Концевые группы белков

Белковая молекула состоит из многих качественно различных остатков аминокислот. Среди них имеется большее или меньшее число дикарбоновых кислот, несущих боковые карбоксильные группы. Эти последние так же, как и концевые группы белка, способны к диссоциации и, следовательно, к дополнительному образованию отрицательных зарядов белка. Если остатков таких аминокислот много и число их преобладает над числом диаминокислот, то мы будем иметь дело с кислым белком, изоэлектрический пункт которого сдвинут в сильнокислую сторону [c.276]

ДНФ-фр акцию, полученную из смесей с известным количеством белка или пептида, хроматографируют вместе с определенным количеством контрольных ДНФ-аминокислот, после чего ДНФ-аминокислоты элюируют из бумаги и определяют их содержание фотометрически по калибровочной кривой, построенной для ДНФ-аминокислот. Таким способом можно определить концевые группы белков и пептидов, число полипептидных цепей белков, минимальный молекулярный вес белков и аминокислотный состав белковых гидролизатов. [c.272]

С-концевые группы белков 10, 272 С.П, [c.378]

Л -концевые группы белков 10, [c.384]

Динитрофторбензол (86 X = Р) из-за его высокой реакционной способности часто используют для связывания ЫНг-группы концевой аминокислоты при анализе концевых групп белка. Присоединившуюся при этом 2,4-динитрофенильную группу очень трудно отщепить она сохраняется даже при последующем гидролизе белка на составляющие его аминокислоты. [c.191]

Динитрофенильные производные аминокислот относительно устойчивы при кислотном гидролизе это свойство и другие особенности этих производных дают возможность использовать их для определения N-концевых групп белков и пептидов. [c.35]

Концевые группы белков и пептиды Полипептиды Белковые аминогруппы Пептиды [c.505]

Анализ концевых групп белков будет рассмотрен очень кратко, так как полное обсуждение этой области выходит за рамки данной главы. Наибольший интерес представляет анализ свободных аминогрупп. Чаще всего используется метод Ван-Слайка, который заключается в обработке белка азотистой кислотой и последующем измерении выделившегося азота [c.371]

Концевые группы в молекулах белков обычно находятся в концевых аминокислотных звеньях полипептидных цепей. Концевая -аминокислота может быть связана с полипептидной цепью карбоксильной группой, а аминогруппа при этом остается свободной такие концевые аминокислоты называют -концевыми. Если концевая а-аминокислота связана с основной цепью аминогруппой, а карбоксильная группа свободна, то ее называют С-концевой аминокислотой. В соответствии с этим химия концевых групп большинства белков подразделяется на две большие области — реакции свободных аминных и карбоксильных групп. Реакции, характерные для этих групп, уже были рассмотрены в предыдущих разделах, посвященных реакциям функциональных групп боковых цепей. В настоящем разделе будут обсуждены реагенты и реакции, которые, как было найдено, наиболее применимы для определения концевых групп белков. [c.374]

Гидролиз ДНФ-белка дает ДНФ-производные тех аминокислот, которые представляли собой Ы-концевые группы белка. Таким образом, в гидролизате ДНФ-инсулина Сенгер обнаружил ДНФ-глицин и ДНФ-фенилаланин, что указывало на наличие двух полипептидных цепей — глициловой и фенилаланиловой. Наиболее серьезный недостаток этого метода заключается в разрушении ДНФ-нроизводных Ы-концевых аминокислот во время кислотного гидролиза. В некоторых случаях для гидролиза ДНФ-белков можно использовать ферменты. Ы-концевой пролин лучше всего определять фенилизотиоцианатным методом (см. стр. 30). [c.29]

Со своей стороны Чибнол и Рис [27] изучали восстановление метилового эфира инсулина, используя боргидр1Щ лития — более мягкий восстанавливающий агент. Оценить получаемые по этому способу результаты оказалось возможно лишь позднее, когда исследователи Кэмбриджской школы опубликовали точные аналитические данные о строении инсулина, полученные в результате многолетних исследований. Сейчас очевидно, что определение при помощи боргидрида концевых групп белков с молекулярным весом свыше [c.196]

Вначале казалось, что металлы атакуют тиоловую SH-rpynny цистеина в белке. Однако удалось снять эффект отравления добавлением свободной аминокислоты гистидина. Гистидин не может конкурировать с сульфгидрильпой группой за ионы ртути поэтому Штейн предположил, что в состав активного центра входит также гистидин — аминокислота, охотно дающая комплексы с металлами. По-видимому, эта догадка правильна. Более того, гистидин, участвующий в активном центре, находится в N-конце полипептидной цепи. Это было доказано следующими обстоятельствами реагенты, атакующие N-концевые группы белков (фтор-динитробензол, фенилизотиоцианат), необратимо ингибируют активный перенос глицерина если в качестве экспериментального материала использовать так называемую строму красных кровяных клеток, т. е. оболочки эритроцитов, остающиеся после их осмотического разрыва (гемолиза), то в веществе оболочек можно обнаружить N-концевой гистидин путем реакции с теми же реаге тами. Важное наблюдение заключалось в том, что в случае предварительного насыщения стромы гликолем (1,3-пропандиолом), когда ферментативные центры были заблокированы, нри реакции с фенилизотиоцианатом концевой гистидин в реакцию не вступал. После отмывания гликоля можно было снова заставить прореагировать гистидин с фенилизотиоцианатом. Эти опыты показывают весьма убедительно, что фермент, действующий в случае активного транспорта глицерина, содержит в своем центре гистидин и притом концевой. Вместе с тем этот опыт подчеркивает трудность, о которой мы уже говорили. В процессах активного переноса все реакции разыгрываются внутри мембраны. И ферменты интегрированы в структуре мембраны. Поэтому так сложно их изучать. Фактически мы еще не знаем с определенностью ни одной из реакций, ведущих к химической диффузии важнейших метаболитов. [c.181]

При анализе концевых групп белка вируса папилломы Шопа, содержащего, возлюжно, один основной белковый компонент, N-концевой аминокислоты обнаружить не удалось, а С-концевая последовательность (Тир, Лей)-Ала-Тре отвечала молекулярному весу 160 000 [2611. [c.86]

Другой метод определения концевых групп белков, предложенный П. Эдманом (1950 г.), включает избирательное отщепление N-концевых аминокислотных остатков. При реакции белка с фенилизотиоцианатом (ФИТЦ) образуется соответствующее фенилтиокарбамильное производное, которое расщепляется под действием НС1 до фенилтиогидантоино- [c.59]

Для вирусов с хорошо установленным элементарным химическим составом (например, ВТМ) такие методы, как определение отношения фосфора к азоту, позволяют обнаруншть примеси, содержащие азот или фосфор, если они присутствуют в значительном количестве. При определенных обстоятельствах могут быть применепы также более сложные химические методы, например анализ концевых групп белков, позволяющий обнаружить всего-навсего одну аминокислоту. Можпо также использовать метод отпечатков пальцев для разделения пептидов триптического гидролизата хорошо охарактеризованных вирусных белков, но чувствительность его как критерия чистоты также невысока. [c.48]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология