Азиды, реакции с белками

Реакционную смесь ТД и белка инкубируют в боратном буфере при pH 8,8 0,2 и разделяют на две части. Одну часть доводят до pH 8,0 с помощью 0,7 М боратного буфера (pH 6,8) и фотометрируют при 480 и 570 нм вторую доводят до pH 10,0 (также 0,7 М боратным буфером, но с pH 10,8) и фотометрируют при 480 нм. Реакцию прекращают добавлением азида натрия. В сухом состоянии ТЦ является сильно взрывчатым веществом, при работе с ним необходимо соблюдать известную осторожность. Неиспользованные растворы ТД должны сливаться сразу после проведения эксперимента. При равных концентрациях бис-His, моно-Туг и бис-Туг ошибки вследствие отклонения pH 0,1 при фотометрировании составляют соответственно 7%, 18% и 2%. [c.359]

Оптическая активность. Работами школы Э. Фишера, Каррера и Левина (1907—1930) путем соответствующих превращений, не затрагивающих асимметрический центр, было показано, что все аминокислоты в белках имеют одинаковую -конфигурацию при а-уг-леродном атоме. Интересно отметить, что один из двух подходов к установлению стереохимического соотношения между аминокислотами и соответствующими сахарами включает умышленное проведение реакции по асимметрическому центру. Хьюз и Инголд (1937) показали, что реакция 5 2 неизбежно сопровождается вальденовским обращением и что взаимодействие галоидпроизводных с азидом натрия может быть проведено так, чтобы исключить бимолекулярное замещение. Этим методом авторы превратили Д-молочную кислоту в вещество, оказавшееся неприродным аланином отсюда природному аланину была приписана -конфигурация [c.637]

Ингибиторы специфические влияют не на белковую структуру вообще, а вступают в реакцию с той группой белка, которая участвует в каталитическом эффекте. Так, если в этой группе имеется ион металла, то СО, КСМ или азиды в очень небольших концентрациях могут тормозить действие подобных ферментов. [c.49]

Частицы золота прочно конъюгированные с вторичными антителами, белком А или белком О, связываются в комплексы антитело антиген и фиксируют розовое окрашивание золотых частиц на поверхности мембраны. Использование системы коллоидного золота позволяет избежать многих проблем, связанных с использованием окрашивающих субстратов, в том числе нестабильности результатов окрашивания в результате не специфических реакций и необходимости отказа от консервации сывороток азидом натрия. [c.69]

Перенос электронов по дыхательной цепи митохондрий завершает цитохромоксидаза (цитохром сЮг-оксидоредуктаза, комплекс IV), катализирующая реакцию восстановления молекулярного кислорода до воды. Донором электронов для фермента служит ферроцитохром с. Реакция специфически блокируется цианид- и азид-ионами, а также окисью углерода. Цитохромоксидаза прочно связана с внутренней мембраной митохондрий и является интегральным мембранным белком в раствор фермент может быть высвобожден лишь после растворения мембраны высокими концентрациями детергентов. В нативной мембране, а также в растворах неионных детергентов (тритон Х-100, твин-80, Emasol-1130) цитохромоксидаза присутствует в виде высокоактивного димера. Некоторые воздействия (рН>8,5, высокие концентрации солей и неионных детергентов) вызывают появление мономерных форм фермента. Каталитическая активность цитохромоксидазы зависит от степени агрегации молекулы фермента. [c.432]

Основная область научных исследований — химия белка. Разработал (1920—1930) методы получения пептидов, в частности ами-нолизом азлактонов аминокислотами или их эфирами (реакция Бергманна). Открыл (1926) реакцию циклизации К-галогенацил-аминокислот с одновременным де-галогенированием при нагревании с уксусным ангидридом в пиридине с образованием азлакюнов (реакция Бергманна). Установил (1928) способность натрия и лития присоединяться к многоядерным ароматическим углеводородам. Совместно с Л. Зервасом предложил (1932—1936) способы получения исходных производных аминокислот, в частности способ создания К-карбоксипроизводных. Провел цикл исследований, посвященных протеолитическим ферментам и положенных в основу современной классификации последних. Открыл (1934) реакцию определения С-концевой аминокислоты в пептидах через соответствующие альдегиды, полученные превращением пептида в азид, затем в карбобенз-оксипроизводное с последующими гидрированием и гидролизом (карбобензокси-метод, или реакция Бергманна). Издал труды Э. Г. Фи- [c.50]

При реакции эфира гиппуровой кислоты с глицином Курциус получил второе соединение, названное им у-кислотой. Это соединение давало положительную биуретовую реакцию, но окраска при этом получалась несколько иная, чем при про бе с нативными белками. В 1883 г. Курциус, исследуя общие реакции алифатических аминокислот 135] и синтезируя гиппуровую кислоту [136], высказал убеждение, что из серебряной соли глицина, кроме гиппуровой кислоты, можно получить ряд других соединений, причем каждое из них будет отличаться от предыдущего одним лишним остатком глицина и меньшим содержанием воды на одну молекулу. Кажется, как мало было нужно, чтобы от этого предположения сделать шаг в сторону открытия полипептидов. Но именно это го шага Курциус сделать и не смог. Фишер впоследствии, отдавая должное работам Курциуса, писал, что теоретические представления последнего были совершенно верными, но экспериментальные данные, за исключением тех, о которых только что говорилось, были явно недостаточны для подтверждения тео1рии. Курциус предположил, что существует еще один возможный путь синтеза через азиды аминокислот по схеме [c.68]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология