Клетка зародышевой линии

Скрещивают животных, которые несут клонированный ген в клетках зародышевой линии, и получают новую генетическую линию. [c.418]

Для идентификации трансгенных животных вьщеляют ДНК из маленького кусочка хвоста и тестируют ее на наличие трансгена с помощью блот-гибридизации по Саузерну методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Чтобы определить, находится ли трансген в клетках зародышевой линии животного, трансгенную мышь скрещивают с другой мышью. Далее можно проводить скрещивание потомков для получения чистых (гомозиготных) трансгенных линий. [c.421]

Генетическая модификация животных при помощи технологии рекомбинантных ДНК (трансгеноза) основана на введении клонированного гена(ов) в геном клетки, которая могла бы дать начало клеткам зародышевой линии. Скрещивая трансгенных потомков, появившихся в результате такой операции, можно получить гомозиготные линии трансгенных животных. Большинство исследований в этой области проводилось на мышах. Обычно для этого вводили клонированный ген в оплодотворенную яйцеклетку мыши с помощью микроинъекции, имплантировали ее в реципиентную самку и проверяли потомство на наличие введенного гена. Чужеродный ген можно вводить в оплодотворенную яйцеклетку мыши и с помощью ретровирусного вектора. Альтернативный подход заключается в выделении мышиных эмбриональных [c.439]

До сих пор мы имели дело с ретровирусами в условиях инфекционного цикла, когда для образования новых копий РНК необходим процесс интеграции. Однако при интеграции вируса в клетку зародышевой линии его эффективная экспрессия прекращается, он способен стать наследственным эндогенным вирусом организма. Такое состояние вируса более всего изучено у мышей и цыплят, чьи геномы несут неактивные эндогенные вирусы. Иногда [c.492]

Рис. 38.14. С помощью трансфекции можно вводить ДНК в клетки зародышевых линий животных.

Путь от антигена к синтезу антитела-индуцируемый процесс. Однако этот феномен может быть объяснен и без ссылки на ламаркизм при помощи клональной селекционной теории, основные положения которой суммированы на рис. 39.2. Рекомбинация V- и С-генов, приводящая к образованию функционального гена, происходит в популяции незрелых В-лимфоцитов. Каждая клетка образует антитело только одной специфичности, что предполагает только одну перестройку в генах легких цепей и одну перестройку в генах тяжелых цепей. Разные клетки продуцируют разные антитела, поскольку при каждом новом акте реконструкции соединяются разные V- и С-гены. При появлении антигена клетка, вырабатывающая антитело, специфичное к данному антигену, стимулируется к делению, возможно, благодаря какому-то сигналу, поступающему с клеточной поверхности, где происходит взаимодействие антитела с антигеном. В результате последующих клеточных делений появляется большое число новых лимфоцитов, секретирующих данное антитело в таких огромных количествах, что оно может стать доминирующим в популяции антител. Следует заметить, что весь этот процесс происходит исключительно в соматических клетках и не затрагивает клетки зародышевой линии таким образом, ответ организма на антиген по наследству не передается. [c.504]

Клетка зародышевой линии [c.505]

Рис. 39.3. в клетках зародышевой линии V- и С-гены семейства лямбда расположены на одной хромосоме в результате их ре- [c.505]

В клетках, не экспрессирующих иммуноглобулины, генные последовательности, детектируемые при помощи V- и С-зондов, фланкированы участками ДНК, которые отличаются от тех, что окружают функционирующий ген. Эти последовательности пространственно разобщают V-и С-гены. И хотя для каждого из семейств - лямбда-, каппа- и Н-цепей-V- и С-гены расположены на одной хромосоме, расстояния, разделяющие их, неизвестны. Гены всех трех семейств иммуноглобулиновых цепей находятся на разных хромосомах. Такой тип организации, при котором V- и С-гены пространственно разобщены, характеризует клетки зародышевой линии (она также обнаружена во всех соматических клетках организма, не относящихся к иммунной системе). [c.505]

Природное разнообразие иммуноглобулиновых генов в клетках зародышевой линии [c.506]

Для того чтобы оценить, какой вклад в вариабельность антител вносит исходное разнообразие кодирующих областей, имеющееся в клетках зародышевой линии. [c.506]

Прямое определение числа У -генов в клетках зародышевой линии затруднено из-за различной степени их дивергенции. Дело в том, что индивидуальной пробой можно тестировать несколько генов если же один из этих генов используется в качестве новой пробы, то он может взаимодействовать с рядом других генов и т. д. В данном случае налицо классический пример генного семейства. [c.507]

Рис. 1.16. Образование гамет у дрозофилы. Клетки зародышевой линии размножаются посредством митозов, а затем претерпевают мейоз и превращаются в ооциты (у самок) и в сперматоциты (у самцов). У самок лишь одна из четырех образующихся при мейозе

