Количественное определение белков

Спектрофотометрический метод количественного определения белка основан на их свойстве поглощать свет в УФ-области при [c.531]

I. МЕТОДЫ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЛКА [c.80]

Для количественного определения белка используют колориметрические и спектрофотометрические методы, в некоторых случаях пользуются определением белка по содержанию общего азота в препарате. [c.29]

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВ ФОТОЭЛЕКТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ [c.62]

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА [c.18]

Флуорескамин и о-фталевый альдегид могут быть использованы для количественного определения белков и пептидов. При работе с флуорескамином белки открываются в количестве 0,05—0,5 мкг. [c.130]

Белки дают ряд цветных реакций, обусловленных наличием определенных аминокислотных остатков нли общих химических группировок. Эти реакции широко используются для аналитических целей. Среди них широко известны нингидриновая реакция, позволяющая проводить количественное определение аминогрупп в белках, пептидах и аминокислотах, а также биуретовая реакция, применяемая для качественного и количественного определения белков и пептидов. (При нагревании белка или пептида, но не аминокислоты, с Си 01 в щелочном растворе образуется окрашенное в фиолетовый цвет комплексное соединение меди, количество которого можно определить спектрофотометрически.) Цветные реакции на отдельные аминокислоты используются для обнаружения пептидов, содержащих соответствующие аминокислотные остатки. Для идентификации гуанидиновой группы аргинина применяется реакция Сакагучи — при взаимодействии с а-нафтолом и гипохлоритом натрия гуанидины в щелочной среде дают красное окрашивание. Индольное кольцо триптофана может быть обнаружено реакцией Эрлиха — красно-фиолетовое окрашивание при реакции с п-диме-тиламинобенэальдегидом в Н 804. Реакция Паули позволяет выявить остатки гистидина и тирозина, которые в щелочных растворах реагируют с диазобеизолсульфокислотой, образуя производные, окрашенные в красный цвет. [c.32]

Способностью восстанавливать реактив Фолина в синее соединение обладает не только свободный тирозин, но и белок. Можно было бы ожидать, что интенсивность окраски, возникающей при взаимодействии реактива Фолина с белком, пропорциональна содержанию в белке тирозина и цис-теина. В действительности, оказалось, что если белок обработать предварительно солями меди, то даваемая им с реактивом Фолина окраска намного превышает ту, которую могли бы дать только названные аминокислоты. Считают, что в составе белковой молекулы, образовавшей медный комплекс, с реактивом Фолина взаимодействуют также и другие аминокислоты, а поэтому интенсивность возникающего окрашивания в известной мере пропорциональна содержанию белка. Лоури и сотрудники использовали этот принцип для количественного определения белка. [c.45]

Работа 11. Количественное определение белка [c.19]

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВ МЕТОДОМ ЭЛЮИРОВАНИЯ [c.60]

Можно проводить количественное определение белков. [c.19]

Несмотря на высокую избирательность метода Лоури, имеется ряд химических соединений, мешающих количественному определению белка данным фотометрическим методом. К ним относятся, например, мочевина, сульфат аммония, гексамины, некоторые углеводы и т. д. Однако эти вещества оказывают заметное влияние на фотометрическую реакцию лишь прп больших концентрациях, значительно превышаю- [c.37]

На каких реакциях основано количественное определение белка биуретовым методом, методом Лоури [c.23]

Работа № 19 Количественное определение белка по Робертсу—Стольникову [c.41]

Белки обладают явно выраженными гидрофильными свойствами. Растворы белков имеют очень низкое осмотическое давление, высокую вязкость и незначительную способность к диффузии. Белки способны к набуханию в очень больших пределах. С коллоидным состоянием белков связан ряд характерных свойств, в частности явление светорассеяния, лежащее в основе количественного определения белков методом нефелометрии. Этот эффект используется, кроме того, в современных методах микроскопии биологических объектов. Молекулы белка не способны проникать через полупроницаемые искусственные мембраны (целлофан, пергамент, коллодий), а также биомембраны растительных и животных тканей, хотя при органических поражениях, например, почек капсула почечного клубочка (Шумлянского-Боумена) становится проницаемой для альбуминов сыворотки крови и последние появляются в моче. [c.44]

Работа № 19. Количественное определение белка по Ро [c.337]

Наиболее характерными физико-химическими свойствами белков являются высокая вязкость растворов, незначительная диффузия, способность к набуханию в больших пределах, оптическая активность, подвижность в электрическом поле, низкое осмотическое давление и высокое онкотическое давление, способность к поглощению УФ-лучей при 280 нм (это свойство, обусловленное наличием в белках ароматических аминокислот, используется для количественного определения белков). [c.44]

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВ [c.55]

Область применения. Количественное определение белков, определение концентрации индивидуальных компонентов белковой смеси (например, сыворотки крови). [c.159]

В связи с тем, что присутствие в растворе хлорида калия мешает количественному определению белка по методу Лоури, эту соль из препарата белка необходимо удалить. Для этого к 1 мл экстракта добавляют 2 мл 10%-ного раствора ТХУ, что приводит к осаждению белков. Полученную суспензию центрифугируют при 4000 об/мин 10 мин. Надосадочную жидкость очень тщательно удаляют. Края пробирок вытирают фильтровальной бумагой. К осадку прибавляют 10 мл 0,1 моль/л раствора гидроксида натрия. Раствор перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения осадка. Для определения концентрации белка по методу Лоури берут 0,1 мл щелочного раствора белка. [c.6]

Количественное определение белка в моче реакцией с сульфосалициловой кислотой [c.215]

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА С ПОМОЩЬЮ ФЕНОЛЬНОГО РЕАКТИВА ФОЛИНА—ЧИОКАЛЬТЕУ [8] [c.67]

Количественное определение белков производят, как правило, определением общего азота по Кьельдалю. Исходным веществом в этом анализе могут служить осадки белков, полученные при номощи описанных выше осаждающих реактивов. Свободные ННа-группы белка определяются методом Ван-Слейка (см. Аминокислоты ). [c.442]

Количественное определение белков при электрофорезе в агаре. Процентное содержание полученных фракций можно определить фотоэлектрическим методом. Отделенная от стекла и высушенная агаровая пластинка достаточно прозрачна, поэтому ее без дополнительной обработки помещают между стеклянными пластинками денситометра и проводят измерение оптической плотности, как описано на стр. 63. [c.77]

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВ В МОЛОКЕ [c.319]

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА С ПОМОЩЬЮ АМИДОВОГО ЧЕРНОГО [9, 10] [c.70]

Оформление работы. Принцип методов количественного определения белка и расчеты записывают в рабочую тетрадь. [c.215]

Козлова Е. М. Количественное определение белков на основе биуретовой реакции. Сб. студенческих работ (Моск. хим.-технол. ин-т мяси. пром-сти), 1952, вып, 1, с. 31—33, 7399 [c.281]

Если реакция Миллона или ксантопротеиновая реакция характерны только для тех белков, которые содержат соответственные аминокислоты, то нингидриповая реакция более универсальна и получается со всеми без исключения белками. Объясняется это тем, что нингидрин дает окрашивание (обычно сине-фиолетовое) с любой -аминокислотой, а любой белок содержит именно а-аминокислотпые остатки. На основе нингидриновой реакции разработан метод количественного определения белков и аминокислот. [c.32]

Присутствие в исследуемом растворе MgS04 и (ЫН4)2504 препятствует биуретовой реакции. При наличии аммонийных солей следует употреблять большой избыток едкой щелочи. Биуретовая реакция употребляется и для количественного определения белков. [c.158]

Очень часто флуорохромы применяют для количественного определения следовых количеств выделенных и очищенных веществ (белков, аминокислот, лекарственных веществ). В этом случае требования к постоянству квантового выхода красителя и его спектра люминесценции в различных условиях несколько ниже, так как для каждого отдельного метода и вещества можно с помощью эталонов сделать пересчет на абсолютные величины. Именно так поступают при использовании дансилхлорида или флуорескамина в количественной хроматографии [13, 41, 42]. Количественное определение белков и аминокислот по интенсивности люминесценции связанных с ними флуорохромов в настоящее время применяется и в биохимии, и в медицине, и в сельском хозяйстве [43]. [c.295]

В практике лабораторно-клинических исследований HNOg применяется для количественного определения белка в моче и других жидкостях. [c.153]

Количественное определение белков. Для колич. онределения Б. устанавливают общее содержание азота по методу Кьельдаля (см. Ааота определение). Кроме того, используют колориметрич. методы, основанные на различных цветных реакциях Б., напр, биуретовой, а также реакции Лаури, представляющей сочетание биуретовой реакции и реакции Фолина на ароматич. аминокислоты. Концентрации Б. в р-рах можно установить по поглощению в УФ-области спектра, измерением плотности и показателей преломления р-ров. Количественно аминокислотный состав Б. определяют гидролизом Б. и после- [c.193]

Корзунова Е. П. и Коникрва Г. С. О количественном определении белка в моче при помощи разбавленных минеральных кислот. Тр. Смол,гос. мед. ин-та, 950,3, с. 43—45. [c.282]

Работа 181. Количественное определение белка в моче по методу Робертс-Стольникова [c.256]