой. [c.85]

Этот аспект изучения взаимодействий между липидами и белками мало затрагивался в сфере технологии. Важное значение этих взаимодействий для структуры и функции клеточных мембран и плазматических липопротеинов послужило стимулом многочисленных исследовательских работ на модельных системах. Эти работы позволили приобрести хорошие общие знания о молекулярных ассоциациях. Таким образом, здесь приводятся последние сведения о видах взаимодействий между липидами и белками, полученные в результате модельных исследований. Большинство биологических систем находится в водных средах, и во многих технологических процессах вода наиболее часто используется в качестве растворителя. Кроме того, вследствие особой структуры липидов белки больше взаимодействуют с липидными фазами, чем с изолированными молекулами. Здесь будут показаны структура липидных фаз в гидратированной сре- [c.306]

Она строится из ленты, разграфленной на квадраты, которые отвечают аминокислотным остаткам. Лента, согласно стереохимическому коду, причудливым образом сворачивается и в определенных местах скрепляется английскими булавками. В собранной конструкции неизвестными остаются координаты атомов и конформационные состояния остатков, а их боковые цепи вообще отсутствуют. По своему информационному содержанию построенная конструкция аналогична рентгеноструктурной модели белка, полученной при грубом разрешении в 6-8 А. Стремясь как можно документальнее передать авторскую логику построения модели, я при последующем изложении буду часто обращаться к оригинальному тексту. [c.540]

Аминокислотный состав (качественный и количественный) многих тысяч белков, полученных из разных источников, выяснен (табл. 1.4). [c.40]

До сих пор не раскрыты в деталях молекулярные механизмы передачи генетической информации, закодированной в нуклеотидной последовательности ДНК. Различают три основных этапа реализации генетической информации. На первом этапе-этапе репликации происходит образование дочерних молекул ДНК, первичная структура которых идентична родительской ДНК (копирование ДНК). Репликация ДНК является ключевой функцией делящейся клетки и частью таких биологических процессов, как рекомбинация, транспозиция и репарация. На втором этапе, названном транскрипцией, генетическая информация, записанная в первичной структуре ДНК, переписывается в нуклеотидную последовательность РНК (синтез молекулы РНК на матрице ДНК). На третьем этапе-этапе трансляции генетическая информация, содержащаяся уже в нуклеотидной последовательности молекулы РНК, переводится в аминокислотную последовательность белка. Далее представлены основные итоги исследований и наши представления о биосинтезе полимерных молекул ДНК, РНК и белка, полученные к середине 1996 г. [c.478]

Принцип метода. Анализ включает две стадии а) электрофорез исследуемого белка в геле агарозы и б) повторный электрофорез полученных фракций в геле, содержащем антитела, перпендикулярно к направлению первого разделения. Полоску геля, содержащего фракции исследуемого белка, полученные на первой стадии, помещают на пластинку геля агарозы, содержащего [c.154]

Методы выделения групповых веществ крови различаются в зависимости от источника. Так, например, для их выделения из жидкости кисты, ее лиофилизуют и экстрагируют 95%-ным раствором фенола при комнатной температуре большая часть группового вещества крови остается в нерастворимом осадке в достаточно чистом состоянии . При выделении этих гликопротеинов из слизистой желудка приходится предварительно обрабатывать исходный материал пепсином или подвергать его автолизу в течение долгого времени для освобождения от сопутствующих белков. Полученный после осаждения спиртом порошок экстрагируют 90— 95%-ным раствором фенола, в который в данном случае переходит групповое вещество из фенольного раствора гликопротеин осаждают спир-том . [c.581]

В связи с тем, что присутствие в растворе хлорида калия мешает количественному определению белка по методу Лоури, эту соль из препарата белка необходимо удалить. Для этого к 1 мл экстракта добавляют 2 мл 10%-ного раствора ТХУ, что приводит к осаждению белков. Полученную суспензию центрифугируют при 4000 об/мин 10 мин. Надосадочную жидкость очень тщательно удаляют. Края пробирок вытирают фильтровальной бумагой. К осадку прибавляют 10 мл 0,1 моль/л раствора гидроксида натрия. Раствор перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения осадка. Для определения концентрации белка по методу Лоури берут 0,1 мл щелочного раствора белка. [c.6]

Для уплотнения макаронного теста его подвергают механической обработке. Наиболее распространены теплый замес на воде с температурой 55—56 С. При этом более равномерно идет набухание компонентов муки, образование клейковины и не происходит денатурации белков. Полученное тесто после вакуумной обработки подвергают прессованию. Прессование проводят через специальные матрицы, форм отверстий которых и определяет тип и вид макаронных изделий. Температурный режим прессования влияет на гидратацию клейковинных белков, повышение температуры может привести к их частичной коагуляции, а- также окислению пигментов. Сырые макаронные изделия подсушивают, обдувая воздухом, а затем, после резки и раскладки, направляют на сушку. При сушке происходит потеря белками и крахмалом влаги, тепловая денатурация белков, возможен их частичный гидролитический распад и клейстеризация крахмала. [c.111]

Время корреляции в области медленного вращения рассчитывали по формуле т=4,17-10 1 (1—[28]. Оно составляет для радикала 8 35 не, а для радикала 7 — 55 не. Различия в X могут наблюдаться в случае различной ориентации оси симметрии 7г-электронов радикальных фрагментов относительно длинной оси белка. Полученные данные свидетельствуют в пользу преимущественно перпендикулярной ориентации плоскости стероидных молекул относительно длинной оси молекулы альбумина. [c.117]

Как MALDI, так и ионизацию электрораспылением можно легко сочетать с ферментативным расщеплением белков для последующего определения их параметров. После расщепления белка полученная смесь целиком помещается в MALDI-спектрометр и анализируется. В наиболее благоприятных случаях можно определить массу более чем 90% пептидных фрагментов. Этот подход можно использовать для определения изменений в белке, например при определении параметров рекомбинантных белков или для идентификации ковалентно-связанных модификаторов белка. Масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением, вследствие того, что она легко сочетается как с ЖХ-МС, так и тандемной масс-спектрометрией, может быть источником еще и дополнительной информации о последовательности аминокислот в белке. При химической ионизации пептид фрагментируется на два комплементарных ряда ионов, которые имеют последовательности аминокислот, начиная с С- и N-терминальных атомов пептида. Тандемная масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением оказывается более экспрессной и находит более разнообразное применение, чем традиционные биохимические методы, такие, как последовательное отщепление аминокислот по методу Эдмана. [c.308]

Реакционный центр фотосинтезирующих бактерий является единственным комплексом интегральных мембранных белков, полученным в виде высокоупорядоченных кристаллов. Рентгеноструктурный анализ этих кристаллов позволил рассчитать карту электронной плотности с разрешением в 0,3 нм и получить модель пространственного строения простетических групп. Карта алектронной [c.635]

Используются ферменты и в виде гомогенных белков. Получение ферментов в чистом виде осуществляется различными способами в зависимости от их [c.58]

Количественное определение белков производят, как правило, определением общего азота по Кьельдалю. Исходным веществом в этом анализе могут служить осадки белков, полученные при номощи описанных выше осаждающих реактивов. Свободные ННа-группы белка определяются методом Ван-Слейка (см. Аминокислоты ). [c.442]

Осадки белков, полученные при высаливании, обычно очищают от примеси солей методом диализа или методом гель-фильтрации. В основе этих методов лежит различие в молекулярной массе белка и соли. [c.26]

Полимерная молекула белка непригодна для питания бактерий. Ферменты протеазы расщепляют пептидную связь белков. Полученные в результате этого органические кислоты и аминокислоты служат питательными веществами для микроорганизмов. [c.89]

Pu . IV.29. Зависимость удерживаемого объема от молекулярной массы белков, полученная на сефадексе 0-200 [89]. [c.176]

Зерно разных сортов пшеницы сильно различается по своей пищевой ценности. Сильные пшеницы содержат обычно 13— 14% белковых веществ, а у слабых эта величина снижается до 6%. В Великобритании хлебопекарную муку получают путем размалывания смеси зерен сильных и слабых пшениц с одновременным удалением основной части оболочек и зародышей, причем достигается 72%-ный выход муки, содержащей И— 12% белка. Полученную муку отбеливают двуокисью хлора, обесцвечивающей каротиноиды (можно также добавить к муке небольшое количество бромата калия) и обогащают солями кальция и железа и никотиновой кислотой (витамином РР). [c.605]

Хроматография на фосфоцеллюлозе. Подготовленную для работы фосфоцеллюлозу (циклизацию проводят, как указано на с. 109) уравновешивают буфером А и добавляют к раствору белка (примерно 20 г сухой фосфоцеллюлозы на раствор белка, полученный из 200 г мышц). Смесь перемешивают 20 мин, затем переносят на воронку Бухнера и фильтруют под небольшим давлением. Фосфоцеллюлозу отмывают от несвязавшегося белка буфером А (примерно 5 л) до тех пор, пока оптическая плотность элюата при 280 нм будет равна 0,01. После этого фосфоцеллюлозу суспендируют в 1 л буфера Б и pH осторожно доводят до 7,2 NaOH. Этим же буфером вновь отмывают фосфоцеллюлозу от несвязавшихся белков (примерно 7 л). [c.236]

Лизис белка. Получение аминокислот, производстю и получение сыра, мягчение мясных и рыбных изделий, вьщелка кожи, активизация пищеварения.Пиво-варение, виноделие, хлебопечение, пищевая промьшшенность, сельское хозяйство, медицина [c.73]

Приведенными примерами не ограничиваются исследования природных пептидов и белков. Для многих белков установлено строение отдельных фрагментов. Хотя мы еще далеки от полной расшифровки строения белков, полученные результаты позволили обнаружить некоторые закономерности, послужившие основой для более глубокого детального рассмотрения ряда биохимических процессов (исследования в этом направлении проводятся Шормом с сотрудниками). [c.528]

Первым белком, полученным в кристаллическом состоянии, стал яичный альбумин. В 1925 г.,Абель осуществил кристаллизацию инсулина, а 10 годами позднее Зумнер описал кристаллизацию уреазы. Вирус табачной мозаики получен в кристаллическом состоянии в 1935 г. [c.343]

Белки, полученные с помощью различных методов разделения и очистки, считаются чистыми, если нх гомогенность доказьгвается появлением только одной белковой полосы, например, при диск-электрофорезе или характерной диффузионной константой или константой седиментации при ультрацентрнфугировании. [c.354]

Параллельно технологическим приемам филирования и варки-экструзии были разработаны многие другие методы [40]. Целью поисковых работ при этом были упрощение применяемых технологических приемов, снижение капитальных и эксплуатационных затрат, сохранение питательных и функциональных свойств белка, получение новых структур пищевых продуктов. Эти процессы можно разделить на три большие группы в соответствии с применяемыми методами. [c.556]

После проведения гидролиза белка полученную смесь аминокислот необходимо разделить и количественно проанализировать. Метод газо-жидкостной хроматографии привлекает своей быстротой и чувствительностью, в особенности метод хромато-масс-спек-трометрии [10]. Разумеется, необходимо перевести свободные аминокислоты в более летучие для ГЖХ производные и в этом состоит трудность. Большинство известных методов включает две реакции образование сложного эфира по карбоксильной группе и ацилирование аминогруппы. Крайне важно, чтобы обе реакции протекали практически нацело, а образовавшиеся производные можно быЛ о бы разделить. Несколько сотен опубликованных за последние 25 лет работ свидетельствуют о трудностях, которые при этом возникают. Карбоксильную группу обычно переводят в сложноэфирную, используя простые радикалы от метила до пентила, в то время как для защиты амино- или иминогруппы популярны iV-трифтораце-тильная и JV-гептафтормасляная группы, так как они позволяют проводить ГЖХ-анализ с высокой чувствительностью при использовании детектора электронного захвата. Трудности связаны с ацилированием гуанидиновой группировки аргинина и термолабильностью производных цистеина из-за реакций -элиминации. Обсуждаемая техника и соответствующая литература коротко изложены в обзоре [11]. [c.260]

Первые рентгенограммы белков, полученные еще в 30-х годах У. Астбю-ри, а затем Л. Полингом и Р. Кори, позволили установить наличие в белках наряду с линейной полипептидной цепью участков, определенным образом скрученных. [c.60]

В 1951 г. Фолч-Пи, экстрагируя миелин из мозга смесью хлороформ— метанол (2 1), выделил белковую фракцию [16]. С этого времени белки, полученные таким способом, обычно классифицирзтотся как протеолипиды. Вопреки ожиданию бе- -ок, полученный по способу Фолч-Пи и содержащий 2—3% ковалентно связанных липидов, оказался гетерогенным. Кроме основной фракции протеолипидов с М 23 500 были охарактери- [c.101]

Приходится удовлетвориться продуктом транскрипции — кДНК. Его можно продуцировать в больших количествах при росте клона и секвенировать по методу Максама — Гилберта или по методу Сенгера. Из нуклеотидной последовательности можно вывести аминокислотную последовательность. Конечно, первичная структура искомого белка, полученная таким путем, [c.370]

К числу актуальных проблем современности относите химический синтез белка. Получение синтетическим п> тем аналогов природных пептидов и белков призвано способствс вать решению таких вопросов, как выяснение механизма дейст ВИЯ этих соединений в клетке, установление взаимосвязи и активности с пространственным строением, создание новых лс карственных средств, а также позволяет подойти к моделирова нию процессов, протекающих в организме. [c.314]

Чтобы создавать рекомбинантные ДНК, несущие желаемый ген, необходимо прежде всего располагать этим геном. Для этого используют три основных способа. Во-первых, если известна первичная структура белка, получение которого желательно осуществить методами генетической инженерии, можно, основываясь на генетическом коде, построить нуклеотидную последовательность, программирующую этот белок, и осуществить химико-ферментативный синтез гена. Так, например, были осуществлены синтезы нескольких генов, кодирующих различные интерфероны. Во-вторых, можно выделить из тканей, в которых происходит экспрессия гена, информационные РНК, среди которых должна присутствовать и мРНК, кодирующая необходимый белок, провести с помощью обратной транскриптазы синтез комплементарной ДНК (сокращенно кДНК) и перевести ее в двунитевую структуру с помощью Д П<-полимеразы. Можно, наконец, вырезать желаемый ген непосредственно из ДНК того объекта, бело которого собираются продуцировать. Два последних подхода не дают сразу же индивидуального гена и требуют предварительного отбора из сложной смеси кДИК или фрагментов хромосомной ДНК. Эта проблема решается уяЛ на уровне илстои микроорганизмов, в которые введены новые наследственные программы, и пути ее решения будут изложены несколько ниже. [c.301]

Полипептидное строение белков. 1. Основным результатом исследования строения белков, полученным еш е пионерами этих исследований (Ф. Хофмейстером и одновременно Э. Фишером, 1902 г.), является то, что молекулы белков построены из длинных полипептидных цепей, в которых остатки а-аминокислот связаны друг с другом амидными связями СО—НН [c.424]

Это — весьма загадочный факт, и пока еш е не известно, почему живые организмы построены из остатков 1-, а не -молекул аминокислот. Все изученные белки, полученные из животных и растительных организмов, как из высших, так и из самых простых — бактерий, плесени и даже вирусов — состоят, как установлено, из /-аминокислот. Право- и левовраш ающие молекулы имеют совершенно одинаковые свойства, поскольку это касается их взаимодействия с обычными веш ествами, но они различаются в том слз чае, когда взаимодействуют с другими право- и левовраш,ающими молекулами. [c.486]

Для определения содержания белка в растворах широко используются фотометрические методы анализа [1, 2]. В ряде случаев возможно определение белка по собственному поглощению при длинах волн 220 и 280 нм [1]. Более селективным является фотометриро вание окрашенных комплексов белка, полученных по различным реакциям ксантопротеиновой, биуретовой и реакции Лоури [2, 3]. Среди них наиболее специфичной и чувствительной является реакция Лоури, в которой белок вступает во взаимодействие с реактивом Фолина [4] в сочетании с биуретовой реакцией. Именно сочетание этих двух фотометрических реа1кций (реакция на пептидные связи и на обязательные ароматические аминокислоты белка) делает метод высокочувствительным и избирательным, т. е. позволяет его использовать для определения белка в сложных смесях. По данным [5], метод Лоури чувствительнее метода, основанного на биуретовой реакции, в 100 раз, а в сравнении с методом определения по собственному поглощению — в 10—20 раз. [c.37]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология