Холинэстераза ингибирование при помощи

Предложен метод расчета промежуточных констант скорости взаимодействия ФОИ с холинэстеразами с помощью ЭЦВМ, позволяющих рассчитывать промен уточные константы скорости ингибирования фермента в отсутствие субстрата. [c.338]

Следует отметить, что уравнение (4.13) выведено для равновесных условий при отсутствии в системе субстрата. Если в реакционную смесь внесен субстрат, то кинетические соотношения становятся гораздо более сложными, поскольку для всех типов ингибирования (за исключением чистого неконкурентного ингибирования) добавление субстрата приводит к смещению равновесия между свободным и связанным ингибиторами. В том случае, когда связывание субстрата происходит очень быстро, единственно возможный подход к выяснению механизма действия ингибитора состоит в отыскании полного решения сложных уравнений, описывающих конкурентное ингибирование в области В. К счастью, по крайней мере для некоторых ингибиторов, обладающих высоким сродством к ферменту, высвобождение ингибитора из комплекса EI происходит настолько медленно, что смещением равновесия Е -Ь I EI под действием субстрата можно пренебречь. Например, Майерсу [117] удалось описать ингибирование псевдо-холинэстеразы мощным конкурентным ингибитором Nu 683 при помощи уравнения (4.13). Таким образом, низкая скорость взаимодействия фермента с ингибитором привела фактически к тому, чтр торможение реакции приобрело характер неконкурентного ингибирования. Рассматривая только случай 50 %-ного ингибирования (а = 0,5), Майерс преобразовал уравнение (4.13) к очень простому виду [c.101]

Гидрофобные взаимодействия, как было показано в работах нашего коллектива [1], играют существенную роль при реакциях фосфорорганических соединений (ФОС) с холинэстеразами. Эти взаимодействия очень четко проявляются в ряду 0,8-диалкилметилтиофосфонатов. Представляет интерес выяснить значение указанных взаимодействий при ингибировании холинэстераз с помощью Фос более сложного строения, например содержащих в Р-положении тиоэфирного остатка какие-либо дипольные группировки. Особенно важным здесь является выявление различий в реакциях ФОС с холинэстеразами разных типов. Это позволило бы решить ряд вопросов, связанных с проблемой избирательной токсичности. [c.338]

Ингибиторы ферментативных каталитических реакций часта подразделяют на обратимо и необратимо действующие. Эта классификация основана на легкости отделения ингибитора от фермента при помощи физического метода типа диализа. Так, например, эзерин описан как обратимый ингибитор, в то время как фюсфор-содержащие соединения подобно диизопропилфосфофториду (ВРР) принадлежат к необратимым ингибиторам холинэстеразы. Однако, поскольку рассматриваются механизмы ингибирования, эта классификация только вносит неопределенность, так как из нее вытекает, что обратимые и необратимые ингибиторы действуют различным образом в действительности оба типа ингибиторов действуют, соединяясь с ферментом с образованием неактивных комплексов, обладающих весьма различными константами диссоциации . Необратимые ингибиторы образуют комплексы с очень малыми константами диссоциации и поэтому удаляются из комплекса путем диализа только очень медленно, тогда как обратимые ингибиторы образуют комплексы с высокими константами диссоциации и поэтому на всех стадиях удаления присутствует избыток несвязанного ингибитора, поддающегося диализу. Однако более полезным оказывается подразделение ингибиторов на конкурентные и неконкурентные (хотя многие ингибиторы обнаруживают смешанное поведение), так как эти ингибиторы действуют различными путями и кинетические уравнения для них разные. При конкурентном торможении ингибитор соединяется с тем же самым [c.121]

Кинетика ингибирования холинэстераз в отсутствие субстрата изучалась с помощью манометрического метода Олдриджа. В качестве источника фермента использовались препараты очищенной холинэстеразы лошадиной сыворотки и препараты стромы эритроцитов крупного рогатого скота. В опытах с холинэстеразой в качестве субстрата применялся бутирилхо-линиодид, в опытах с ацетилхолинэстеразой — ацетилхолиниодид. Во всех случаях концентрация субстрата в реакционной среде была 0,02 М. [c.334]

Лечение отравлений фосфорорганическими соединениями проводится в основном с помощью двух типов противоядий (антидотов) холинолитических средств и реактиваторов холинэстеразы, Действие первых основано на блокировании холинорецепторов постсинаптиче-ской мембраны, благодаря чему создается препятствие для токсического действия на них ацетилхолина, накапливающегося в синапсах под действием этих инсектицидов. Действие вторых сводится к восстановлению активности ингибированной холинэстеразы. Из антидотов первой группы широкое применение получил антропин. В качестве эф ктивного реактиватора холинэстеразы используется дипироксим. Реактивация фермента протекает по схеме [c.148]

При ингибировании с помощью ДФФ некоторых других ферментов, обладающих эстеразной активностью, также наблюдалось образование производных. Бурснелл и Уэбб [142] применили ДФФ, содержащий радиоактивный фосфор (Р32), для изучения инактивирования эстеразы из печени лошади степень чистоты этой эстеразы, согласно электрофоретическим данным, была равна 80%. Полная потеря активности наблюдалась после соединения одного моля ингибитора с 96 000 г эстеразы. Для исследования реакции между ферментом и этим ингибитором Мичел и Кроп [143а] также воспользовались ДФФ, меченным Р32. Они нашли, что меченый фосфор связывается холинэстеразой электрического угря в количествах, пропорциональных степени ингиби- [c.324]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология