Особенности применения ИСЭ в клиническом анализе

Использование таких электродов только начинается. Однако было описано их применение в анализе почв [142], солевых растворов [143] и золей кремниевой кислоты [144]. Эти электроды должны быть особенно применимы, например, к таким аналитическим проблемам, как контроль очистки воды, определение извлечения солей водой в теплообменниках, клинические определения. [c.301]

Важнейшей областью применения электрофореза является анализ биоколлоидов, например анализ смесей белков в клиническом анализе. Белки, как амфотерные полиэлектролиты, обладают собственными зарядами, зависящим от pH среды. Регулируя значение pH, можно в широких пределах менять их подвижность и даже изменить направление движения в процессе электрофореза. Для каждого белка при определенном значении pH общее число положительных зарядов равно общему числу отрицательных зарядов. Эта изоэлектрическая точка, при которой отсутствует движение частиц, является характерной величиной для определенного белка. Растворимость белка в этой точке минимальна. Подбирая соответствующие буферные растворы для установления определенной скорости движения и растворимости веществ, можно приспособить процессы электрофореза для решения разных проблем разделения веществ. Таким образом, электрофорез превосходит метод бумажной хроматографии. Кроме того, при помощи электрофореза, особенно при высоком напряжении, можно проводить разделение неионогенных веществ (например, сахар в виде боратного комплекса) [79]. Методом электрофореза можно также определять изоэлектрические точки амфотерных веществ или заряды коллоидных частиц (по направлению движения). [c.387]

Особенности применения ИСЭ в клинической анализе [c.157]

Кинетические методы анализа находят все большее применение в различных областях, особенно в анализе клинических проб с помощью ферментативных реакций. Эти методы основаны на принципе, что, если определяемые частицы могут реагировать с каким-либо другим веществом, то начальная скорость реакции приблизительно пропорциональна исходной концентрации определяемых частиц. Таким образом, измерение начальной скорости реакции позволяет определять исходные концентрации реагирующего вещества. Этот метод анализа можно проводить очень быстро, поскольку нет необходимости ждать, пока реагирующие вещества достигнут состояния равновесия. Это особенно важно для медленно протекающих реакций. [c.666]

Лабильные белки метят также при помощи реакций с 12 (проводимой в мягких условиях). Не вступивший в реакцию иод чаще всего восстанавливается до иодида, который затем нужно удалить из реакционной массы. Для этой цели часто применяют гель-фильтрацию на сефадексах G-25 и G-50 (см. литературу, приложение II). (Здесь не рассматривается в принципе аналогичное применение радиоактивного иода для анализа функции щитовидной железы этот важный аналитический метод клинической химии обсуждается в гл. V.) Следует помнить, что при работе с радиоактивными анионами могут в значительной степени проявляться ионообменные свойства сефадекса, нарушающие нормальный ситовой эффект. Поэтому особенно важно по возможности работать в разбавленных солевых растворах. [c.144]

Среди опубликованных работ, связанных с применением электрофореза, большинство относится к электрофорезу на бумаге. Этот метод дает, как правило, хорошее разрешение. Аппаратура и все операции очень просты и могут быть выполнены даже сравнительно неопытными работниками. Разделение происходит быстро и одновременно можно исследовать большое количество образцов. Большим удобством является возможность анализа непосредственно на поверхности бумаги путем специфического окрашивания зон, по ферментативной активности, радиоактивности и т. д. Эти особенности делают электрофорез на бумаге незаменимым экспресс-методом в лаборатории и для клинической диагностики. [c.93]

Моноклональные антитела благодаря таким свойствам, как химическая гомогенность, высокая аффинность и доступность в больших количествах, могут весьма эффективно использоваться для иммунодиагностических тестов. Названные особенности моноклональных антител в сочетании с применением ферментативных иммунометрических вариантов тестирования позволяют при проведении клинических анализов с высокой точностью, чувствительностью и надежностью количественно определять тестируемый антиген. При удачном выборе индикаторного фермента процесс анализа может существенно упроститься за счет калибровки по одному положительному стандарту. Помимо повышения эффективности уже существовавших методов анализа с помощью моноклональных антител удается выявить новые антигенные детерминанты, появление которых связано с протеканием раковых и других заболеваний. Таким образом, химическая однородность моноклональных антител открывает перед исследователями практически неограниченные возможности. [c.399]

При написании этой главы делались оговорки относительно применимости микробных сенсоров для многих применений, например клинического анализа, ферментационного контроля и в пишевой промышленности. Хотя такие оговорки не влияют на развитие исследований в некоторых странах, особенно Японии, имеет смысл проанализировать возможные причины такого скептицизма. Если допустить, что выпуск биосенсоров может быть экономически оправдан, что предполагается во всей этой книге, то, очевидно, они должны удовлетворять двум основным требованиям быть работоспособными и безопасными. В настояшее время, может быть, нереалистично ожидать создания на базе микробных биосенсоров аналитических методик, которые, например, удовлетворяли бы стандартам (кстати, довольно жестким) лучших промышленных химико-аналитических лабораторий. Однако литературные данные и результаты работ, проводимых в промышленных лабораториях, свидетельствуют, что поведение сенсоров на основе интактных клеток плохо воспроизводимо, поэтому их трудно оценить адекватно и объективно. Надежды на усовершенствование микробных сенсоров связаны с более глубоким изучением фундаментальных аспектов механизмов их функционирования наряду с использованием новых материалов и конструктивных решений. Серьезной проблемой, вызывающей опасения, является риск загрязнения исследуемых материалов клеточным биокатализатором. Эту проблему можно преодолеть только после уверенной демонстрации безопасности микробных сенсоров, которая будет тем более убедительной, если удастся улучшить их эксплуатационные характеристики в целом. Биотехнологические новшества быстро усваиваются и принимаются, а предубеждение против использования микробов , возможно, вскоре будет проглочено и переварено вместе с порцией мицелиального белка в пирожке из супермаркета [c.254]

Описанные выше кинетические методы нашли широкое применение при определении большого числа иеорганичеосих и органических соединений. Автоматизированные системы особенно важны для аналитического контроля параметров в массовом анализе, включающем как некаталитические, так и каталитические реакции [6.4-2]. В табл. 6.4-1 перечислены некоторые приложения кинетических неферментативньгх методов в различных аналитически важных областях (например, анализ объектов окружающей среды, клиническая химия и фгфмадевтика). [c.355]

I. Кратковременные культуры (4—24 ч). Кратковременное поддержание клеток в суспензии для анализа чувствительности к препаратам возможно для клеток из любого источника. Если клетки получены из биопсийного материала опухоли человека, то тест-система имеет ряд теоретических преимуществ способность к росту не является лимитирующим фактором, поскольку рост в этой системе не требуется разрастание клеток стромы и клональный отбор сведены к минимуму, так что результаты могут быть получены быстро, что особенно важно, если испытание проводится с клиническими целями. Метод получил широкое использование в ФРГ при изучении чувствительности к ряду химиотерапевтических препаратов различных типов опухолей [13, 14]. Модифицированный метод с использованием либо клеток, либо фрагментов тканей был применен Силвестрини с сотрудниками [10] также для различных типов опухолей. В обоих вариантах исследовали включение нуклеотидов, меченных тритием, в ДНК или РНК. Ограничения этого метода заключаются главным образом в короткой продолжительности опыта это исключает возможность длительного воздействия лекарственных средств в течение одного или нескольких клеточных циклов. Следовательно, этим методом нельзя исследовать обратимость действия лекарства и остаточную цитотоксичность, что существенно ограничивает круг исследуемых препаратов. Было показано, что при использовании этой тест-системы получаются ложно-отрицательные результаты действия адриамици-на [14], хотя имелись сообщения об успешном применении системы при анализе действия других лекарств с иными механизмами действия [10]. [c.260]

В Исследовательском институте Syva разработаны два типа гомогенных методов иммуноферментного анализа для высокомолекулярных веществ. Методы первого типа связаны с применением -галактозидазы и макромолекулярного субстрата (Gibbons et al., 1980). Методы второго типа основаны на использовании ферментных каналов (Litman et al., 1980) с участием двух или большего числа ферментов. В этой главе мы рассмотрим принципы, особенности, ход выполнения и клинические приложения методов обоих типов. [c.103]