Инсулин метиловый эфир

Тромбин. Превращение фибриногена в фибрин под действием тромбина является примером ограниченного протеолиза, затрагивающего только две или три связи примерно из 3000 связей фибрина и приводящего к образованию двух полипептидов, которые были охарактеризованы [18, 30]. Оба полипептида содержат аргинин. Поскольку тромбин гидролизует синтетические субстраты, например метиловый эфир то-луолсульфонил-/-аргинина [285], был сделан вывод, что в фибриногене происходит расщепление аргинильных связей. Однако лизин в одном из. пептидов может участвовать в образовании разрываемой связи, так как субстратами тромбина являются как этиловый эфир лизина, так и лизилаланиноаая связь в цепи Б окисленного инсулина [95]. Протеолитического действия тромбина на овальбумин и миозин кролика не было обнаружено [18]. [c.213]

Эта реакция была использована для частичной модификации карбоксильных групп в белках [46, 146, 147]. Хоар и Кошланд [146] использовали 1-бензил-3[3-диметиламино-(М)-пропил]-кар-бодиимид в виде /г-толуолсульфоната, Хориниши с сотр. [147] применяли 1 -этил-3[3-морфолино-(4)-пропил]-карбодиимид ЭМП К. В качестве аминного компонента обе группы исследователей использовали метиловый эфир глицина. Степень модификации определяют потенциометрическим титрованием или аминокислотным анализом. При модификации лизоцима в присутствии указанных реагентов конденсация идет соответственно по 8 и 6 карбоксильным группам (из 11). В присутствии реагента, предложенного Хориниши, модификация идет по 1 из 2 карбоксилов бацитрацина и по 3 и 6 карбоксилов инсулина. [c.365]

Со своей стороны Чибнол и Рис [27] изучали восстановление метилового эфира инсулина, используя боргидр1Щ лития — более мягкий восстанавливающий агент. Оценить получаемые по этому способу результаты оказалось возможно лишь позднее, когда исследователи Кэмбриджской школы опубликовали точные аналитические данные о строении инсулина, полученные в результате многолетних исследований. Сейчас очевидно, что определение при помощи боргидрида концевых групп белков с молекулярным весом свыше [c.196]

КИСЛОТ диазометаном. В качестве катализатора для этерифика-. ции этих двух соединений спиртами применяли также сульфу-рилхлорид. Другой метод получения метиловых эфиров Н-ациль-ных производных аспарагина заключается в переэтерификации с метилформиатом в присутствии 96%-ной серной кислоты или -толуолсульфокислоты [2279]. В этих условиях алкоголиз р-амидной группы не происходит. а-Бензиловый эфир ь-аспара-гина можно синтезировать из соответствующего карбобензоксипроизводного обработкой бромистым водородом в ледяной уксусной кислоте [2163, 2217]. Бензиловый эфир карбобензокси-ь-аспарагина в свою очередь получают введением р-амидной группы в а-бензиловый эфир карбобензокси-ь-аспарагиновой кислоты хлорангидридным методом [205], взаимодействием карбобензокси-ь-аспарагина с фенилдиазометаном [2163], а также реакцией серебряной соли карбобензокси-ь-аспарагина с бромистым бензилом [2217]. Можно, кроме того, этерифицировать карбобензокси-ь-аспарагин обработкой -нитробензилхлоридом [2163] в смеси диметилформамида с триэтиламином. п-Нитро-бензиловый эфир ь-аспарагина применяли в синтезе фрагментов инсулина [1192]. [c.271]

При разделении метиловых эфиров N-TФAпpoизвoдныx аминокислот, полученных из гидролизатов инсулина и желатины, было применено программирование температуры [33]. [c.19]

Применение данного метода к белкам можно проиллюстрировать на примере реакции с инсулином. Инсулин (0,96 г) растворяют в смеси водного 60%-ного (по объему) эталона (60 мл) и 1 н. раствора гидроокиси натрия (5,2 мл). Добавляют бикарбонат натрия (0,4 г) и дробными порциями (по 0,05. ч.г) в течение 3 час при комнатной температуре 0,4 мл метоксикарбонилхлорида (метиловый эфир хлор-угольной кислоты). В ходе реакции поддерживают pH равным 9, добавляя по мере надобности 1 н. гидроокись натрия. Для удаления солей смесь диализуют против дистиллированной воды, а затем против 1 н. соляной кислоты, что приводит к осаждению метокси-карбонилинсулина. Осадок отделяют центрифугированием и промывают спиртом и эфиром. [c.177]

В ходе инкубации в течение 24 час при 25° может произойти частичный алкоголиз амидных групп в случае инсулина за счет алкоголиза освобождалось примерно 6,6 о всего амидного азота. Далее остатки серина и треонина в ходе этерификации могут подвергаться N.0-ацильной миграции. Ацильной миграции, по-видимому, не происходит в тех случаях, когда сложные эфиры белка получают при помощи диазометана. Пептиды с высоким молекулярным весом следует обрабатывать подобно белкам. Метиловые эфиры простых пептидов удобно получать путем растворения свободных пептидов в метаноле, насыщенном хлористым водородом, с последующим концентрированием раствора в вакууме при комнатной [c.200]

Изложенный выше метод применим для изучения влияния этерификации на биологическую активность только тех белков, которые не денатурируются кислотой или спиртом. Недавно он был применен для исследования инсулина и лактогенного гормона передней доли гипофиза. В случае лактогенного гормона был сделан вывод [83], согласно которому карбоксильные группы являются существенно важными для проявления его биологической активности. При этом было, однако, установлено, что. этерифика-ция может привести к изменению физической природы молекулы вследствие разрыва водородных или ионных связей или к изменению суммарного заряда. Изучая метиловый эфир инсулина, Мом-мертс и Нейрат [84] нашли, что при измененных соответствующим образом условиях происходит полная этерификация одних только карбоксильных групп указанного гормона и тем самым подтвердили специфичность этой реакции. Уменьшение [c.297]

Наилучшим примером применения ультрацентрифуги для изучения химического изменения белка может служить исследование влияния этерйфикации на молекулярную агрегацию инсулина. Моммертс и- Нейрат [152] получали метиловый эфир инсулина, обрабатывая инсулин метанольным раствором кислоты при 0 или 25° в течение различных промежутков времени. Процесс этерйфикации изучался при помощи ультрацентрифугирования в растворах с рН 3,7 и ионной силой 0,1 и 0,2. В отличие [c.342]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология