Белки сыворотки. Способы определения

Фракционирование белков высаливанием не свободно от недостатков. Оно не дает достаточно четкого разде тения индивидуальных компонентов смеси. Концентрации солей, осаждающие ту или иную фракцию белков нормальной сыворотки, могут отличаться от концентраций, необходимых для фракционирования сывороток, содержащих патологические белки и т. д. Несмотря на это, до сих пор высаливание широко используется в клинических лабораториях для разделения глобулинов и альбумина, так как этот прием является относительно простым и быстрым способом определения альбумин-глобулинового коэффициента (А/Г-коэффициент). [c.8]

Для определения белков сыворотки крови можно пользоваться несколькими методами, из которых наиболее совершенен метод электрофореза. Однако он требует наличия очень дорогих приборов значительным упрощением явился бумажный электрофорез, подробно описанный на стр. 111. Если есть возможность, следует им и пользоваться. Наиболее быстрым методом суммарного определения белков сыворотки является рефрактометрический метод, требующий к тому же очень мало материала для исследования. Он тоже описан на стр. 100. Но наиболее широко распространен в настоящее время колориметрический способ по Вольфсон, Кон, Калвери, и Ишиба. Предложившие его авторы указывали, что полученные этим способом данные совпадают с получаемыми электрофоретически. Последнее время появились указания, что это не совсем верно, однако, предложенный этими авторами способ, позволяющий быстро разделить белки сыворотки на 4 основных компонента, все же является чрезвычайно ценным и вполне заслуживает то широкое распространение, которое он получил. [c.159]

Белки сыворотки. Способы определения [c.159]

Петровых Б. А. Простой колориметрический способ определения содержания белка в сыворотке крови [при различных заболеваниях]. Клинич. медицина, 1943, 21, № 6, с. 74—75. 7916 [c.299]

Метод агглютинации используется также для изучения растворимых антигенов. Они связываются химическим путем с эритроцитами или частицами латекса, образуя таким образом частицы, называемые сенсибилизированными. Антитела противо-растворимых антигенов, добавляемые в суспензию таких частиц, косвенным образом провоцируют агглютинацию сенсибилизированных частиц. Этот способ называется пассивной, или косвенной, агглютинацией [9, 72, 109]. Принцип его схематически представлен на рисунке 4.3. Указанная методика позволяет также использовать антитела вместо антигенов для получения сенсибилизированных частиц. Применение моноспецифических антител позволяет в первую очередь количественно определять содержание отдельного белка в смеси белков. Если антисыворотка не является строго специфичной, то для определения количества содержащегося белка необходимо, чтобы используемые для сенсибилизации частиц антигены были очищены от примесей, которые могут реагировать с неспецифическими антителами в сыворотке. [c.98]

В классическом методе иммуноэлектрофореза в агаровом геле сочетание электрофореза с иммунодиффузией дает большое увеличение числа различаемых компонентов, хотя степень разрешения электрофореза при этом не повышается. В сыворотке человека таким путем можно обнаружить 20—30 компонентов в зависимости от качества применяемой антисыворотки. Линии преципитации соответствуют индивидуальным белкам, а не группам белков с одинаковой подвижностью. Обычно иммуноэлектрофорез рассматривают как источник качественной информации о белковом составе сыворотки. И действительно, он служит наиболее эффективным способом обнаружения недостаточности того или иного белка и изучения свойств моноклональных иммуноглобулинов. Описан также полуколичественный метод определения белкового состава сыворотки с применением иммуноэлектрофореза [8, 80]. Более удачным решением пробле- [c.335]

Козловский В. С. Упрощенный колориметрический способ определения протеолити-ческой силы ферментов желудочного сока. Сов. медицина, 1949, № 8, с, 32, 7400. Козловский В. с. и Латыш А. П. Колориметрический способ определения общего белка в сыворотке крови, основанный на реакции Мульдера. Врачеб. дело, 1949, № 6, стб. 491-494. 7401 [c.281]

Если определяется растворимый в кислотах или неорганический фосфор в цельной крови или в эритроцитах, то нужно осадить белки без предварительного лакирования кислым осадителем (20%-ная трихлоруксусная кислота), чтобы избегнуть гидролиза органических эфиров фосфорной кислоты. При определении неорганических фосфатов в фильтрате нужно по той же причине избегать нагревания и работать возможно быстро. Поэтому при определении неорганического фосфора в цельной крови или эритроцитах хороший для сыворотки способ Бенедикта менее подходит, чем колориметрический метод Бриггса, не требуюший нагревания. [c.279]

Так как при прибавлении пирогаллола к реакционным смесям, содержащим сыворотки, образуются осадки белка, мешающие в дальнейшем определению пурпурогалина, то способ определения последнего был несколько видоизменен по сравнению с прежде употреблявшейся методикой. [c.567]

Наиболее простой способ исследования растворимых антигенов в реакции преципитации заключается в том, что исследуемый раствор смешивают со специфической иммунной сывороткой, а затем наблюдают образование преципитата. Эта реакция применяется главным образом для определения титров. Только в том случае, когда реакция ставится с иммунной сывороткой, специфичной к данному белку, величина титра может служить характеристикой белкового препарата. Действительно широкое применение имму-нохимического подхода к анализу белков началось только после того, как появились иммунодиффузионные методы исследования. [c.18]

Поскольку каскад комплемента действует как усилитель (см. разд. 17.5.1), может вызывать воспаление и приводить к разрушению клеток, необходимо, чтобы ключевые активные компоненты инактивировались вскоре после нх появления. Инактивация достигается по меньшей мере двумя способами. Во-первых, специфические белки-ингибиторы, содержащиеся в кро№, останавливают каскад путем связывания нли расщепления определенных компонентов, стоит нм только активироваться в результате протеолиза. Например, некоторые белки-ингибиторы присоединяются к активированным копонентам комплекса С1 и блокируют нх действие, в то время как другие расщепляют и тем самым инактивируют СЗЬ. Без этих ингибиторов весь СЗ, имеющийся в сыворотке крови, мог бы быть израсходован из-за наличия положительной обратной связи в цепи реакций альтернативного пути. [c.49]

Обычно начинают с определения общего азота, т. е. всей суммы азота, содержащегося во всех азотистых веществах. Затем в другой порции сыворотки тем или иным способом осаждают белки. В безбелковомфиль-трате вновь определяют азот, содержащийся в небелковых азотистых веществах. В отличие от общего азота этот азот называют остаточным азотом , т. е. азотом веществ, оставшихся в растворе после осаждения белков. [c.166]

Полипептиды. Часть полипептидов поступает в кровь из кишечника при переваривании белков (стр. 328) другая часть является промежуточными продуктами распада белков тканей. Определение полипептидов, как и аминокислот, в плазме или сыворотке производится после удаления белков. Освобождение плазмы или сыворотки от белков достигается осаждением их трихлоруксусной кислотой, фосфорновольфрамовой кислотой и др. (стр. 23). В зависимости от способа удаления белков получаются различные числа, характеризующие содернсанпе полипептидов в плазме или сыворотке. Обычное содержание азота полипептидов составляет в норме от 0,1 до 3 мг%. [c.479]

Высапивание белков. Осажденные солями щелочноземельных металлов белки не подвергаются глубоким изменениям и могут быть вновь растворены, если соли удалить методом диализа. Такой способ разделения белков называют высаливанием. Чаще всего для высаливания используют сернокислый аммоний (NH4)2S04- При полуна-сыщении (N114)2804 выпадают в осадок глобулины сыворотки крови, 100% насыщение приводит к осаждению альбуминов. Определение глобулин-альбуминового коэффициента, имеющего значение для Диагностики воспалительных процессов и поражений печени (абсолютное или относительное увеличение глобулинов), используют в клинико-биохимических лабораториях. [c.23]

Принцип метода. Для определения легкорастворимых -соединений кремния в сыворотке крови за основу взят способ Кинга (King), основанный на осаждении белков трихлоруксусной кислотой, разрушении избытка ее кипячением раствора и определении кремния в виде восстановленного кремнемолибденового комплекса. [c.158]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология