Ферментативные методы определения

Существенный недостаток определения количества крахмала методом кислотного гидролиза заключается в том, что наряду с крахмалом частично расщепляются и гемицеллюлозы, вследствие чего искажаются данные об истинном содержании крахмала. Особенно это наблюдается при анализе растительных продуктов, содержащих много гемицеллюлоз. Чтобы избежать этого, был разработан диастатический (ферментативный) метод определения крахмала. Обработка навески растительного материала в определенных условиях диастазом позволяет отделить крахмал от других углеводов. Диастаз, как и другие ферменты, обладает строгой специфичностью и расщепляет только крахмал, переводя его в растворимое состояние. Растворимые продукты ферментативного расщепления крахмала отфильтровывают, отбирают определенное количество прозрачного фильтрата и проводят гидролиз НС1. В гидролизате определяют глюкозу описанными методами. Весьма существенным недостатком ферментативного метода является длительность определения. [c.165]

Ферментативный метод определения оптической чистоты основан на использовании высокой стереоспецифичности ферментов. Так, например, фермент, окисляющий аминокислоты,— оксидаза аминокислот — обладает высокой стереоспецифичностью -аминокислоты окисляются этим ферментом в 1000 раз быстрее, чем О-аминокислоты. Таким образом, если взять О-аминокислоту, оптическую чистоту которой необходимо проверить, то отсутствие реакции с оксидазой аминокислот укажет на практически полную оптическую чистоту (не менее 99,9%). Если же ферментативное окисление якобы чистой О-аминокислоты идет с заметной скоростью, то это следует считать признаком того, что она содержит примесь -аминокислоты. [c.161]

Известны ферментативные методы определения Ы-и С-концевых остатков. Преимуществом этих методов является возможность осуществления реакции в мягких условиях и использования небольших количеств белков, так как отщепленные аминокислоты можно определять в микроколичествах [c.229]

Почти все ферментативные методы определения стерической однородности применимы только к чистым соединениям, так как лишь в этом случае можно быть уверенным в том, что примеси не ингибируют фермент. [c.402]

Ферментативные методы определения инсектицидов. [c.199]

Высокая каталитическая активность ферментов позволяет осуществлять ферментативную реакцию даже при очень малых концентрациях субстратов, на чем и основаны ферментативные методы определения микроколичеств веществ. Например, перок- [c.83]

Ферментативные методы определения 6-дезоксигексоз [c.119]

В настоящее время в этом направлении получены первые, но очень обнадеживающие результаты. Предложен ферментативный метод определения содержания свободной Ь-фукозы с помощью специфической Ь-фуко-. [c.119]

Разработано большое число высокочувствительных и селективных ферментативных методов определения субстратов и эффекторов ферментов — неорганических (ионов металлов, анионов) и органических (Н-, 8-, Р-, О-содержапщх) соединений. Методы определения эффекторов менее селективны, но часто более чувствительны, чем методы определения субстратов. [c.112]

Как химические, так и ферментативные методы определения последовательности нуклеотидов поочередным отщеплением концевых мономеров полинуклеотидной цепи имеют свои ограничения при химическом методе это связано с неколичественным протеканием процесса и частичным расщеплением псевдоуридина под действием перйодата, при ферментативном — с отдельными разрывами фосфодиэфирных связей в середине полинуклеотидной цепи (за счет примесей других ферментов). Вследствие этого редко удается определить таким образом последовательности более 5—6 остатков нуклеотидов метод, однако, широко применяется для анализа олигонуклеотидов, образующихся при частичном расщеплении цепи РНК. [c.68]

Ферментативный метод определения нитрата основан на специфическом восстановлении NO3 до NO2, катализируемом разла-лагающей нитрат редуктазой, выделенной из Es heri hia oli (щтамм В) [139]. После инкубации раствора в течение 4 ч при 45°С проводят диазотирование и сочетание по реакции Грисса. Метод специфичен, предел обнаружения составляет 0,1 мкг азота (в виде МОз ) в конечном объеме 10 мл. [c.139]

Нами использован ферментативный метод определения глюкозы в мальтозе [1]. Описанный метод аналогичен определению глюкозы в крови. Он имеет ряд преимуществ перед химическим методом благодаря своей высокой специфичности, позволяющей определять глюкоз . в присутствии других сахаров, а также различных редукцирующнх веществ неуглеродной природы. Метод основан на применении глюкозооксидазы. Механизм действия глюкозооксидазы сводится к переносу двух атомов водорода от шестого углеродного атома глюкозы на кислород воздуха, при этом в реакции образуется глюконовая кислота и перекись водорода [c.71]

В заключение отметим, что в этом сборнике приведены различные химические и ферментативные методы определения концевых групп и, следовательно, молекулярного веса РНК. Эти методы основаны на введении радиоактивной метки в один из концов цепи РНК, что позволяет легко отличить интактпые цепи РНК от агрегированных, а линейные формы от кольцевых. [c.265]

Определение образующейся нри окислении муравьиной кислоты более важно, чем определение формальдегида. В общем случае при окислении незабуференными растворами перйодата количество муравьиной кислоты можно определить по возрастанию суммарной кислотности раствора. Однако если система содержит большое количество буферных солей, необходимо использовать более специфические методы. В случае, когда компоненты буферной системы нри кислых pH нелетучи, муравьиную кислоту можно отогнать с паром и далее обнаруживать ее с помощью хроматографии. Другой еще более специфичный метод основан на окислении муравьиной кислоты хлорной ртутью при этом образуется углекислый газ и хлористая ртуть, которую можно определить несколькими методами (см. [45]). Во всех этих методах целесообразно предварительно удалять иодат и перйодат. Специфический ферментативный метод определения муравьиной кислоты был предложен Раммлером и Рабиновичем [96]. [c.248]

Весьма подробный обзор по современным методам определения пищевых волокон описан в работе Сельвендран и Дюпонт [30]. Однако ферментативные методы определения пищевых волокон не всегда обладают необходимой воспроизводимостью, зависящей как от активности используемых ферментных препаратов, так и природы продукта [26]. Имеющихся в литературе данных мало и к тому же они довольно противоречивы [27]. Примером могут служить данные межлабо-раторного исследования, проведенного в 32 лабораториях на 13 продуктах с различным содержанием пищевых волокон [31]. Межлабораторный коэффициент вариации в зависимости от природы продз ста и содержания пищевых волокон колебался в пределах 3—101 %. Поэтому в настоящем издании не приведено никаких сведений о содержании пищевых волокон в пищевых продуктах. После разработки достаточно точного и стандартного метода данные по пищевым волокнам будут опубликованы в соответствующих научных журналах. [c.333]

В последние годы были разработаны высокочувствительные ферментативные методы определения пиридок-саль-5 -фосфата (пиридоксальфосфат — основная кофер-ментная форма витамина Вб) при помощи апофермента триптофаназы Е. соИ (Okada е. а., 1970 Haskell, Snell, [c.68]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология