Органические реактивы, приготовление растворов

Оборудование, материалы, реактивы. Работу по выделению и очистке белков проводят в холодной комнате или специальном криостате при температуре О - 4°С (Рис. 4). Из оборудования основными являются центрифуги с охлаждением до О С и ниже, применяемые для отделения осадков гомогенизаторы для разрушения клеток, спектрофотометр, служаш ий для измерения концентрации белков и активности ферментов, а также обычное лабораторное оборудование весы, рН-метры, мешалки, градуированные цилиндры, пипетки и микропипетки, аппараты для приготовления льда или жидкий азот. Из реактивов необходимы различные буферные растворы, сульфат аммония, реактив Фолина-Чокальтеу, органические растворители и т.д. Жидкие химические реактивы должны быть перегнаны, сухие - перекристаллизованы. В работе желательно применять бидистиллированную воду. [c.50]

Окрашивающий раствор для определения фосфора с окислением органического вешества. Реактив А (приготовление см. в методе Кирсанова). Реактив Б (2,5 0,1) г аскорбиновой кислоты растворяют в 220 см реактива А и доводят объем водой до 1 дм Раствор готовят в день проведения анализа. [c.175]

Экстрагент АТ, 0,04%-йый (1.10 -М) раствор азо-азокси БН в смеси четыреххлористого углерода с 20% об. трибутилфосфата /5/ Взвешивают 0,4 ъ азо-азокси БН и переносят в мерную колбу вместимостью 1 л, смывая реактив четыреххлористым углеродом. Приливают 200 мл трибутилфосфата и 500-600 мл четыреххлористого углерода. Общий объем в колбе должен быть 700-900 мл. Содержи, мое колбы слегка подогревают на водяной бане и периодич ки взбалтывают до полного растворения реактива. Затем раствор ох- лаждают и доводят четыреххлористым углеродом до метки. Раст-, вор частями переносят в делительную воронку вместимостью 500 4 добавляют равный объем 0,1 н.соляной кислоты (можно и крепче) и встряхивают в течение 5 минут. Водный слой отбрасывают, а орга-нический еще ра) встряхивают с соляной кислотой. Органический слой дважды промывают катионированной водой (дважды встряхивают с равным объемом воды). Водный слой удаляют, а посветлев, ший органический помещают в склянку из оранжевого стекла и ис-пользуют в работе. Растворы с меньшим содержанием реактива готовят разбавлением приготовленного раствора указанной смесью растворителей. [c.144]

В связи с тем, что продажный реактив имеет примеси, концентрация приготовленного раствора по навеске не будет точно соответствовать заданной. Точную концентрацию раствора можно определить по экстракционной емкости. Экстракционная емкость определяется следующим образом. В делительную воронку емкостью 100 мл помещают 25 мл раствора, добавляют 800—1000 мкг кальция в виде раствора СаСЬ, 3,5 мл 20%-ного (5 н.) раствора NaOH и доводят объем водой до 25 мл. Содержимое встряхивают в течение 2 минут. После расслоения органический слой переносят в другую делительную воронку и встряхивают с 25 мл 0,1 н. соляной кислоты. Водный раствор переносят в коническую колбочку, добавляют 10 мл концентрированного аммиака, объем доводят водой до 50 мл и титруют кальций из микробюретки 0,01 н. раствором комплексона III в присутствии индикатора метилтимолового синего до перехода окраски индикатора из голубой в серую. По количеству израсходованных на титрование мл комплексона III вычисляют количество экстрагированного кальция, которое эквивалентно количеству реактива. При вычислениях учитывают, что каждый мкг кальция эквивалентен 10 мкг реактива ААБН (м. в. ААБН =400). [c.35]

Получение три-а-тиенилвисмута [41]. В Гриньяров реактив, приготовленный из 20 г а-иодтиофена и 3 г магния в 100 мл сухого эфира, прибавляют по каплям и при встряхивании раствор 6 г треххлористого висмута в 30 мл сухого эфира. На месте падения капли образуется оранжево-красное помутнение, которое при перемешивании исчезает. Смесь постепенно закипает и разделяется под конец на два слоя. Для завершения реакции содержимое колбы нагревают 2 часа на водяной бане (умеренное кипение эфира). Более длительное кипячение нецелесообразно, так как тогда происходит почернение и выделение осадка серо-черного цвета. После хранения в течение ночи (лучше в атмосфере азота) содержимое колбы выливают в 30 г льда. Окраска реакционной смеси переходит сначала в желтую, затем — в светло-оранжевую и, наконец,— светло-зеленую. Органический слой (без излишне долгого соприкосновения с воздухом) отделяют, высушивают хлористым кальцием, эфир отгоняют. Остаток растворяют в минимальном количестве бензола [c.403]

При исследовании возможности разработки количественного метода было найдено, что никель-5-нитросалицилово-альдегидные производные нерастворимы в большинстве растворителей и поэтому не могут быть определены колориметрически. При замене соли никеля солью меди и нитросалицилового альдегида салициловым удалось получить производные первичных аминов, растворимые в некоторых органических растворителях. Был приготовлен реактив, содержащий салициловый альдегид, ацетат меди (или хлорид меди) и триэтаноламин в метаноле. Первичные амины образуют с этим реактивом растворимый окрашенный продукт, имеющий максимум поглощения при 445 нм. Вторичные амины мешают определению, так как они также дают окрашенные продукты. Для специфического анализа первичных аминов был приготовлен водный реактив, в котором большинство продуктов реакции первичных аминов нерастворимо. Их извлекают дии-зопропиловым эфиром или бензолом и анализируют колориметрическим методом. При этом оказалось, что окрашенные продукты реакции не обнаруживают максимум поглощения в видимой части спектра. Несмотря на это, была сделана попытка провести анализ, измеряя оптическую плотность окрашенного раствора при 430 нм. Была построена калибровочная кривая, которая оказалась прямой, за исключением начальной ее части. Если к триэтаноламину, входящему в состав реактива, добавить 0,01% моноэтаноламина, то получается прямолинейная зависимость, соответствующая закону Ламберта — Бера во всем интервале концентраций. Однако вторичные и третичные амины вызывают смещение кривой поглощения. Поэтому необходимо было найти такой способ, при котором максимум поглощения находился бы в видимой области и не зависел от присутствия вторичных или третичных аминов. [c.441]

Приготовляют 1%-ный раствор солянокислого гидроксиламина и нейтрализуют его аммиаком по метиловому красному. Затем на каждые 100 мл СНС1з или СС1д прибавляют по 10 мл приготовленного нейтрализованного раствора солянокислого гидроксиламина жидкость переносят в делительную воронку, взбалтывают и сливают нижний слой органического растворителя. Эту операцию повторяют еще 1—2 раза, и очищенный таким образом реактив перегоняют, поместив перегонную колбу на водяную баню. В тех случаях, когда очищают хлороформ, рекомендуется перед началом перегонки налить в приемник чистый 96%-ный спирт в количестве 1—1,5% от объема хлороформа. При перегонке содержимое приемника изредка перемешивают. Спирт предохраняет хлороформ от разложения. Четыреххлористый углерод можно перегонять без добавления в приемник спирта. [c.139]

Приготовляют 1%-ный раствор гидрохлорида гидроксиламина и нейтрализуют его аммиаком по метиловому красному. Затем на каждые 100 мл H I3 или I4 прибавляют по 10 мл приготовленного нейтрализованного раствора гидрохлорида гидроксиламина жидкость переносят в делительную воронку, взбалтывают и сливают нижний слой органического растворителя. Эту операцию повторяют еще 1—2 раза и очищенный таким образом реактив перегоняют, поместив перегонную колбу на водяную баню. [c.113]

Приготовляют 1 %-ный раствор гидрохлорида гидроксиламина и нейтрализуют его аммиаком по метиловому красному. Затем на каждые 100 мл СНС1з или ССи прибавляют по 10 мл приготовленного нейтрализованного раствора гидрохлорида гидроксиламина жидкость переносят в делительную воронку, взбалтывают и сливают нижний слой органического растворителя. Эту операцию повторяют еще 1—2 раза, и очищенный таким образом реактив перегоняют, поместив перегонную колбу на водяную баню. В тех случаях, когда очищают хлороформ, рекомендуется перед началом перегонки налить в приемник чистый 96%-ный спирт в количестве I—1,5% от объема хлоро- [c.160]

Окислительное расщеиление кетонов кислотой Каро может быть проведено в лигроине при 50—65°, в растворах, содержащих больше серной кнслоты, меньще воды и не содержащих органического растворителя кипячением кетона со смесью персульфата калия (4 г) и концентрированной серной кислоты (I мл) в 90%-ной уксусной кислоте (150 мл) кипячением кетона с сухим реактивом Байера и Виллигера . Для приготовления реактива тщательно растирают iB ступке 10 г персульфата калия с 6 мл концентрированной серной кислоты, добавляют 30 г сульфата калия и растирают ib сухой порощок. Сухой реактив добавляют к холодному раствору кетона в ледяной уксусной кислоте, после чего реакцию проводят при комнатной температуре в течение 7—10 дней. [c.376]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология