Тимидин фосфат синтез

Эти эфиры неустойчивы к действию щелочи, вероятно, вследствие элиминирования акрилонитрила и сравнительно устойчивы к кислоте. Моноэфир был с успехом применен для синтеза тимидин-3 -фосфата и гуанозин-5 -фосфата [444]. [c.250]

Использование дихлорфосфитов — одно из последних достижений практического полинуклеотидного синтеза [40, 41]. При этом применяется активированный фосфорилирующий агент и, таким образом, отпадает необходимость в конденсирующем агенте. Однако в качестве фосфорилирующего агента выступает ие фосфат, а фосфит, повышенная реакционная способность которого делает возможным одностадийное превращение in situ нуклеозида O свободной З -гидроксильной группой в фосфомоноэфпр, а затем в фосфодиэфир путем взаимодействия со свободной 5 -гид-роксильной группой второго нуклеозида, и наконец образуется фосфат в результате быстро протекающего окисления иодом. Реакционная способность хлорфосфита так велика, что обе реакции фосфорилирования проводят при пониженной температуре. Вся последовательность операций занимает меньше одного дня (а время имеет большое значение при синтезе длинных полинуклеотидов). Ниже приведена схема одностадийного синтеза защищенного тимидилил- (3 50-тимидина. о [c.178]

Синтез всех четырех теоретически возможных простых нуклеотидов, являющихся производными дезоксицитидина и тимидина, был осуществлен фосфорилированием соответствующим образом защищенных нуклеозидных производных с последующим удалением защищающих групп [464]. Дезокси-цитидин-5 -фосфат и тимидин-5 -фосфат были выделены из энзиматических гидролизатов дезоксирибонуклеиновых кислот [465] 3, 5 -дифосфаты дезоксицитидина и тимидина были обнаружены в кислых гидролизатах и идентифицированы с помощью синтеза [466]. В этих гидролизатах был также найден 3, 5 -дифосфат 5-метилдезоксицитидина [466] Уид и Куртней [467] обнаружили 3, 5 -дифосфат 5-оксиметилдезоксицитидина в кислых гидролизатах нуклеиновой кислоты, полученной из бактериофага. [c.258]

При ступенчатом синтезе олигонуклеотидов фосфодиэфирным методом в качестве нуклеотидного компонента обычно применяют производные нуклеозид-5 -фосфатов. Так, тимидилил-(3 - 5 )-тимидин был получен взаимодействием 3 -0-ацетилтимидин-5 -фос-фата ЬХХХП и 5 -0-тритилтимидина в присутствии дициклогексилкарбодиимида (стр. 90). [c.89]

Ключевым моментом в идентификации места фосфорилирова-ния в дезоксирибонуклеотидах было использование региоселектив-ности реакции трифенилметилхлорида (тритилхлорида) с первичными (в большей степени, чем со вторичными) гидроксильными группами. Этот факт был положен в основу специального синтеза дезокситимидин-З -фосфата (18) и -5 -фосфата (19) из дезокси-тимидина схема (4) [20). Было подтверждено, что 5 -фосфат (19) идентичен мононуклеотиду, полученному Танхаузером [14). [c.38]

В первом исследовании, посвященном полимеризации тимидин-5 -фосфата , была сделана попытка применить в качестве конденсирующего агента хлорангидрид -толуолсульфокислоты. По сравнению с синтезом при участии дициклогексилкарбодиимида применение хлорангидрида л-толуолсульфокислоты, по-видимому, вызывает меньшую степень полимеризации. Кроме того, при изучении УФ-спектров был обнаружен ряд новых веществ, представляющих собой, как предполагают, полинуклеотиды, в которых концевые [c.508]

Изучение синтеза пантотеин-2, 4 -циклофосфата из пантолак-тон-2-дифенилфосфата показывает, что при переэтерификации происходит образование шестичленной циклической системы. Аналогичные циклические фосфаты были идентифицированы в качестве промежуточных соединений при гидролизе эфиров дезоксинуклео-зид-3 -фосфатов и, вероятно, могут образовываться в случае рибо-нуклеозидных производных, в которых удобно расположенная 2 -гидроксильная группа блокирована. Так, ш,елочной гидролиз тимидин-З -п-нитрофенилфосфата, идуший через 3, 5 -циклофосфат, образующийся в результате трансфосфорилирования, дает смесь тимидин-3 - и тимидин-5 -фосфатов [166]. [c.179]

Как и в случае адениновых нуклеотидов, широкое распространение имеют 5 -фосфаты, 5 -пирофосфаты и 5 -трифосфаты цитидина, гуанозина и уридина [13—16]. Они являются промежуточными соединениями при биосинтезе рибонуклеиновых кислот. Трифос-фаты участвуют также в биосинтезе ряда диэтерифицированных пирофосфатных производных кроме того, они заменяют АТФ в качестве фосфорилирующего агента или кофермента в некоторых ферментативных реакциях [17—21]. Полифосфаты дезоксинуклеозидов также выделены [22—25], и снова, помимо функции непосредственных предшественников дезоксинуклеиновой кислоты, второй нх главной функцией является, вероятно, участие в биосинтезе промежуточных соединений, таких, как тимидин-5 -пирофосфат-глюкоза и дезоксицитидин-5 -пирофосфатхолин. Строение всех этих нуклеозидполифосфатов установлено методами, аналогичными примененным для определения строения АТФ, и подтверждено синтезом. [c.189]

Из Strepto o us fae alis, выращенного на D-галактозе, выделена тимидиндифосфогалактоза синтез осуществляется под действием индуцированной пирофосфорилазы из тимидин-5 -трифосфата и гала-ктозо-1-фосфата [467]. В присутствии соответствующей эпимеразы этот ангидрид находится в равновесии с ТДФ-глюкозой [467, 468]. [c.222]

Хотя первые удачные попытки и продемонстрировали возможность синтеза олигонуклеотидов, были очевидны значительные трудности в проведении таких синтезов и необходимость разработки более простых и более эффективных методов. Ранние исследования показали, что при обработке пиридиниевой соли уридин-5 -фосфата в диметилформамиде большим избытком дициклогексилкарбодиимида образуются вещества, имеющие, вероятно, более высокий молекулярный вес, чем ожидавшийся динуклеозидпирофосфат 9]. В дальнейшем обнаружили, что реакция тимидин-5 -фосфата либо с л-толуолсульфохлоридом, либо оТучше с дициклогексилкарбодиимидом в безводном пиридине приводит к ряду полимерных [c.477]

Значительно больший успех достигнут при использовании этого метода в ступенчатом синтезе низших олигодезоксинуклеотидов, для чего используются подходящим образом защищенные нуклеотидные и нуклеозидные производные [19]. Таким образом обработка смеси тимидин-5 -фосфата в присутствии избытка 5 -0-тритилтимндина п-толуолсульфохлоридом с последующим кислотным гидролизом для удаления тритильной группы приводит к образованию смеси тимидилил-5 З -тимидина и других продуктов, возникающих в результате полимеризации незащищенных нуклеотидов. [c.484]

Б и с-(га-н II т р о ф е н и л)-х лорфосфат. Как уже отмечалось, синтезы нуклеотидов включают фосфорилирование предварительно полученных нуклеозидов. Встречаются, однако, случаи, когда для синтеза нуклеозидов требуется много стадий или когда требуется получить ряд аналогичных нуклеотидов, отличающихся только входящим в их состав основанием. Новый путь, позволяющий упростить методику проведения реакций, заключается в предварительном ириготовлении фосфорилироваиной альдозы и конденсации полученного продукта с различными пиримидиновыми и пуриновыми основаниями. По этому новому методу были осуществлены" синтезы аденозин-5 -, тимидин-5 - и 1-(Р-Р-глюкопиранозил)-тимин-б -фосфатов, причем последнее соединение представляет собой новый искусственный нуклеотид. Стадия собственно фосфори- [c.490]

Была также изучена возможность применения метода с участием дициклогексилкарбодиимида и для синтеза некоторых высших полинуклеотидов. В первых работах были достигнуты удовлетворительные результаты при получении олигонуклеотидов, содержащих три-четыре мононуклеотидные единицы. Так, например, по реакции между тимидилил-(3 5 )-тимидином, защищенным соответствующим образом (полностью защищенный динуклеотид, каким он получается в результате первой стадии синтеза, подвергают мягкому щелочному гидролизу, причем происходит отщеиление только ацетильной, но не тритильной группы), и 3 -0-ацетилтимидин-5 -фосфатом [c.505]

Пирофосфатным методом с выходом до 95% были получены [24, 25, 28—33] аминокислотные (пептидные) производные различных рибо- и дезоксирибонуклеозид-5 -фосфатов, а также тимидин-З -фосфата (см. табл. 3). При синтезе соответствующих производных серина в реакцию вводился метиловый эфир серина [30]. Так как аминогруппа серина является более сильной нуклеофильной группой, чем оксигруппа, основным продуктом реакции является эфир нуклеотидо-(Р- К)-серина. Этим методом можно получать [30] также 0-нуклеотидилоксиаминокислоты. Для этого используется эфир Ы-кбз-оксиаминокислоты и к реакционной смеси добавляется трибутиламин,- увеличивающий нуклеофильность оксигруппы [c.356]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология