Гликопротеины периодатное окисление

Последовательность мономеров в пептидных и олигосахаридных цепях. Для определения этой последовательности используются два пути— изучение последовательности мономеров в выделенных после глубокой деструкции фрагментах гликопротеинов и установление строения концевых групп гликопротеина. Нужно при этом иметь в виду, что общие методы, используемые при анализе структуры полисахаридов, — метилирование и периодатное окисление (см. гл. 19) в применении к самому гликопротеину могут дать пока крайне ограниченную информацию. Дело в том, что метилирование гликопротеинов, видимо из-за особенностей их вторичной структуры, с большим трудом проходит до конца и чаще всего [c.573]

Метод периодатного окисления применяется для установления строения олигосахаридов, полисахаридов, гликопротеинов и гликопептидов. Преимуществом этого метода является то, что расщепление гликоль-ных группировок протекает количественно и анализ требует небольшого расхода вещества. [c.82]

Периодатное окисление в сочетании с частичным гидролизом прИ меняется для исследования структур гликопротеинов. Побочными реак циями при взаимодействии с перйодатом являются окисление некото- [c.83]

Экспериментальные условия, применяемые при периодатном окислении, рассматриваются в нескольких обзорах (например, [43—451). Мы остановимся только на специфических вопросах, возникающих при приложении этого метода к гликопротеинам и гликопептидам. [c.245]

Метилирование как метод структурного исследования гетеросахаридов в гликопротеинах, безусловно, имеет большое значение, хотя в этой области В настоящее время его применяют относительно редко. Главные ограничения этого метода состоят в том, что с его помощью нельзя получить сведений о последовательности расположения моносахаридных остатков в углеводных цепях гликопротеинов, а также о конфигурации гликозидных связей. Тем не менее при сочетании метилирования с другими методами структурного исследования, такими, как периодатное окисление и частичный гидролиз, этими ограничениями моншо пренебречь. [c.261]

Углеводный состав продуктов, полученных при периодатном окислении ai-кислого гликопротеина и его производных, выделенных после обработки различными ферментами [c.88]

Если один из сшиваемых белков гликопротеин, то он может быть превращен периодатным окислением углеводной части в диальдегид и сшит с другим или тем же белком без участия дополнительных реагентов. Для сшивания белков могут быть также использованы монофункциональные реагенты — водорастворимые карбодиимиды, реагент Вудворда и т. д., образующие [c.193]

Поскольку многие гликопротеины содержат лишь небольшое количество углеводов, для их анализа могут быть использованы протеолитические ферменты (например, проназы) при обработке этими ферментами образуются гликопептиды с небольшим числом аминокислотных остатков, к которым присоединены интактные углеводные звенья. Такие гликопептнды анализируют [188] классическими методами периодатного окисления [189] и метилирования, а также последовательным ферментативным гидролизом (см. разд. 26.3.2.11) для идентификации моносахаридных звеньев, в результате которого получают единственный аминокислотный остаток, связанный с моносахаридным звеном. Установлено, что осуществляются только два типа такой связи 0-гликозидная связь с серином, треонином, гидроксипролином и гидроксилизином, и Л -гликозидная связь с аспарагином. Показано, что в образовании таких связей могут участвовать только пять моносахаридов -арабиноза, D-ксилоза, D-галактоза, 2-ацетамидо-2-дезокси-0-глюкоза и 2-ацетамидо-2-дезокси-0-галактоза. [c.265]

Трансферрин — гликопротеин, который образует комплексы с железом и служит для перевода железа, содержащегося в тканях (особенно в печени) в резервной форме, в его метаболически активную форму в гемоглобине. Методами периодатного окисления, метилирования и расщепления гликозндазой [207] установлено, что олигосахаридные цепи трансферрина имеют структуру (53). [c.268]

Периодатное окисление иногда применяют для удаления части моносахаридных остатков гликопротеина. Деградация по Смиту (см. стр. 499) широко используется для изучения мелких олигосахаридных и гликопептидных фрагментов, выделенных при частичной деградации гликопротеина. В некоторых случаях для деструкции гликопротеина применялось восстановительное расщепление под действием боргидрида лития. Считали, что выделение при этом соответствующих полиолов — продуктов восстановления концевых моносахаридов доказывает наличие в гликопротеине 0-ацилгликозидных связей . В настоящее время эти данные подвергаются сомнению , хотя аналогичная восстановительная деградация была успешно использована для расщепления ацилгликозидной связи в некоторых растительных гликозидах . [c.573]

ГЖХ ацетатов альдитов представляет собой эффективный и точный метод определения содержания альдоз в биологических материалах. Разделение ацетатов альдитов, начиная с триацетата глицерина и кончая октаацетатами октитов, методом ГЖХ было впервые описано в 1961 г. [1, 2]. Несмотря на то что пригодность метода для количественного анализа была доказана, он не находил широкого применения из-за сложности подготовки колонки кроме того, не удавалось разделить D-глюцит и галактит. В последующие четыре года существенного прогресса не наблюдалось. В 1965 г. была предложена новая жидкая фаза EGNSS-M— сополимер сукцината этиленгликоля и цианоэтил-кремния, — которая оказалась пригодной для разделения всех простых альдитов вплоть до гекситов [3]. С этого времени метод ГЖХ с успехом применяется для определения содержания нейтральных альдоз в гемицеллюлозах древесины [4], полисахаридах клеточных стенок растений [5], гликопротеинах [6—8] и почвенных гидролизатах [9], а также для определения альдоновых кислот в целлюлозе древесины 10], частично метилированных альдоз [11] и продуктов периодатного окисления олигосахаридов [12]. [c.22]

Известен ряд методов определения муравьиной кислоты, образующейся при периодатном окислении. На страницах этой серии сборни-ников рассматривались методы, включающие а) прямое > титрование муравьиной кислоты щелочами [2—4] б) титрование иода, выделяющегося из смеси иодида и иодата [3, 5] в) манометрическое определение углекислого газа, образующегося при разложении бикарбонат-ного буферного раствора [6]. Перечисленные методы не пригодны для определения содержания муравьиной кислоты в интервале О—5 мкмоль в ряде случаев ввиду того, что все эти методы основаны на измерении кислотности среды. На результатах анализа сказывается присутствие любых кислых продуктов и pH раствора, в котором проводится окисление. Кроме того, результат анализа зависит от наличия в биополимере (например, гликопротеине) кислотных групп. Этот фактор устраняют, проводя в тех же условиях холостой опыт биополимер обраба- [c.78]

Реакция с тиобарбитуровой кислотой является в настоящее время наиболее чувствительным методом определения сиаловых кислот. 2 мкг N-ацетилнейраминовой кислоты можно определить с точностью 1%. Из сахаров, найденных в гликопротеинах, только ь-фукоза мешает определению, снижая оптическую плотность, даваемую сиаловой кислотой по методу Уоррена, на 35%. Это ингибирование обусловлено, вероятно, ацетальдегидом, который образуется при периодатном окислении фукозы, так как показано, что он препятствует развитию окраски примерно в той же степени в молярном отношении, что и ь-фукоза. 2-Дезоксирибоза очень сильно мешает определению с тиобарбитуровой кислотой за счет малондиальдегида, образующегося при периодатном окислении 2-дезоксирибозы [280]. Уоррен описал несколько методов введения поправок, учитывающих это влияние [276]. [c.222]

Пример 2. Периодатное окисление простетической группы гликопротеина подчелюстной железы быка [c.249]

Последовательное периодатное окисление (деградация по Смиту, см. [118, 119]) было использовано для изучения -кислого гликопротеипа из плазмы человека. Гликопротеин был предварительно подвергнут мягкому [c.88]

После первого окисления в оставшемся гликопротеине не было обнаружено ни фукозы, ни галактозы (Хьюгс и Джинлоз, неопубликованные данные). Небольшое количество 2-амино-2-дезоксиглюкозы становится диализуемым, что является результатом окисления маннозы. После трех деградаций окисляются все остатки маннозы и остаются только остатки 2-амино-2-дезоксиглюкозы, присоединенные к белковой части. Это несомненно показывает, что 2-амино-2-дезоксиглюкоза является связуюш им звеном между углеводной цепью и белковой частью [96]. Исчезновение почти 20% 2-амино-2-дезоксиглюкозы и более 50% маннозы после периодатного окисления -кислого гликопротеипа, предварительно обработанного нейраминидазой, заставляет предполагать, что некоторые остатки дезокси-глюкозы связаны через гидроксил при С-6 с галактозой, а гликозидной связью они соединены с С-4 маннозы (рис. 4) (Хьюгс и Джинлоз, неопубликованные данные). [c.88]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология