Гаптоглобин

В качестве примера эффективной рециркуляционной хроматографии можно привести выделение комплекса гемоглобин — гаптоглобин из фракции сыворотки на сефадексе 0-200 [77] (фиг. 16). В первом цикле элюировали избыток гемоглобина (заштрихован, Л), а в четвертом цикле можно было получить комплекс Б), очищенный от остальных сывороточных [c.82]

Фиг. 16. Выделение фракций гаптоглобина из сыворотки с помощью рециркуляционной хроматографии [77].

Рис. 138. Очистка гаптоглобина из плазмы аф- А финной хроматографией на гемоглобин-сефарозе [Delers et al., 1981] >

Иммуноглобулины, ингибитор трипсина ai (дополнение 7-В), десяток или больше факторов свертывания крови (рис. 6-16) и белки системы комплемента (дополнение 5-Ж) несут защитные функции этот вопрос будет рассмотрен несколько позже. Гормоны, многие из которых являются белками (табл. 16-1), присутствуют в крови в процессе их переноса к органам-мишеням. Функции целого ряда сывороточных белков пока не известны. К ним, в частности, относятся многие гликопротеиды. Концентрация некоторых из них, например гаптоглобина (а также аа-макроглобулина), имеет тенденцию повышаться при самых разнообразных патологических состояниях организма. [c.104]

Комплексы сывороточных белков с другими веществами белковой природы могут быть также выделены с помощью гель-хроматографии, как это было уже показано на примере комплекса гемоглобин — гаптоглобин (фиг. 16) [49]. Еще проще количественно определить емкость гемоглобина (способность гемоглобина к комплексообразованию) на сефадексе G-100 [50]. Фракция макроглобулинов (выделение на сефадексе G-200), очевидно, содержит белок, связывающий трипсин [51, 52]. Активность при этом сохраняется лишь частично [51, 52]. Комплексы антиген — антитело часто выделяли на пористых гелях, а затем после разложения на составные части исследовали более подробно (см. литературу, приложение IX). В предыдущем разделе на примере инсулина были рассмотрены возможности изучения растворимых иммунокомплексов. Иммунологические методы в сочетании с гель-фильтрацией играют важную роль в исследовании строения Y-глобулинов. Среди работ на эту тему (см. литературу, приложение X) имеются блестящие исследования, посвященные восстановительному расщеплению и выделению L- и Н-цепей, их рекомбинации, ограниченному действию папаина и, наконец, иммунологическим свойствам интактного белка и его фрагментов. [c.218]

Изучение механизма взаимодействия между гаптоглобином человека, ковалентно связанным с сефарозой 4В, и гемоглобином человека, а также а- и р-цепями, обработанными л-хлормеркурибен-зоатом, проводилось двумя способами изучалось связывание с помощью хроматографии на колонке и связывание а-цепей в равновесных условиях. а+- и р+-Цепи — это цепи, меченные с помощью п-хлормеркури- [ С] бензойной кислоты. Связывание гемоглобина и а+- и р+-ценей на иммобилизованном гаптоглобине (38 нмоль гаптоглобина на 1 мл сефарозы 4В) показано на рис. [c.371]

Хориальный гонадотропин человека Гаптоглобин [c.351]

Добавление возрастающих количеств гемоглобина приводит к плато насыщения при 1,5 моль гемоглобина на 1 моль гаптоглобина. В этом отношении имеется отличие от стехиометрии насыщенного комплекса гаптоглобина и гемоглобина в растворе, соот- [c.371]

Максимальное число центров связывания, найденное для иммобилизованного гаптоглобина, согласуется с известным значением— четыре центра на 1 молекулу гаптоглобина в растворе. Следовательно, гаптоглобин, присоединенный к агарозе, в целом обладает теми же свойства.ми по связыванию гемоглобина и его а- и 3-цепей, что и в растворе, и вследствие этого пригоден для детального исследования механизма взаимодействия между гаптоглобином и гемоглобином или его субъединицами. [c.374]

Повторяемость структуры в белке может также вызываться неодинаковым перекрестным соединением генов (кроссинговером). Мультипликация генов с последующим их слиянием приводит к генным продуктам с двумя или более идентичными субструктурами [587]. Однако, как показывает нижеследующий пример, к такому же результату могут привести и другие процессы. Случай частичной структурной дупликации обнаружен в редкой аа-цепи гаптоглобина человека [145, 588]. Поскольку аминокислотные последовательности обеих частей идентичны, а также идентичны с большим участком обычной агцепи, эта структурная дупликация должна была произойти совсем недавно. Скорее всего она вызвана хромосомной аберрацией (неэквивалентным кроссинговером) в предшествующей популяции (человека). Если бы это событие произошло намного раньше, так что гомология последовательностей оказалась бы стертой аминокислотными заменами, вставками и делециями, различить дупликацию и последующее слияние генов, с одной стороны, и хромосомную аберрацию — с другой, было бы невозможным. Поэтому все очень давно возникшие случаи структурных повторений обычно относят к дупликациям генов , не пытаясь провести различия между разными механизмами. [c.230]

Гаптоглобин входит в состав глобулиновой фракции. Этот белок обладает способностью соединяться с гемоглобином. Образовавшийся гаптоглобин— гемоглобиновый комплекс может поглощаться системой макрофагов, ири этом предупреждается потеря железа, входящего в состав гемоглобина как ири физиологическом, так и ири патологическом его освобождении из эритроцитов. Методом электрофореза выявлены 3 груииы гаитоглобинов Нр 1—1, Нр 2—1 и Нр 2—2. Установлено, что имеется связь между наследованием типов гаитоглобинов и резус-антителами. [c.577]

После электрофоретического разделения белковые фракции можно фиксировать в поддерживающей среде и выявить с помощью специфического окрашивания. Среди многочисленных методов окрашивания особое значение в клинических исследованиях приобрели способы выявления связанных с белками липидных и углеводных компонентов. Благодаря простоте этих методов анализ липо-протеидов и гликопротеидов стал обычным в повседневной клинической практике. Он приобрел большое значение в диагностике некоторых заболеваний, а это позволило значительно продвинуться в выяснении их патогенеза. Специальные методы окрашивания помогают также обнаружить трансферрин, гаптоглобин, церуло-плазмин и другие компоненты сыворотки. [c.11]

При внутрисосудистом гемолизе гемоглобин из разрушенных эритроцитов поступает непосредственно в кровь, соединяется с гаптоглобином (белок из группы глобулинов) в высокомолекулярный комплекс—гемо-глобин-гаптоглобин, е проходящий через почечный фильтр и не выделяющийся с мочой. Поступая в дальнейшем в печень, этот гемоглобин в ретикуло-эндотели-альной системе проходит тот же путь, что и при внутриклеточном механизме гемолиза. Однако содержание гап-тоглобина в крови невелико и может связать лишь определенное количество гемоглобина (100—135 мг%). В связи с этим при более интенсивном, особенно бурном гемолизе недостаточность механизмов реутилизации гемоглобина и его дериватов приводит к поступлению гемоглобина в мочу, т. е. к гемоглобинурии. [c.226]

Состарившиеся эритроциты фагоцитируются макрофагами в основном в селезенке, а также в костном мозге и печени. Гемоглобин, освобождающийся из эритроцитов в крови, связывается с гаптоглобином (а2-глобулин плазмы крови) и транспортируется в клетки ретикулоэндотелиальной системы (РЭС), главным образом селезенки. [c.417]

По насыщению в равновесных условиях рассчитано связывание а -цепей и отсюда количество функционально активного гаптоглобина, равное 14,8 нмоль на 1 мл колонки (0,39X38 нмоль). Распределение констант ассоцпацпи Ki выражается соотношением Скатчарда [1008] [c.372]

В предположении, что константы ассоциации Ki подчиняются распределению Сипсиана, коэффициент гетерогенности а центров связывания гаптоглобина рассчитывался по уравнению [c.373]

Вычислено, что а = 0,72, а средняя константа аффинности Ка = = 3,6-10 л/моль. Форма графика Скатчарда указывает на гетерогенность связывающих центров иммобилизованного гаптоглобина по связыванию а-цепей. Популяция высокоаффинных центров с аффинной константой /(1 = 5,26-10 л/моль, полученной экстраполяцией, мала, а число связывающих центров с низкой аффинностью с константой /(2 = 6,23-10 л/моль велико. Экстраполяция графика до пересечения с осью г показала, что максимальное число центров связывания п = 4,3, а число высокоаффинных центров равно 1,5. [c.373]

Рис. 11.4. Графики Скатчарда (основной рисунок) и Сипсиана (врезка) связывания [ С] а-цепи гемоглобина на гаптоглобин—сефарозе (см. рис.

С помощью специфического окрашивания на бумаге установлено, что в а- и р-глобулиновых фракциях содержатся линонро-теиды и гликопротеиды с помощью радиоактивно меченных железа, меди и некоторых других металлов установлено, что последние связаны в крови преимущественно с белками этих фракций. Все это указывает на рол а- и -глобулинов как агентов, транспортирующих жиры, углеводы, металлы и т. д. К наиболее исследованным гликопротеидам крови относятся трансферрин — белок, переносящий железо, гаптоглобин — белок, способный специфически связываться с гемоглобином, и целый ряд других, для которых разработаны специальные методы анализа. Большое число исследований посвящено также и липопротеидам. [c.101]

Наконец, в литературе описаны различные наследственные изменения в составе сыворотки крови. Нанример, наблюдалась наследственная аномалия альбумина, когда этот белок делился электрофоретически на две фракции. Но совершенно новая область для исследования наследственных изменений крови открылась, когда были разработаны методы иммуноэлектрофореза и электрофореза в гелях. Как уже говорилось, эти методы позволяют разделять сыворотку на десятки компонентов уже сейчас установлено большое количество генетически детерминированных модификаций трансферринов, гаптоглобинов и некоторых других белков в сыворотке крови человека. Так как изменения проявляются независимо друг от друга, наблюдаемая картина получается очень сложной и практически отличается у каждого отдельного человека. В этой области ведутся сейчас интенсивные исследования. [c.102]

Определение понятия групп крови все время расширяется, и если до 1955 г. это понятие отождествлялось с групповыми антигенами, находящимися в эритроцитах, то с открытием полиморфности гаптоглобина началась эра сывороточных групп. В 1958 г. были открыты лейкоцитарные, а в 1959 г. — тромбоцитарные группы, и, наконец, с 1963 г. началось выявление в эритроцитах человека групп целого ряда ферментов. Еще в 1930 г. К. Ландщтейнер высказал предположение о биохимической индивидуальности человеческой крови, и в настоящее время, по мнению многих ученых, понятие группы крови должно охватывать все генетически наследуемые факторы, выявляемые в крови человека. [c.490]

Второй том монографии Гликопротеины , изданной под редакцией Готтшалка, посвящен физическим, химическим и биологическим свойствам важнейших классов гликопротеинов. В нем подробно охарактеризованы такие вещества, как казеин и яичный альбумин, сывороточные глобулины (фетуин, ai-кислый гликопротеин, трансферрин, гаптоглобин, иммуноглобулины и т. д.), гликопротеины мочи, щитовидной железы, подчелюстных же.пез и многие другие. [c.5]

Полоновский и Джейл [140] установили, что в сыворотке крови присутствует компонент, который специфично связывает гемоглобин. Эти исследования были продолжены Джейлом и др. [141], которые с помощью электрофореза на бумаге нашли, что белок, связывающий гемоглобин, мигрирует как аг-глобулин. Белок, связывающий гемоглобин,— гаптоглобин — был выделен Джейлом и Буссье [142] его молекулярный вес, рассчитанный по данным ультрацентрифугирования, равен 85 ООО [143, 144]. [c.252]

Смитис [145], используя новый метод электрофореза на крахмальном геле, показал, что в сыворотке, способной связывать гемоглобин, содержится не менее трех компонентов. Если для исследования использовать электрофорез на фильтровальной бумаге [146], то компоненты гаптоглобина, наблюдаемые при электрофорезе на крахмальном геле, мигрируют в виде одной полосы в области г-глобулина, как это сообщалось в работе Джейла и др. [141]. Сейчас установлено, что присутствующие в сыворотке компоненты гаптоглобина определяются генетически [145, 147—149], причем можно различить всего шесть типов гаптоглобина [150, 151]. [c.252]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология