Этидий

Внимание Бромистый этидий ядовит, поэтому все операции [c.175]

Рис. 4.4. Картирование сайтов рестрикции. А. Результаты гель-электрофореза фрагментов ДНК, полученных ее расщеплением указанными ферментами. Очищенную ДНК гидролизовали рестриктазами ЕсоК и ВатШ раздельно, а затем их смесью, проводили гель-электрофорез и визуализировали продукты окращива-нием бромистым этидием. Числа слева от горизонтальных полос -длина фрагментов в парах оснований. Б. Рестрикционная карта, построенная по электрофоретическим данным. Числа - расстояние между сайтами узнавания соответствующих ферментов.

Гель погружают в разбавленный (наиболее подходящая концентрация 0,5 мкг/мл) раствор бромида этидия в воде или электродном буфере на 1 -н 2 ч и следят за окрашиванием в УФ-свете [JMB 98, 583 (1971)]. При определении небольших количеств ДНК может оказаться полезным кратковременное промывание водой. [c.377]

Осторожно. Бромид этидия - сильный мутаген при работе с ним следует соблюдать чрезвычайную осторожность. [c.377]

Окрашивание ДНК бромидом этидия [c.377]

Рис. 9.8. Электрофорез ПЦР-амплифи-цированных фрагментов растительной ДНК в полиакриламидном геле с последующим окращиванием бромистым этидием. Для амплификации фрагментов каждой из двух культур использовали три разных произвольных праймера. В случае праймеров А и В характер распределения полос в полиакриламидном геле для культур 1 и 2 совпадает, если же используется праймер Б, то положение полос различается. Таким образом, с помощью праймера Б можно выявлять различия между культурами 1 и 2.

Бромистый этидий — Производное [c.218]

В связи с тем, что все изотопы данного элемента имеют одинаковые порядковые номера, в обозначении изотопов часто указывают лишь их атомные массы (верхний индекс в структурном символе изотопа). При этом порядковый номер элемента легко может быть установлен по таблице Менделеева. Так, для изотопов кислорода имеем 0 , и О . Порядковый номер Z = 8, одинаковый для всех этид изотопов, считается известным. [c.22]

У2О5 представляет собой ядовитый, без запаха и вкуса, красно-желтый, а при нагревании — красновато-коричневый порошок температура плавления его 800° С. При более высокой температуре он летуч. Теплота кристаллизации УаО по Дитте настолько велика, что при быстро идущем процессе закристаллизовывающийся ангидрид, сильно сжимаясь, снова раскаляется. Ангидрид ванадиевой кислоты в расплавленном состоянии является проводником электрического тока, в твердом он этид- свойством не обладает. При [c.310]

Известно, что этиленимин и ряд его производных обладают цитостатической активностью. Наиболее чувствительными к воздействию ядов являются ткани гематюшоэтичеС ких органов и прежде всего костного мозга. Действие этид веществ сопровождается снижением митотического индекса в грануло- и эритропоэтической системах в результате наруше1ния инициирования митоза. Повреждение продуцирующей активности костного мозга приводит к изменению картины периферической крови. [c.259]

Азеотропная перегонка находит довольно широкое применение в промышленности основного органического синтеза. В качестве примера можно назвать азеотропную сушку не смешивающихся с водой органических растворителей, выделение уксусной кислоты из водных растворов.с добавкой этид-или бутилацетата,-разделение ацетона и метанола с добавкой хлороформа, абсолютирование этилового спирта с добавкой бензола и др. [c.298]

Для интеркаляции со сходным эффектом можно воспользоваться и более привычным красителем — бромистым этидием, в частности для очистки плазмидной сверхскрученной ДНК, подобно тому как это делают методом ультрацентрифугирования в градиенте концентрации раствора s l, но значительно проще и быстрее. В основе обоих методов лежит одно и то же явление — в линейную [c.238]

Очистку плазмидной ДНК от примеси РНК (после осаждения ДНК бактерии-хозяина из просветленного лизата ) можно осуществлять в препаративном варианте на колонке оксиапатита и без участия бромистого этидия, но в присутствии 8 М мочевины, что обеспечивает сохранение однонитевой структуры РНК. Окси-апатит (1 г на 1 л лизата бактерий) суспендировали в 0,2 М Na-фосфатном буфере (pH 6,8) с добавлением до 8 М мочевины и заполняли им широкую колонку. Освобожденный от ДНК хозяина лизат без какой-либо дополнительной очистки разбавляли в соотношении 9 1 0,27 М Na-фосфатным буфером (pH 6,8) с 9 М мочевиной и 0,9% ДДС-Na и вносили в колонку. Ее промывали сначала тем же раствором, но без ДДС-Na, потом 0,01 М Na-фосфатным буфером без мочевины (при этой промывке сорбент один раз взмучивали и снова давали ему осесть). Все белки и РНК выходили из колонки в ходе промывок. Плазмидную ДНК элюировали 0,3 М Na-фосфатным буфером. По данным авторов, ее выход сильно варьировал от одной партии оксиапатита к другой. Из больших объемов бактериальных лизатов все нуклеиновые кислоты целесообразно сначала осадить этанолом. Показано, что разрывы в плазмидной ДНК в ходе очистки на оксиапатите не появляются [ olman et al., [c.239]

Интенсивность окраски бромистым этидием зависит от размеров рестриктов зоны крупных рестриктов удается выявить при наличии 30—50 нг в полосе. Для выявления мелких рестриктов необходимо иметь 200—500 нг фрагмента ДНК в каждой полосе. Поэтому для обнаружения всех фрагментов, образующихся при обработке ДНК фага "К рестриктазой Hind П1, необходимо наносить на гель образцы с минимальным (0,3—0,5 мкг) и максимальным (2—5 мкг) количеством ДНК. В последнем случае удается выявить все зоны рестриктов, при этом полосы крупных рестриктов выявляются в виде сильно перегруженных зон, а полосы средних и мелких по размеру рестриктов — в виде тонких, четко разделенных полос. [c.176]

Используя праймеры, фланкирующие сайт vnl, амплифицируют с помощью ПЦР небольшое количество тестируемой ДНК (рис. 9.9, А). Амплифицированный фрагмент обрабатывают vnl, продукты рестрикции разделяют с помощью гель-электрофореза и окрашивают их бромистым этидием. При наличии vnl-сайта на электрофореграмме появляется специфический набор полос (рис. 9.9, В), отличный от такового [c.195]

Джонс и Боллингер [9] и Шидловский [10] тщательно исследовали вопрос о конструкции сосуда для измерения электропроводности. Емкостное сопротивление сосуда обычно компенсируется переменным конденсатором, находящимся в противоположном плече мостика, однако Джонс и Боллингер показали, что если вводы электродов недостаточно далеко отведены от некоторых частей сосуда, заполненных раствором и обладающих полярностью противоположного знака, то возникает такая побочная емкость, компенсация которой является практически невозможной. Как было установлено, неучет этого обстоятельства при конструировании сосуда обычно приводит к ошибке, величина которой зависит от удельного сопротивления раствора . Этид объясняются небольшие расхождения между величинами постоянных сосуда [12], наблюдаюя геся для сосудов некоторых типов в том случае, когда измерения постоянных производятся с помощью растворов с различной удельной электропроводностью. [c.139]

Метиленовый синий в концентрациях >0,1% так сильно окрашивает агарозу, что гель приходится отмывать в течение нескольких суток. Имеются сообщения, что в случае окрашивания толуидиновым синим, метиленовым синим и некоторыми другими красителями, но не бромидом этидия (см.), наблюдается разрушение РНК в результате протекающей под действием света катализируемой красителем реакции [Anal. Bio hem. 65, 331 (1975)]. [c.377]

Бромид этидия. Гель окрашивают в 0,01%-ном растворе бромида этидия в 0,02 М ацетате натрия (pH 7,8). Полосы РНК видны в УФ-свете без отмывания от избытка красителя [Anal. Bio hem. 65, 331 (1975)] используется также для окрашивания ДНК. [c.377]

Имеются данные, что при интенсивном освещении видимым светом в присутствии этидия могут происходить одноцепочечные разрывы молекул ДНК [J. Virol. 9, 317 (1972)]. РНК также окрашивается. [c.377]

Тинкториальные свойства клеток, т. е. способность окрашиваться анилиновыми красками, широко применяемыми в микробиологии, также зависят от свойства клеточных стенок. В 1884 г. датским ученым Гра-мом был предложен метод окраски бактерий основными анилиновыми фиолетовыми краска.ми (генциан-виолет или кристаллвиолет) с последующей обработкой раствором Лю-голя, представляющим собой раствор йода в йодистом калии. При погружении окрашенных препаратов в этиловый спирт одни бактерии обесцвечиваются — грамотрицательные, другие остаются фиолетовыми — грамположительные. Для удобства наблюдения препараты с грамотрицательными бактериями докрашиваются нейтральротом, са-фронином или очень слабым раствором фуксина, после чего они приобретают красный цвет. Несмотря на пользование этид методом на протяжении 90 лет, химический смысл реакции до сих пор не вполне выяснен. И тем не менее эмпирический критерий окрашиваемости по Граму стал таксономическим признаком для бактерий, а разделение всех бактерий на грамположительные и грамотрицательные стало классическим и представляет собой одну из первых ступеней в идентификации бактериальных культур. [c.20]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология