Эдестин, гидролиз

Многие белки значительно легче гидролизуются протеолитическими ферментами в том случае, когда они находятся в денатурированном, а не в природном состоянии. Так, природный гемоглобин быка не переваривается трипсином, но гладко гидролизуется после денатурации. С другой стороны, эдестин конопли одинаково легко переваривается трипсином как в природном, так и в денатурированном состоянии. [c.440]

Метод, а) Гидролиз. 50 г белка (эдестин) гидролизуют 500 мл 20% H I в течение 30 час., пока отношение общего азота к аминному азоту не достигнет максимума. Избыток кислоты удаляют повторной концентрацией раствора в вакууме. Остаток разбавляют до 2 л и прибавляют суспензию влажной AgaO до тех пор, пока проба Косселя (коричневый осадок при добавлении Ва(ОН)г) не сделается положительной. Реакцию поддерживают все время сильно кислой, прибавляя от времени до времени серную кислоту. Осадок Ag l удаляют центрифугированием и тщательно промывают горячей водой. Фильтрат концентрируют в вакууме до 2 л. [c.19]

Об интенсивности протеолиза можно судить по количеству исчезнувшего субстрата или по количеству продуктов гидролиза. Для определения протеолитической активности ферментов в качестве белкового субстрата используют препараты эдестина, яичного альбумина, желатина, казеина и др. Вытяжку готовят, настаивая исследуемый материал на воде, водном растворе глицерина, а также на слабокислом или слабош,елочном буферных растворах. Иногда настаивание бывает довольно продолжительным. В отдельных случаях при настаивании материала с водой применяют активаторы, например цистеин, HaS, цианид и др. Такое же активирование применяют и в опытах по автолизу. При определении активности протеаз учитывают, что в вытяжках могут быть активаторы и парализаторы. [c.69]

Для частичного гидролиза белков можно использовать также ферменты. Этим способом из эдестина и глиадина можно получить соответственно аспарагин [9] и глутамин [10]. При обычном полном гидролизе оба указанных амида гидролизуются с образованием аспарагиновой и глутаминовой кислот и аммиака. Поскольку отдельные протеолитические ферменты гидролизуют [c.24]

Оба рассмотренных эффекта являются во всех случаях до-вольно слабыми, и. вряд ли можно> ожидать, что они могут быть Практически использованы. Влияние, оказываемое гидроксиль-ньши группами а лабильность пептидных связей серима и треонина, является, напротив, гораздо более заметным оно было подробно исследовано [215] с помощью окисления периодной кислотой и методом ДНФ-производных. Последний метод, разработанный [вначале для изучения ативных белковых молекул, в равной степени применим к исследованию продуктов химического и ферментативного гидролиза. В Юн. НС1 при температуре 30° показатель специфичности для каждого типа связи приблизительно равен 10. Однако в случае эдестина предварительная обработка безводной H2SO4 повышает эту цифру до 70 [445]. [c.178]

Еще более трудным может оказаться выяснение структуры прочих белков. Учитывая возможное присутствие циклопептидов в белках [30], можно полагать, что потребуется разработка новых методов, с помощью которых можно будет осуществлять селективный гидролиз (разрыв) пептидной цепи или цикла. Такие процессы, повидимому, происходят при образовании плакальбумина из яичного альбумина (см. статью IV). Важное значение имеет также работа Партриджа и Девиса 116]. Авторы нашли, что при нагревании белков (например, инсулина, эдестина, яичного альбумина, желатины, овомукоида и овомуцина) с водным раствором уксусной или щавелевой кислот при 100° происходит первичный гидролиз с отщеплением одной лишь аспарагиновой кислоты. [c.256]

Для гидролиза белков в мягких условиях было предложено использование твердой ионообменной смолы в присутствии очень разбавленной кислоты. Однако Паульсон и Дитередж [7] обнаружили, что после обработки сывороточного альбумина быка и эдестина пятикратным (по весу) количеством смолы, содержащей группировки сульфоновых кислот (дауэкс-50), и 50—100-кратным количеством 0,05 н. соляной кислоты при 100° остаются значительные количества пептидов, даже если нагревание продолжалось 100 час. Относительные скорости освобождения различных типов аминокислот были сравнимы с величинами, наблюдаемыми при гидролизе более концентрированной соляной кислотой. Однако реакция, особенно на последних стадиях, идет слишком медленно, чтобы гидролиз с дауэксом-50 стал удобным методом получения полных белковых гидролизатов. Эта методика может быть эффективной для более легко гидролизуемых соединений и была использована при определении гексозаминов [8]. [c.122]

Рис [401 определил избыточный аммиак , образующийся при обработке различных белков кипящей 6 н. соляной кислотой в течение 24 час, вычитая количество амидного азота из общего количества аммиака, выделяющегося в отих условиях. Для эдестина и глобина лошади этот избыточный аммиак лишь немного больше величины, ожидаемой в результате раз-лон еиия серина и треонина, причем неучитываемый избыток составляет всего 0,04% общего белкового азота. Этот факт еще раз подтверждает устойчивость основных аминокислот к кислотному гидролизу. В случае инсулина неучитываемый избыток составил 0,5% общего азота, что, возможно, вызвано разложением тирозина, которого много в инсулине. Некоторые другие белки дают избыточный аммиак порядка 0,3%, и это позволяет предположить, что некоторые типы аминокислотных остатков, в том числе серии и треонин, могут быть более склонны к разложению, находясь в пептидно цепи, чем в свободном состоянии. Далее, некоторые виды связей могут делать остаток аминокислоты более уязвимым, чем другие так, например, остатки серина, несущие фосфоэфирные группы, могут быть особенно склонны к разложению [49]. Избыточный аммиак , освобождающийся при гидролизе горячей соляной кислотой, является в некоторой степени меро 1 деструкции аминокислот за счет взаимодействия с углеводами и продуктами их разложения. Следует принимать во внимание также аммиак, образующийся при разложении сиаловых кислот и гексозаминов (см. гл. 6 и 7). [c.129]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология