Расщепление полисахаридов

Метод расщепления по Берри имеет ряд существенных недостатков. Реакция полиальдегида с фенилгидразином не протекает количественно, а разделение смеси озазонов является очень трудоемкой операцией. Кроме того, в деградированном полисахариде остается некоторое количество азотсодержащих остатков, мешающих дальнейшему расщеплению полисахарида. По этой причине при исследовании структуры полисахаридов чаще применяют метод расщепления по Смиту. [c.119]

Ферментативное расщепление полисахаридов может протекать по одному из двух возможных направлений последовательное [c.298]

Г. Внутриклеточное расщепление полисахаридов и гликолипидов [c.541]

Наконец, реальную опасность при выделении полисахаридов представляет деструкция под действием ферментов. Ферменты, содержащиеся в источнике, из которого выделяют полисахарид, обычно инактивируют нагреванием, кипячением с метанолом, замораживанием и т. п. Растворы полисахаридов могут служить средой для роста микроорганизмов, попадающих туда из воздуха лаборатории. Для предотвращения расщепления полисахаридов ферментами микроорганизмов к растворам прибавляют толуол, тимол или хранят их при низкой температуре. О предосторожностях при использовании ферментных препаратов для очистки полисахаридов было сказано выше. [c.488]

Полное расщепление полисахарида на составляющие его компоненты является обычно первой стадией исследования и необходимо для идентификации этих компонентов и установления количественных соотношений между ними. [c.492]

Метод окисления и расщепления полисахарида по Берри заключается в следующем [99]. Окисляют 3 г ксилана 5,85 г метапериодата натрия в 200 мл воды. Ход реакции контролируют по углу вращения поляризованного луча света раствором. Через 120 ч после окончания реакции ([а]п = + 2,12°) ионы перйодата и йодата осаждают ацетатом свинца и отфильтровывают. Избыток ионов свинца [c.117]

Рассмотрим метод расщепления полисахаридов по Берри на примере галактана [99]. В 50 М.Л воды помещают 5 г галактана и обрабатывают 200 мл 0,18 М раствора метапериодата натрия. Ход окисления контролируют по количеству муравьиной кислоты (в пробах по 1 мл) и расходу перйодата (в пробах по [c.119]

Было показано, что полисахариды древесины после удаления лигнина расщепляются значительно быстрее, чем в его присутствии. Процесс расщепления полисахаридов древесины ускоряется после сильного сухого размола, облучения у-лучами или быстрыми электронами. [c.296]

В настоящее время известно несколько ферыектов, действующих на пектиновые вещества , например пектинэстераза высших растений, гидролизующая сложноэфирные группы пектиновых кислот, или полига-лактуроназа (пектиназа) микроорганизмов, расщепляющая гликозидные связи D-галактуроновой кислоты. Смесь пектолитических ферментов производится в промышленном масштабе и используется для осветления фруктовых соков и вин этот же ферментный препарат успешно применяется для частичного расщепления полисахаридов при структурных исследованиях. [c.530]

Известен ряд ферментативных реакций расщепления полисахаридов,, содержащих остатки уроновых кислот. [c.303]

Важнейшим источником олигосахаридов являются продукты частичного гидролиза полисахаридов, состоящего в расщеплении полисахаридов на олигомерные фрагменты. Установление строения этих фрагментов дает важную информацию о структуре исходного полимера (см. стр. 504). При расщеплении регулярных гомополисахаридов получают набор олиго- [c.423]

Для инкубации пробирки помещают в термостат при. 37 С на 30 мин, После инкубации содержимое каждой пробирки анализируют на присутствие продуктов расщепления полисахарида с помощью реакции Троммера. Для этого в каждую из 8 пробирок добавляют по 1 мл 10% ного раствора гидроксида натрия и и по 5 капель 1%-№ого раствора сульфата меди. Осторожно нагревают верхнюю часть раствора в пробирке до закипания на газовой горелке и кипятят в течение 1 мин. Появление красного осадка оксида меди (I) указывает на положительную реакцию Троммера в присутствии глюкозы и мальтозы, [c.121]

Метод метилирования, имеющий со времени Хеуорса исключительно большое значение в установлении строения полисахаридов, заключается в получении полностью метилированного производного полисахарида, последующем полном его гидролизе и разделении, идентификации и количественном определении образующихся полностью или частично-метилированных моносахаридов. Основы метода рассмотрены при установлении строения олигосахаридов (см. стр. 433), однако его применение при исследовании полисахаридов имеет ряд особенностей. Поскольку метод включает стадию расщепления полисахарида на мономеры, он характеризует только состояние моносахаридов в полимерной молекуле-(число и положение заместителей и размер цикла у каждого моносахарида), но не дает сведений о последовательности мономеров в полимерной, цепи. [c.494]

Метод частичного расщепления полимерной цепи на блоки — универсальный прием для установления строения любого полимера — в последние годы находит широкое применение и в исследовании полисахаридов. Он заключается в расщеплении полисахарида на олигосахарид- [c.504]

Кислотный гидролиз остается пока важнейшим способом частичного расщепления полисахаридов. Гидролиз проводится так, чтобы расщепить лишь часть гликозидных связей полисахарида, в результате чего наряду с моносахаридами образуются и олигосахаридные фрагменты. Максимальные выходы олигосахаридов разной степени полимеризации соответствуют разным степеням гидролиза и для идеального случая, когда расщепление всех гликозидных связей полисахарида равновероятно, могут быть рассчитаны статистически [c.505]

Высокая чувствительность к кислотам свойственна гликозидным связям фураноз, 3,6-ангидро- и 2-дезоксисахаров (см. гл. 6 и 8). Обычно частичный гидролиз полисахарида 0,01—0,1 н. кислотой служит для обнаружения в его молекуле таких структурных единиц, для предварительной оценки их расположения в полисахаридной молекуле по изменению молекулярного веса при частичном гидролизе, а в том случае, когда лабильные к кислотам моносахаридные звенья занимают концевые положения, — для полного их удаления с целью получения так называемого деградированного или расщепленного полисахарида . Установление строения такого модифицированного полисахарида обычно представляет собой более простую задачу, чем полное установление строения, и поэтому исследование деградированных производных является весьма распространенным вспомогательным приемом при изучении растительных камедей и слизей, гемицеллюлоз и других полисахаридов. [c.507]

Ферментативные методы расщепления полисахаридов используются в настоящее время достаточно широко и позволили достигнуть значительных успехов, например, в исследовании крахмалоподобных полисахаридов (см. стр. 533) или мукополисахаридов (см. стр. 541). Как и в случае всех остальных методов установления строения полисахаридов, ферментативный гидролиз оказывается особенно ценным в сочетании с другими приемами изучения полисахаридной структуры. К сожалению, трудность выделения ферментов часто препятствует их широкому применению, а чрезвычайно скудные сведения о детальном механизме ферментативного действия часто не позволяют предвидеть направление расщепления. [c.513]

Частичный гидролиз полисахаридов позволяет выделить фрагменты с промежуточной молекулярной массой и разделить их с помощью таких хроматографических методов, как гель-фильтрация, ионообменная или распределительная хроматография. Строение этих более простых олигосахаридов установить легче, чем строение исходного полисахарида. Если все гликозидные связи в полисахариде гидролизуются с одной и той же скоростью (как, например, в линейных гомополисахаридах), то, например, в случае-амилозы продукт частичного гидролиза будет состоять из глюко.чы и ряда олигосахаридов — мальтозы, мальтотриозы и мальтотетра-озы. В гетерополисахаридах присутствуют гликозидные связи разных типов, и скорости гидролиза их различны. Фуранозиды обычно гидролизуются быстрее пиранозидов в 10—1000 раз, что приводит например, к удалению остатков арабинофуранозы, связанных с остатками ксилопиранозы в арабиноксиланах. Условия гидролиза влияют также на специфичность расщепления полисахарида. (1- 6)-Связи более устойчивы к действию минеральных кислот чем (1- 4)-связи, однако если гидролиз проводился в уксусном ангидриде, содержащем около 5 % серной кислоты, менее устойчивы (1-)-б)-связи. Параллельное использование этих двух методов гидролиза, приводящих к образованию фрагментов разного состава, позволит лучше воспроизвести строение полисахарида. Концентрация углеводов в реакционной смеси должна быть ниже [c.219]

При расщеплении разветвленных полисахаридов фосфоролиз останавливается вблизи точек разветвления продуктом реакции является высокомолекулярный предельный декстрин фосфорилазы . В случае гликогена расщепление под действием фосфорилазы прекращается после разрыва около 35% гликозидных связей. Для полного расщепления гликозидных связей необходимо добавление к фосфорилазе фермента, катализирующего разрыв а-1,6-гликозидных связей, — амило-1,6-глюкозидазы. Образование линейных декстринов под действием этого фермента вновь создает условия для действия фосфорилазы. Это приводит, в конце концов,, к полному расщеплению полисахарида с образованием смеси глюкозо-1-фосфата и глюкозы. Действие Р-фермента на внешние цепи разветвленного полисахарида прекращается раньше, чем действие фосфорилазы различные образцы гликогена расщепляются при этом лишь на 3—21%, а под, действием фосфорилазы на 14—31%. [c.617]

В настоящее время имеются многочисленные данные о существовании ферментов, катализирующих расщепление полисахаридов самого различного строения (обзор м. , также м. ). Однако, обычно эти ферменты недостаточно очищены и неизвестна их точная специфичность и механизм действия. [c.619]

В тех немногих случаях, когда изучение их специфичности и механизма действия было проведено, оказалось, что обычный путь деградации полисахаридов аналогичен путям распада крахмала и гликогена под действием а-амилазы, т. е. для полного расщепления полисахарида необходимо действие по крайней мере двух ферментов. Первый из них катализирует быстрый распад полисахарида на олигосахариды, причем расщепление гликозидных связей происходит по всей длине полисахаридной цепи. [c.619]

Эта подгруппа ферментов, как и карбогидразы, катализирует расщепление полисахаридов. [c.103]

В идеальном случае ферментативный гидролиз полисахаридов следует проводить ферментами высокой степени чистоты, специфичность которых установлена по их действию на производные гликозидов и на олиго- или полисахариды с точно известной структурой. Эти условия были реализованы нри исследовании ферментативного гидролиза гликогена, амилозы, амилопектина и некоторых родственных им по структуре полисахаридов. Расщепление полисахарида специфическим ферментом может указать на присутствие в нем связи (или связей), для которой этот фермент специфичен. В случае полисахарида, содержащего не один тип связей, а более, можно провести избирательный гидролиз определенной связи, и полученный остаток проанализировать физическими, химическими или иммунологическими методами, либо для получения дополнительной структурной информации подвергнуть дальнейшей деструкции, действуя другими специфическими ферментами. [c.299]

Метод расщепления полисахаридов по Смиту сводится к следующим операциям. В качестве примера приводим исследование р-Д-глюкана из гемицеллюлоз костры безостого овса [99]. Навеску глюкана около 0,7 г, растворенную в водном растворе NaOH, обрабатывают 500 мл 0,04 М раствора перйодата натрия при 5° С в течение 135 ч. Расход перйодата составляет 0,58 моля на один остаток глюкопиранозы и достигает постоянного уровня через 90 ч. Для разрушения непрореагировавшего перйодата в смесь добавляют вычисленное количество (0,98 г) этиленгликоля и через 30 мин раствор днализуют дистиллированной водой для удаления неорганических солей. Ионы перйодата и йодата можно также удалить осаждением ацетатом свинца. [c.114]

Для щелочного расщепления раство"ряют полисахарид при 25— 38° С в известковой воде, не содержащей кислорода. Реакция протекает в течение нескольких недель или месяцев. Ионы кальция после расщепления полисахарида удаляют с помощью катионообменной смолы. Оставшийся нерасщепленный полисахарид выделяют осаж дением этанолом. Продукты распада разделяют фракционированным осаждением их кальциевых солей. Сахараты исследуют распределительной хроматографией на бумаге с растворителем этилацетат— уксусная кислота — вода 10 1,3 1). [c.121]

Ценной модификацией описанного выше метода расщепления полисахаридов является расщепление по Смиту [32], заключающееся в окислении полисахарида, восстановлении образовавшегося полиальдегида борогидридом и частичном гидролизе полиола разбавленной минеральной кислотой при комнатной температуре. Частичный гидролиз полиола дает набор гликозидов олигосахари-Дов, характеризующих исходный полисахарид. Образование гликозидов объясняется относительной устойчивостью гликозидной [c.221]

Декстрины (С4Н, 05)р-иродукты частичного расщепления полисахаридов крахмала и гликогена. Все декстрины легко растворимы в воде. Они навдены в кишечнике как продукт ферментативного гидролиза, атакже обнаружены в крови воротной вены животных и человека после принятия пищи, богатой углеводами. [c.182]

Желудочный сок не содержит ферментов, расщепляющих сложные углеводы. В желудке действие а-амилазы слюны прекращается, так как желудочное содержимое имеет резко кислую реакцию (pH 1,5—2,5). Однако в более глубоких слоях пищевого комка, куда не сразу проникает желудочный сок, действие амилазы некоторое время продолжается и происходит расщепление полисахаридов с образованием декстринов и мальтозы. Наиболее важная фаза распада крахмала (и гликогена) протекает в двенадцатиперстной кишке под действием а-амилазы поджелудочного сока. Здесь pH возрастает приблизительно до нейтральных значений, при этих условиях а-амилаза панкреатического сока обладает почти максимальной активностью. Этот фермент завершает превращение крахмала и гликогена в мальтозу, начатое амилазой слюны. Напомним, что в молекулах амилопектина и гликогена в точках ветвления существуют также а(1—>6)-глико-зидные связи. Эти связи в кишечнике гидролизуются особыми ферментами амило-1,6-глюкозидазой и олиго-1,6-глюкозидазой (терминальная декстри-наза). [c.320]

Естественно, что существуют и внеклеточные ферменты аналогичного действия с их помощью происходит использование полисахаридов, получаемых с пищей для удовлетворения энергетических потребностей организма. Внеклеточные ферменты, катализирующие расщепление полисахаридов, весьма разнообразны. Многие микроорганизмы способны вырабатывать целлюлазу, что позволяет использовать образующиеся при расщеплении целлюлозы моносахариды. [c.615]

Заслуживают особого упоминания хорошо известные модификации кислотного расщепления полисахаридов — ацетолиз и метанолиз, имеющие в ряде случаев существенные преимущества перед обычным гидролизом. Ацетолиз заключается в обработке полисахаридов смесью серной и уксусной кислот в уксусном ангидриде и приводит к ацетилированным фрагментам. Характерной чертой ацетолиза является повышенный выход олигосахаридов интересно отметить, что ацетолиз часто позволяет получать дисахариды с сохранением гликозидных связей 6-дезоксигексоз , в то время как при гидролизе эти связи разрушаются, как правило, раньше, чем соответствующие гликозидные связи обычных гексопираноз. Причины, вызывающие различную устойчивость гликозидных связей при ацетолизе и гидролизе, неизвестны, тем не менее ацетолиз весьма широко используется для частичного расщепления полисахаридов (см., например, [c.509]

Таким образом, ферментативный гидролиз в отличие от кислотного дает возможность выяснить положение остатков ,-арабинозы в молекуле этого полисахарида. Следует учитывать, однако, что неочищенные ферментные препараты иногда обладают кроме гидролизующего еще и син-тетазным действием. В этом случае применение их для расщепления полисахаридов может привести к образованию из продуктов гидролиза новых олигосахаридов, не имеющих отношения к структуре исходного полисахарида. [c.512]

Способность амилозы к комплексообразованию тесно связана с величиной ее молекулы при расщеплении полисахарида до степени полимеризации ниже 30—35 характерный синий цвет иодного комплекса меняется на красный, а амилоолигосахариды со степенью полимеризации ниже 6 вообще не дают комплексов. [c.534]

Действие полисахаридаз не обязательно связано с необходимостью использовать мономерные единицы полисахаридов в энергетическом обмене организма. Расщепление полисахаридов может вызываться необходимостью изменения свойств полисахаридов, выполняющих другие биологические функции. Примерами могут служить расщепление клеточных оболочек семян под действием целлюлаз и близких ферментов при прорастании, расщепление клеточной стенки бактерий под действием лизо-цима, содержащегося, например, в слюне и выполняющего защитную функцию, или изменение свойств углеводсодержащего биополимера поверхности эритроцитов под действием нейраминидазы вируса гриппа. [c.615]

Условия гидролиза влияют также на специфичность расщепления полисахаридов. Связи (1- 6) более устойчивы к действию минеральных кислот, чем (I— 4)-связи однако, если гидролиз проводится в уксусном ангидриде, содержащем около 5% серной кислоты, менее устойчивы (1 "6)-связи. Параллельное исиользо-вание этих двух методов гидролиза, приводящих к образованию фрагментов разного состава, позволит лучше воспроизвести строение нолисахарнда. Концентрация углеводов в реакционной смеси должна быть ниже 0,5% для предотвращения катализируемой [c.60]

Родионова Н. А. Ферменты микроорганизмов, катализирующие расщепление полисахаридов клеточных стенок высщих растений Автореф. дис.. .. д-ра биол. наук. — М., 1982. — 55 с. [c.441]

Целлобиоза — бесцветное кристаллическое вещество, легко растворяется в воде, в растворах наблюдается мутаротация. Получают ее расщеплением полисахарида целлюлозы. Молекула целлобиозы содержит два остатка глюкозы, при этом один остаток находится в фиксированной [З-форме. Целлобиоза может быть названа как 4-( 5-Ь-глюкопиранозидо)-(а или Р)-0-глюкопираноза, известны а- и Р-целлобиозы. [c.518]

Важным методом частичного расщепления полисахаридов является ферментативный гидролиз, при этом используются эндоферменты, расщепляющие полисахариды в середине цепи. Наиболее известный из таких ферментов — лизоцим, расщепляющий (. 1(1 - 4)-гликозидные связи между остатками N-aцeтилмypaмoaoй кислоты и N-aцeтилглюкoзaминa в полисахариде (муреине) клеточной стенки бактерий (см. с. 190). [c.468]

Расщепление полисахаридов действием щелочей Корбет, Кеннер и Ричардс [45, 122] предложили в качестве аналитического метода исследования структуры цепей. В общем случае щелочная деструкция полисахарида в отсутствие кислорода протекает путем процесса отслаивания , начиная с восстанавливающего конца полимера, с образованием определенных типов сахариновых кислот и других продуктов распада, характерных для присутствующих в полисахариде связей. [c.321]

Полное расщепление полисахарида периодатным окислением а-гликольных группировок с последующим восстановлением образовавшегося полиоксиальде-гида боргидридом натрия и кислотным гидролизом ацетальных связей в получаемом полиспирте [c.377]