Уреаза реагент

Гомогенные катализаторы отличает большая, чем у гетерогенных, селективность или специфичность действия. (Все каталитические центры одинаковы и химически, и энергетически.) Наивысшая селективность присуща биологическим катализаторам. Среди них немало ферментов с абсолютной специфичностью. Так, например, фермент уреаза ускоряет гидролиз мочевины O(NH2)2, и только мочевины. Основной технологический недостаток гомогенных катализаторов — необходимость их вьщеления из конечной смеси продуктов и реагентов с неизбежными потерями катализатора. Поэтому ограниченный промышленный масштаб имеют лишь процессы гомогенного катализа кислотами и основаниями, стоимость которых невелика. [c.176]

В разд. 10.5 уже говорилось, что катализатор повышает скорость реакции (так же, как и скорость обратной реакции), поскольку обладает способностью снижать энергию активации данной реакции. Это достигается благодаря более сильному взаимодействию катализатора с активированным комплексом, являющимся переходным состоянием между молекулами реагентов и молекулами продуктов реакции. В качестве примера рассмотрим гидролиз мочевины, катализируемый ферментом уреазой. Молекула мочевины плоская ее электронную структуру можно представить как гибрид следующих трех структур [c.395]

Слой реагента (уреаза, буфер pH 7,8) Полупроницаемая мембрана [c.158]

Допускают, что только средняя форма способна катализировать реакцию, хотя другие формы также способны взаимодействовать с реагентами. Некоторые ферменты могут катализировать только одну реакцию например, уреаза катализирует только гидролиз мочевины, другие обладают менее выраженной специфичностью. [c.257]

Выполнение реакции. К капле нейтрального или щелочного исследуемого раствора в углублении капельной пластинки или микротигле добавляют несколько миллиграммов уреазы и смесь перемешивают. Спустя 2—5 мин. добавляют каплю реагента Несслера. В зависи.мости от количества мочевины появляется коричневый осадок, помутнение или желтое окрашивание. Если в исследуемом растворе присутствуют аммонийные соли, то каплю высушивают после прибавления капли разбавленной щелочи. Аммонийные соли при этом полностью разлагаются с выделением аммиака и без существенного гидролиза мочевины. Высушенный остаток растворяют в капле воды, к раствору добавляют уреазу и реакцию выполняют, как указано выше. В продаже имеются стойкие препараты уреазы. Приготовление реагента Несслера см. стр. 156. [c.566]

По другому варианту в углублении фарфоровой пластинки к капле исследуемого на присутствие уреазы раствора прибавляют каплю 10%-ного раствора мочевины. Спустя 5—10 мин. аммиак можно обнаружить добавлением капли реагента Несслера (стр. 156). [c.594]

Первыми ферментами полученными в кристаллическом виде, были уреаза (выделенная в 1926 г. Самнером) и пепсин (выделенный Нортропом в 1929 г.). Самнер и Нортроп получали ферменты в кристаллическом состоянии путем высаживания их из растворов сульфатом аммония, спиртом, ацетоном и другими химическими реагентами. В последние годы благодаря использованию новых эффективных методов очистки ферментов (электрофорез, ионообменная хроматография, противоточное распределение, гель-фильтрация) и модернизации уже известных методов их выделения и очистки удалось получить сотни химически однородных кристаллических препаратов ферментов. [c.199]

Винилсульфоны и дивинилсульфоны при комнатной температуре легко реагируют с меркаптогруппами шерсти в восстановленной форме [165, 166] и уреазы [165] в водном растворе при pH 8,7. В одной из ранее опубликованных работ [167] сообщалось об аналогичной реакции сульфгидрильных групп уреазы. Возможность взаимодействия других функциональных групп белков с этими реагентами не исследовалась, хотя известно, что гидроксильные или аминосоединения также реагируют с непредельными сульфонами, но значительно медленнее [168, 169]. [c.367]

Для создания тест-систем удобны не нативные (в свободном состоянии), а иммобилизованные ферменты, притом наиболее устойчивые и относительно недорогие (хотя ферменты практически всегда дороже обычных химических реагентов). Известно применение пероксидазы, глюкозоксидазы, уреазы, холинэстеразы, моноаминоок-сидазы, алкогольоксидазы, лактатдегидрогеназы, липазы, эстеразы, диафоразы, каталазы, дегидрогеназы. [c.217]

В последнее время теория активирующих групп получила подтверждение в результате того, что была доказана активирующая природа сульфгидрильных групп некоторых протеоли-тических и подобных им ферментов (папаин, катепсин, уреаза, аргиназа) [13—18]. Опытами с папаином Берзиным было доказано, что все реагенты, способные окислять тиоловые соединения до дисульфидов, являются по отношению к ферменту тормозящими веществами. Такие восстановители, как SH-глутатион, [c.125]

Перед аэрацией все пробирки соединяют в надлежащей последовательности. Удаляют пробку реакционной пробирки и добавляют 1 мл специального реагента (5—10 г парафина с т. пл. 52—54° растворяют в 100 жл толуола) для уменьшения пенообразования. При аэрации проб, содержащих аммиак или обработанных уреазой (1-й и 2-й случай), добавляют 3—5 мл насыщенного раствора карбоната калия. При аэрации раствора после кьельдализации (3-й случай) добавляют 3—5 мл насыщенного раствора гидроокиси натрия в зависимости от количества взятой кислоты. Щелочь вводят по стенке пробирки так, чтобы на дне образовались два четко разделенных слоя. Перед добавлением щелочи в пробирку в приемник помещают 10 мл 0,01 н. серной кислоты. Реакционную пробирку снова плотно закрывают пробкой и систему соединяют с водяным насосом. В течение первой минуты ток воздуха пропускают с небольшой скоростью, затем скорость постепенно увеличивают в течение следующих 2 мин. С этого времени в течение последующих 30 мин ток воздуха пропускают при максимально допустимой безопасной скорости. Время, необходимое для аэрации, зависит от типа насоса, и для применяемой аппаратуры его надо установить путем проведения контрольных опытов, проверяя полноту извлечения азота через определенные промежутки времени. После удаления всего аммиака скорость тока воздуха уменьшают и пробирки отъединяют, начиная с той, которая расположена дальше от насоса. Если сразу отсоединить насос, то жидкость может быть втянута обратно в систему, особенно когда несколько пар пробирок [c.78]

Реагенты. 1) Раствор уреазы. Оставляют на несколько мииут 10%-ную кашицу из соевой муки в воде. Отстоявшийся раствор используют в качестве раствора уреазы. Кашица может. храниться в холодильнике в течение нелели, ие теряя активности. [c.678]

Указанные недостатки могут быть в значительной мере устранены переходом к водорастворимым полимерным производным белков или сшитым белкам [1—3]. Конъюгаты, содержащие белки, имеют большие размеры молекул, чем исходные белки, и дольше циркулируют в кровяном русле. Рыхлая полимерная оболочка, окружающая белковую глобулу, в определенной степени экранирует ее от воздействия среды организма. В результате снижается токсичность, антигенность и взаимодействие с высокомолекулярными ингибиторами. Внутримолекулярное сшивание белковой глобулы полимерами или бифункциональными реагентами способствует ее стабилизации. Особенно велика роль полимерных производных белков в регулировании иммунологических процессов (создание искусственных вакцин). В тех случаях, когда требуется только местное воздействие белка (например, тромболитического фермента), целесообразно применять не циркулирующие, а постепенно растворяющиеся полимерные производные ферментов (см. гл. 6). Ферменты, действующие на растворенные в плазме субстраты (например, уреаза) могут быть использованы экстракорпорально. Применение полимерных производных гемоглобина как переносчиков кислорода описано в гл. 7. [c.159]

Реагенты. Использовали уреазу соевых бобов производства НПО Биолар (Олайне, Латвия), которая имела активность 1032 ед. Самнера на 1 г и содержала 6 субъединиц с молекулярной массой [c.123]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология