Иммунологическая чистота

Сходный метод — количественное определение одного из моносахаридов в осадке, который дает полисахарид с избытком антитела, — применяется для контроля чистоты антигенов, особенно часто в случае групповых веществ крови . Потеря иммунологической активности в процессе очистки свидетельствует о несомненной деструкции полисахарида. [c.518]

В идеальном случае ферментативный гидролиз полисахаридов следует проводить ферментами высокой степени чистоты, специфичность которых установлена по их действию на производные гликозидов и на олиго- или полисахариды с точно известной структурой. Эти условия были реализованы нри исследовании ферментативного гидролиза гликогена, амилозы, амилопектина и некоторых родственных им по структуре полисахаридов. Расщепление полисахарида специфическим ферментом может указать на присутствие в нем связи (или связей), для которой этот фермент специфичен. В случае полисахарида, содержащего не один тип связей, а более, можно провести избирательный гидролиз определенной связи, и полученный остаток проанализировать физическими, химическими или иммунологическими методами, либо для получения дополнительной структурной информации подвергнуть дальнейшей деструкции, действуя другими специфическими ферментами. [c.299]

Представляется возможным исключить деятельность самого гипофиза с помощью радиоактивных антител к гипофизарным гормонам. Согласно иммунологическим представлениям, радиоактивные антитела достаточной чистоты и специфичности, будучи введенными в организм, при встрече с антигеном (в данном случае — гормон гипофиза, на который они выработаны) дают комплекс, который локализуется в месте его образования, являясь источником лучевого воздействия на гипофиз. [c.513]

Как отмечалось ранее, подобного рода радиоактивные иммунологические препараты представляют большой интерес при исследовании возможностей радиотерапии опухолей гипофизарного происхождения. Поставленной целью определяются высокие требования к чистоте препаратов как по их иммунологической, так и по радиохимической характеристикам. [c.516]

Среди различных сывороточных белков с Pi-глобулиновой электрофоретической подвижностью (исключая fii-липопротеин) Мюллер-Эберхард и сотр. [9] получили в высокоочищенном состоянии два углеводсодержащих белка, относящихся к комплексу белков комплемента. Оба белка, обозначенные и р1д-глобулин, обладали одинаковой степенью чистоты но иммунологическим показателям и данным ультрацентрифугирования ( 20,1 = 9,5 8 для Pi -глобулина и 6,9 8 для Pjд-глобулина). Углеводный состав глобулинов приведен в табл. 1. Высокоочищенный Pj -глобулин при 1° превращался в PiA-глобулин в течение 4—6 недель, при 37—в течение 6 дней. [c.263]

В первых двух случаях выбор модификации определяется степенью чистоты фракции нейтрофилов, чувствительностью метода, возможностью изолированного изучения соответствующей функции нейтрофила. В клинико-иммунологических исследованиях правильный выбор соответствующего методического варианта реализации того или иного теста должен определяться целью его использования. Обследование больного может проводиться для изучения патогенеза заболевания, диагностики, определения типа и активности (стадии) воспаления, оценки эффективности проводимой терапии. Необходимо отметить, что одни и те же тесты могут использоваться с разной целью. Например, оценка локомоторных функций нейтрофилов имеет диагностическое значение при синдроме ленивых фа- [c.89]

Достаточным критерием иммунологической чистоты белка можно считать образование только одной полосы преципитации при двойной радиальной иммунодиффузии (см. ниже), когда с испытуемым очищенным белком взаимодействует поливалентная антисыворотка, полученная в ответ на введение животному неочищенного белка. Здесь уместно напомнить, что даже идеальная очистка белка-антигена не гарантирует строгой однозначности иммунного ответа. У разных особей данного вида животного введение одного и того же, совершенно чистого антигена может вызвать различные иммунные ответы. В одном случае это может быть гиперпродукция практически гомогенной специфической популяции антител, в другом — ответ может оказаться поливалентным, так что в антисыворотке появится целый набор антител, способных связывать исходный антиген (но не только его). Этот набор иногда можно разделить электрофорезом или ИЭФ. О причинах поливалентного иммунного ответа было подробно сказано выше. Ввиду такой возможности иммунизацию, как уже упоминалось, следует проводить параллельно на нескольких животных, с тем чтобы иметь возможность выбора наиболее чистой моноспецифической антисыворотки. После этих необходимых замечаний можно рассмотреть заключительный этап очистки антител — использование иммуносорбентов. [c.109]

Взаимодействие антиген—антитело, основанное на компле-ментарности определенных участков структуры антигена и белкового антитела, отличается чрезвычайно высокой чувствительностью и специфичностью. В области полисахаридов иммунологические реакции используются как для определения гомогенности и степени чистоты образца, так и для изучения структуры . [c.518]

Частичная очистка белков и полипептидов может быть достигнута осаждением концентрированными растворами солей, органическими растворителями или путем образования определенных соединений [31, 175]. Для очистки применяются также физические методы ультрацентрифугирование [175], электрофорез [179] и противоточное распределение [36, 187]. При любом методе очистки необходимо иметь критерий гомогенности белка или пептида. Даже кристаллическое состояние не может служить однозначным критерием чистоты [166]. В литературе имеются данные, которые дают возможность предположить, что многие высокоочищенные белки микрогетерогенны [32]. Тесты на гомогенность обычно включают иммунологические испытания, ультрацентрифугирование, электрофорез, диффузию, хроматографию и определение ферментативной или биологической активности [32]. [c.387]

Получение антитнреотропных сывороток с целью их метки и определение иммунологической активности препарата проводилось в Институте экспериментальной медицины АМН СССР. Для характеристики чистоты и иммунологической активности препаратов тиреотропного гормона в Радиевом институте в 1966 г. было проведено определение абсолютного. оличества антител в антитиреотропной сыворотке с применением гормона, меченного иодом-131. [c.517]

Применение иммунологических методов в препаративных целях осложняется прочностью и специфичностью комплекса антиген— антитело. Некоторые комплексы можно разложить только с одновременной деструкцией одного из компонентов, обычно антигена при этом освобождается антитело [371—373]. Антитела против полисахаридных (пневмококковых) антигенов можно отделить [374—376] в концентрированном растворе Na l (1,8 М), причем получаются растворы антител различной степени чистоты. Как показывают результаты измерения содержания азота в осажденных антителах, степень чистоты таких растворов нередко приближается к 100% . Успех применения этого метода, повидимому, частично зависит от эффективности антисыворотки, применявшейся для преципитации. Антитела белковых антигенов, например дифтерийный антитоксин, не могут быть выделены при помощи такого простого метода. Оказалось целесообразным гад-ролизовать белковый антиген пепсином или трипсином в определенных условиях при этом удается выделить только 30—60% указанного антитоксина [377]. Сырой дифтерийный антитоксин, полученный в результате обработки трипсином, не является, как показывает проба на постоянство растворимости, чистым, хотя токсином можно осадить 95% его. Этот препарат был разделен [c.79]

После реакции антиген — антитело локализацию антигена устанавливают по активности связанного фермента. Использование пероксидазы в качестве ферментной метки имеет два решающих преимущества 1) фермент выпускается промышленностью в сравнительно чистом виде 2) для его выявления разработаны надежные гистохимические методы на световом и электронно-микроскопическом уровнях. Успех реакции определяется высокой удельной активностью антитела и чистотой ферментного препарата. Для конъюгации антител с ферментом используют различные реагенты. Помимо функционального реагента—и, п -дифтор-л ,л< -динитроли нилсульфона, который не оказывает существшного воздействия ни на ментативную, ни на иммунологическую активность, важное значение, по-видимому, имеет также глутаральдегид, поскольку и он не [c.302]

Обычно для иммунологических исследований (например, ELISA) или иммунизации животных мы выделяем MV из культуральной среды, как описано выше для ВПГ. Однако для анализа спектров вирусных белков и т. д. специалисты рекомендуют использовать метод доктора В. Гибсона, который приводится ниже. Исходным материалом для получения вирусных препаратов максимальной инфекционности и наибольшей чистоты должна быть культуральная среда. Для сохранения высокой инфекционности препарата и целостности вирусных частиц следует избегать осаждения вируса. Впервые центрифугирование в отрицательном градиенте вязкости и положительном градиенте плотности, предложенное Барзилаи и др. [29] для выделения MV, было применено Тэлботом и Алмейдиа [30]. Метод надежен и гарантирует высокую эффективность. Его осуществляют следующим образом [c.291]

Прежде чем описывать используемые при этом приемы, обратим внимание на то, что необходимое условие получения узкоспецифического иммунного ответа — совершенная чистота белка-антигена, используемого для иммунизации. Эта чистота должна отвечать иммунологическим, а не электрофоретическим критериям. Последние для данной цели не адекватны в одной полосе при электрофорезе могут оказаться несколько различных белков и, наоборот, один чистый антиген может иногда дать несколько полос, если он существует в нескольких иммунологически равноценных конформациях. [c.109]

Свойства полученного при фракционировании препарата субклеточных частиц можно отнести к свойствам самих частиц только в том случае, если препарат не содержит примесей. Следовательно, всегда необходимо оценивать чистоту получаемых препаратов. Эффективность гомогенизации и наличие в препарате примесей можно определить с помощью микроскопического исследования. Однако отсутствие видимых примесей еще не является достоверным доказательством чистоты препарата. Для количественнбй оценки чистоты полученный препарат подвергают химическому анализу, который позволяет установить содержание в нем белков или ДНК, определить его ферментативную активность, если возможно, и иммунологические свойства. [c.56]

Фармакопея США XVII содержит лишь описание свойств антибиотиков, как, например, растворимость, упаковка и хранение. Требования в отношении активности и чистоты антибиотиков разрабатываются Администрацией по пищевым и лекарственным продуктам США. Иммунологические препараты, включенные в Фармакопею по аналогии с антибиотиками, должны отвечать требованиям Службы здравоохранения США, и статьи на них подготавливаются Национальным институтом здравоохранения. [c.48]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология