Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Иммунизация без адъювантов

    Схема иммунизации. Для получения антисывороток к мышиным IgG животным внутримышечно (в бедро) и подкожно (в области живота) в нескольких точках вводят 2 мл эмульсии из растворенного в физиологическом растворе IgG (1 мг/мл) и 1 мл адъюванта Фрейнда. Через месяц иммунизацию повторяют, вводя 500 мкг lgG в виде эмульсии с равным объемом адъюванта Фрейнда. Затем каждую вторую неделю в течение 6—8 нед вводят по 200 мкг IgG с адъювантом. Через 2 нед после последней иммунизации из краевой вены уха берут пробы крови и определяют титры антител методом иммуноферментно- [c.307]


    СХЕМЫ ИММУНИЗАЦИИ БЕЗ АДЪЮВАНТА [c.116]

    СХЕМЫ ИММУНИЗАЦИИ С АДЪЮВАНТАМИ [c.118]

    В продаже имеются готовые препараты полного и неполного адъюванта Фрейнда. Весьма хорошо себя зарекомендовала следующая схема иммунизации белковыми антигенами. 0,1—1,0 мг антигена растворяют в 0,25—0,5 мл физиологического раствора хлористого натрия и гомогенизируют с равным объемом полного адъюванта Фрейнда. Эмульсию вводят внутримышечно в четыре места. Спустя 3—4 нед у животного берут кровь и определяют активность антисыворотки в иммуноэлектрофорезе. При необходимости эту процедуру повторяют. Если через 2—3 нед после повторной имму- [c.118]

    В настоящее время для целей иммунизации широко применяется коммерческий препарат полного адъюванта Фрейнда, в состав которого входят смесь минеральных масел, эмульгатор и [c.150]

    Получение адъювантов для иммунизации [c.64]

    Переносят готовую эмульсию обратно во флакон, а затем в 1—2-мл стеклянные шприцы со смазанными поршнями в объеме, требуемом для одной инъекции. Присоединяют иглу подходящего размера и убеждаются, что она плотно прилегает, поскольку во время инъекции скорее всего потребуется приложить значительное давление. Методика иммунизации с адъювантом подробно описана ниже (разд. 5.1.4). [c.66]

    Подкожные инъекции. До 0,5 мл может быть введено под легко смещаемую кожу области лопаток или боковых отделов туловища с помощью 25-мм иглы № 20. Шерсть в области инъекции выстригают изогнутыми ножницами и протирают кожу спиртом. Таким образом обычно проводят бустерные иммунизации с адъювантами Фрейнда. [c.72]

    Перед иммунизацией смешивают равные объемы раствора антигена и адъюванта Фрейнда (полного или неполного в зависимости от антигена). Смесь готовят в стеклянном флаконе и эмульгируют шприцем, затем охлаждают на льду и эмульгируют повторно. Эмульсию хранят при 4°С. Обычно одной мыши вводят от 10 до 100 мкг антигена, в зависимости от его природы. [c.321]

    Более надежна иммунизация посредством подкожных инъекций. Опубликовано множество прописей, и цитировать их нет смысла. Каждая иммунологическая лаборатория имеет свой опыт и традиции в этом вопросе. При первой инъекции к раствору антигена добавляют равный объем полного адъюванта Фрейнда (см. ниже). [c.106]

    Использование в иммунизации адъюванта снижает возможность появления толерантности, позвол5 ет расширить диапазон вводимого иммуногена от 50 до 200 мкг на одну инъекцию. После введения адъюванта у животных часто образуются гранулемы, которые влияют на самочувствие животных, поэтому в течение иммунизации необходимо тщательно наблюдать за состоянием здоровья животного. В случае ухудшения самочувствия очередную инъекцию пропускают и лишь после выздоровления животного продолжают иммунизацию. [c.151]

    Для реакции преципитации необходимо иметь специфические антисыАоротки достаточно высокого титра. В лабораторных условиях кролик — наиболее удобный продуцент таких антисывороток. Существует два типа схем иммунизации животных-продуцентов 1) иммунизация без введения адъювантов (вещества, стимулирующие образование антител) и 2) иммунизация с адъювантами. [c.116]


    Конкретная схема иммунизации сильно зависит от природы антигена и его иммуногенности. Антигены клеточной поверхности являются сильными иммуногенами, тогда как большинство растворимых белков — слабые иммуногены. В последнем случае необходимо применять различные адъюванты, усиливающие иммунный ответ. Среди адъювантов наибольшее распространение получил полный адъювант Фрейнда (ПАФ). Помимо этого используют введение антигена, преципитироваиного на квасцах, и введение вместе с антигеном убитых клеток Bordetella Pertussis. Обычно антиген вводят неоднократно, что необходимо для развития сильного иммунного ответа, хотя чрезмерная иммунизация [c.100]

    Более редко используются такие способы иммунизации, как введение иммуногепа в подушечки лап или в конъюнктиву глаза, которые вызывают сильные болевые ощущения у животного. Иммунизацию начинают введением животному иммуногена в смеси с полным адъювантом Фрейнда, а для повторных инъекций применяют неполный адъювант Фрейнда. Перед отбором крови за 7— [c.152]

    Иммунизация мышей. 30—50 мкг инсулина растворяют в 0,1 мл 0,15 М раствора Na l, pH 7,4 смешивают с равным объемом адъюванта Фрейнда и вводят мышам внутрибрюшинно. Через 4—5 недель повторно вводят 30 мкг инсулина в неполном адъюванте Фрейнда внутрибрюшинно. За 3—4 дня до слияния вводят 20 мкл инсулина без адъюванта внутрибрюшинно и 10 мкг внутривенно. [c.167]

    Для разных целей требуются сыворотки с различными свойствами, поэтому нельзя разработать единый способ иммунизации животных, который бы гарантировал получение продукта, идеально удовлетворяющего всем требованиям. Тем не менее существуют определенные принципы получения антител, которые могут быть приняты за основные правила . Идеальные антисыворотки получают в определенной степени методом проб и ошибок, поскольку каждый иммуноген отличается от других и процесс образования антител у каждого животного имеет свои особенности. Необходимые свойства антисыворотки — это высокий титр в сочетании с высокой средней авид-ностью, а также специфичность. Первые (на которые оказывают влияние различные адъюванты) зависят от достижения баланса между неограниченной стимуляцией антиген-чувстви-тельных клеток в лимфоидных тканях животных при условии персистирования иммуногена, с одной стороны, и от конкуренции между клетками за лимитированное количество антигена таким образом, чтобы отвечали лишь клетки с наибольшей аффинностью,— с другой. Специфичность же критически зависит от чистоты иммувогена, поскольку даже небольшие примеси могут вызвать непропорционально сильное антителообразование. [c.33]

    Для получения поликлональных антисывороток, используемых в повседневных иммунологических методах исследования, особенно в реакциях преципитации, применяют более крупных животных, в частности лабораторных кроликов. Кроликов можно содержать в клетках, они хорошо размножаются в неволе, выносливы и долго живут. Уход, иммунизация и взятие Крови у этих животных не представляют труда. Полученные от кроликов антисыворотки обладают хорошими преципитиру-ющими свойствами и стабильны при хранении, иммуноглобулиновая фракция легко поддается очистке. Кроме того, такие антисыворотки, обладая высокой авидностью/аффинностью пригодны для использования в чувствительных иммунологических тестах. В течение нескольких месяцев в период максимального ответа можно получить не менее 100 мл антисыворотки и еще 150 мл при аутопсии. Аутбредные кролики отвечают на иммуноген по-разному, поэтому следует использовать для иммунизации несколько животных, протитровать их сыворотки по отдельности, затем смешать отобранные пробы, если требуется максимальное разнообразие антител. Кролики достаточно хорошо отвечают на широкий спектр ммуногенов в сочетании с адъювантом Фрейнда образованием IgG. [c.41]

    Для растворимых антигенов известны разнообразные схемы иммунизации. Например, первую инъекцию 100 мкг антигена, эмульгированного в полном или неполном адъюванте Фрейнда, осуществляют подкожно (в 0,1 мл), а последующие инъекции (оо 100 мкг в PBS объемом 0,5 мл) проводят в/б с интервалом в месяц. Отбирают пробу крови, чтобы убедиться в наличии адекватного титра антител в сыворотке, а затем осуществляют последние инъекции антигена (в/б утром и в/в днем), за 3—4 дня до гибридизации. [c.123]

    Некоторые исследователи предпочитают избегать применения адъюванта Фрейнда. Действительно, он может стимулировать развитие гранулом, клетки которых повышают фоновый рост в культурах после гибридизации. Предпочтительнее использовать адсорбированный на квасцах антиген в смеси с убитыми клетками Bordetella pertussis в качестве адъюванта [9]. Другой способ, который был успешно применен в случае иммуноглобулинов, заключается в связывании антигена с частичками пластика [10] с последующим осуществлением иммунизации в/б, без адъюванта. Относительно небольшие пептиды иногда необходимо конъюгировать с белком-носипелем, но они могут приобрести иммуногенность при введении в полный адъювант Фрейнда. [c.123]

    Эти антисыворотки наиболее полезны для исследований полиморфизма в пределах вида. К сожалению, их получение часто оказывается затруднительным, особенно антисывороток к антигенам МНС. Дело в том, что методики, даюш.ие наилучшие результаты при получении аллоантисывороток, включают предварительную трансплантацию кожи животному, предназначенному для иммунизации. После полного отторжения трансплантата животному делают разрешающие инъекции эритроцитов или лимфоцитов от донора кожи (несколько миллионов клеток на инъекцию для лягушки массой 50—100 г без адъюванта) и берут у него кровь через 2 нед после последней иммунизации. Если титры антител высокие, а специфичность антисыворотки соответствует ожидаемой, то кровь у животных можно брать повторно через 1—2 нед без дополнительных антигенных инъекций. После этого повторными разрешающими инъекциями (например, раз в два месяца) поддерживают образование антител на необходимом уровне. [c.488]


    Полный адъювант Фрейнда (ПАФ) смешивают с равным объемом ap -KLH, разведенным физиологическим раствором (до концентрации 1 мг/мл прн иммунизации кроликов и 0,5 мг/мл при иммунизации кур), с тем чтобы получпть стабильную водно-масляную эмульсию, капля которой плаваетиа поверхности воды, не растекаясь. Оптимальные эмульсин по-лучаются с помощью высокоскоростного электрического гомогенизатора прн этом к ПАФ следует постепенно добавлять раствор ap -KLH. [c.171]

    Взрослым кроликам вводят внутримышечно по 1 мл эмульсии ПАФ, содержащей 500 мкг ap -KLH (по 0,5 мл в каждое-бедро). Иммунизацию повторяют через 2—3 недели. Еще через-10 дней можно взять кровь из уха (от 30 до 50 мл в зависимости от веса кролика). Прн последующих иммунизациях вводят по 200 мкг ap -KLH, эмульгированных в неполном адъюванте Фрейнда. Можно сделать несколько таких введений л каждый раз брать порции Крови нз уха. [c.171]

    Спустя месяц иммунизацию повторяли, вводя 500 мкг ан-тигена в неполном адъюванте Фрейнда. [c.225]

    Ферритин выделяли по модифицированной методике Гранина (Grani k, 1942) и подвергали дополнительной очистке на сефарозе 6В. Каждому кролику вводили по 100 мкг очищенного ферритина, смешанного с равным объемом адъюванта Фрейнда. Через И нед проводили повторную иммунизацию такой же дозой антигена. Спустя еще 8 нед от 5 кроликов брали кровь, из которой получали антисыворотку, используемую для покрытия фильтров антителами. Антитела козы против иммуноглобулинов кролика приобретали у Antibodies, [c.303]

    Некоторые авторы рекомендуют вводить антиген в смеси с адъювантом (подкожно) одновременно в область затылка (0,4 мл) и в обе задние лапы близ ахиллесова сухожилия (по 0,3 мл). В последние годы часто практикуется рассредоточенная подкожная инъекция — одновременно в 20 местах на спине животного. При введении раствора кожу следует слегка оттянуть так, чтобы игла под ней свободно перемещалась. Вводят раствор медленно, кожу смазывают иодом, но шерсть не выстригают— она предохраняет место инъекции от охлаждения, что способствует всасыванию антигена. Иногда, в случае необходимости экономии антигена, используют микровариант иммунизации с введением по 10—50 мкл 5%-ного белкового раствора по приведенной выше схеме в подушечки всех четырех лап кролика. Эту операцию производят с помощью шприца Гамильтона. Она очень болезненна и требует анестезии. В любом варианте иммунизация занимает несколько недель. [c.106]

    Схема, изображенная на рис. 5.5, а, имеет ключевое значение для объяснения принципов построения искусственных антигенов и вакцин и наводит на мысль заранее соединить липкую макромолекулу полимерного адъюванта с антигенным началом, а полученный конъюгат использовать для иммунизации как единое целое. Каких новых свойств и проявлений следует ожидат от конъюгата, построенного из какого-либо естественного антигена и липкой линейной макромолекулы, на основании предложенной схемы Во-первых, иммунный ответ, вызванный конъюгатом, должен быть значительно сильнее иммунного от вета на тот же антиген на фоне того же, но отделенного о него адъюванта. Во-вторых, усиленный иммунный ответ долже быть, по крайней мере частично, Т-независимым. [c.212]

    Аффинность антител к большинству Т-зави-симых антигенов нарастает в ходе иммунного ответа. Ее увеличения можно достичь также особыми способами иммунизации. Например, субпопуляция высокоаффинных антител в сыворотке увеличится, если антиген вводить вместе с ИФу (рис. 9.15). Ряд иммуноадъювантов стимулирует образование антител, но лишь некоторые способны повысить их аффинность. Поскольку от этого свойства зависит эффективность антител, ИФу вполне пригоден для использования в качестве адъюванта в составе вакцин. [c.156]


Смотреть страницы где упоминается термин Иммунизация без адъювантов: [c.309]    [c.181]    [c.38]    [c.37]    [c.38]    [c.38]    [c.40]    [c.487]    [c.44]    [c.287]    [c.330]    [c.213]    [c.319]    [c.319]    [c.107]    [c.145]    [c.147]    [c.148]    [c.214]    [c.218]   
Аминокислоты, пептиды и белки (1976) -- [ c.116 ]




ПОИСК







© 2025 chem21.info Реклама на сайте