В геномах присутствуют различные типы транспозонов. Все вместе они составляют более 10% генома (и у дрозофилы, и у позвоночных). Время от времени в клетках зародышевой линии происходят транспозиционные взрывы , приводящие ко многим наследуемым изменениям в экспрессии генов у одной и той же особи. Полагают, что транспозоны играют особую роль в эволюции, влияя на разнообразие организмов. [c.248]

Следует отметить, что клетки кишечника образуют только один клон (как и клетки зародышевой линии), тогда как в большинстве других тканей [c.89]

В эмбрионы млекопитающих можно ввести чужеродные гены. Так, фрагменты ДНК, содержащие ген гормона роста, инъецируют в пронуклеусы оплодотворенных яйцеклеток мышей, а затем эти яйца вводят в половые пути других самок. Развивающиеся из этих яиц мыши значительно крупнее контрольных, а имеющаяся у них чужеродная ДНК обычно передается через клетки зародышевой линии. [c.276]

В результате среда не может оказывать непосредственное влияние иа эволюцию и уж менее всего —направлять ее, поскольку она неспособна воздействовать на клетки зародышевой линии ни непосредственно, ни через сому. Неодарвинизм рассматривает среду главным образом как ловушку, которая обусловливает дифференциальную смертность, или точнее, как мусорный бак, в который сбрасываются организмы, получившие не те мутации. [c.301]

У растений нет разделения между клетками зародышевой линии и сомой [c.301]

Физиологическое воздействие плазмы на клетки зародышевой линии и регуляция этого воздействия со стороны внешней среды [c.302]

Четко установлено, что гормоны, вырабатываемые клетками сомы, взаимодействуют с клетками зародышевой линии и направляют происходящие в них процессы. [c.302]

У женщины гонадотропные гормоны гипофиза (ЛГ и ФСГ) регулируют овуляцию и менструальный цикл. Таким образом, сома оказывает физиологическое воздействие на клетки зародышевой линии при помощи постоянной системы химических [c.302]

Цепь событий начинается с увеличения количества солнечного света, что стимулирует секрецию гормона сомой, а гормон в свою очередь воздействует на клетки зародышевой линии. Воздействие внешней среды осуществляется по разным каналам через органы зрения (количество света) и слуха ( количество и качество песни). Кроме того, в основе канализации размножения лежит чисто физико-химический процесс. [c.303]

Условия, благоприятствующие индукции сомой генетических изменений в клетках зародышевой линии [c.303]

Клетки, выделенные из мышиных эмбрионов на стадии бластоцисты, могут пролиферировать в культуре, сохраняя способность к дифференци-ровке в любые типы клеток, в том числе и в клетки зародышевой линии, при введении в другой эмбрион на стадии бластоцисты. Такие клетки называются плюрипотентными эмбриональными стволовыми клетками (Е5). Е8-клет-ки в культуре легко модифицировать методами генной инженерии без нарушения их плюрипо-тентности. Например, в определенный сайт несущественного гена в их геноме можно встроить функциональный трансген. Затем можно отобрать измененные клетки, культивировать их и использовать для получения трансгенных животных (рис. 19.4). Это позволяет избежать случайного встраивания, характерного для метода микроинъекций и ретровирусных векторных систем. [c.422]

Рис. 19.4. Получение трансгенных мышей с помощью генетической модификации эмбриональных стволовых (Е8) клеток. Е8-клетки получают из внутренней клеточной массы бластоцисты мыши. Их трансфицируют вектором, несушим трансген, культивируют и идентифицируют трансфицированные клетки методом позитивно-негативной селекции или ПЦР. Популяцию трансфицированных клеток вновь культивируют и вводят в бластоцисты, которые затем имплантируют в матку суррогатных матерей. Скрещивая животных-ос-нователей, несущих трансген в клетках зародышевой линии, можно получить линии трансгенных мышей.

Рис. 19.14. Получение трансгенных цыплят трансфекцией изолированных клеток бластодермы. Выделенные клетки трансфицируют трансгеном с помощью липосом и вводят в подзародышевую область облученной бластодермы реципиента. Часть полученных потомков являются химерами, а некоторые из них, несущие трансген в клетках зародышевой линии, при скрещивании могут дать начало трансгенным линиям.

Никаких специфичных для птиц ES-клеток не обнаружено, поэтому подход, основанный на их использовании, для птиц неприменим. Более перспективным представляется метод с использованием рекомбинантных эмбриональных клеток. Он состоит в следующем. Выделяют клетки бластодермы из куриного эмбриона, трансфицируют их с помощью катионных липидов (липосом), связанных с трансгенной ДНК (липосомная трансфекция), и повторно вводят в подзародыше-вую область свежеотложенных яиц (рис. 19.14). Часть потомков будет нести в каком-то небольшом количестве клетки донора таких животных называют химерами. У некоторых химер клетки, произошедшие от трансфицированных клеток, могут образовывать линии зародышевых клеток, и после нескольких раундов скрещиваний таких химер можно получить линии трансгенных животных. Чтобы увеличить вероятность создания химер, несущих чужеродные гены в клетках зародышевой линии, число донорских клеток в химерах можно увеличить облучением эмбрионов реципиента перед введением в них трансфицированных клеток (540-660 рад в течение 1 ч). Под действием облучения некоторые (но не все) клетки бластодермы погибнут, и соотношение между трансфицированными клетками и клетками реципиента увеличится в пользу первых. По-видимому, таким образом можно получать трансгенных цыплят, хотя и с малой эффективностью. [c.438]

Эмбриональные стволовые клетки, ES-клетки (Embryoni stem ells) Клетки из эмбрионов на стадии бластоцисты, способные к дифференцировке в любые типы клеток, в том числе и в клетки зародышевой линии, при введении в другой эмбрион на стадии бластоцисты. [c.565]

Рис. 39.4. В клетках зародышевой линии С-ген каппа-типа располагается за кластером из нескольких фрагментов в лимфоци-

К сожалению, далеко не все известно об организации этих генов в клетках зародышевой линии. Считается, что У -гены занимают огромный участок хромосомы, находящийся на неизвестном расстоянии от 5 -конца гена константной области. При этом не удивительно, если несколько близкородственных генов организованы в субкластеры, образовавшиеся в результате дупликации и дивергенции генов-предшественников. [c.507]

Анализ 19 различных клеточных линий, синтезирующих антитела, связывающие гаптенфосфорилхолин, показал, что 10 из них имеют одну и ту же Vh-последовательность (экспрессируемую в сочетании с л-, у- или а-константными областями). В клетках зародышевой линии эта Vh-последовательность идентифицируется как Т15 и является одной из четырех Vh-генов, гибридизующихся с анализируемой Vh-пробой. Другие девять функционирующих генов отличаются друг от друга и от всех четырех членов семейства, тестируемых в эмбриональных клетках. Тем не менее они в большей степени родственны последовательности Т15, чем каким-либо другим, и фланкированы теми же последовательностями, что и Т15. Все это позволяет предполагать, что указанные девять генов имеют общего предка-члена семейства Т15 и произошли от него путем соматических мутаций. [c.515]

Судить о надежности сохранения нуклеотидных последовательностей ДНК у высших эукариот можно, исходя из скорости изменения аминокислотных послеОовательностей второстепенных белков и нуклеотиОных послеОовательностей ДНК на протяжении эволюционного времени. Эта надежность столь велика, что за год в геноме млекопитающего, насчитывающем 3 10 пар оснований, в среднем происходит всего лишь 10-20 замен оснований, затрагивающих клетки зародышевой линии. В то же время в геноме такого размера из-за неизбежных процессов химического распада ежедневно повреждаются тысячи нуклеотидов ДНК. Генетическая информация может надежно храниться в нуклеотидных последовательностях ДНК лишь потому, что широкий набор различных репарирующих ферментов осуществляет непрерывный осмотр ДНК и удаляет из нее поврежденные нуклеотиды. [c.286]

Из этого правила известно несколько исключений. Например, у некоторых беспозвоночных в соматических (не половых) клетках часть хромосом, представленных в клетках зародышевой линии (предшественниках гамет), утрачивается уже на рагших стадиях развития. В ооцитах некоторых других животных (в том числе и у Xenopus laevis) происходит избирательная репликация генов рибосомной РНК, а у личинок не- [c.72]

Известно, что в соматических клетках иногда возникают случайные мутации. Полезные мутации, т. е. мутации, благоприятные для несущей их клетки, могут распространиться, так как они дают возможность своим носителям делиться быстрее, чем другие клетки это в особенности относится к клеткам, участвующим в борьбе с инфекцией. Чем больше они преуспевают, тем более многочисленными они могут оказаться. Таким образом, мутантный ген размножается, а при этом повышаются его шансы на то, что он будет захвачен вирусами и перенесен в другие клетки, возможно в том числе и в клетки зародышевой линии. По-видимому, у любого индивидуума существует период отбора соматических мутаций, предшествующий прохождению мутаций сквозь фильтр дарвиновского естественного отбора. Стеель считает, что этот процесс должен ускорять эволюцию и позволяет легче объяснить эволюцию таких сложных и координированных органов, как глаз. [c.39]

Некоторые интересные генетические перестройки происходят в клетках млекопитающих в ходе нормального развития и дифференцировки. Например, в клетках зародышевой линии мыши гены и С , кодирующие единичную цепь молекулы иммуноглобулина (см. гл. 41), разнесены в геноме на значительное расстояние. В ДНК зрелых иммуноглобулин-продуцирующих (плазматических) клеток эти же гены оказываются на более близком расстоянии и транскрибируются в составе единого первичного транскрипта. Однако и после перестройки ДНК в ходе дифференцировки последовательности этих генов непосредственно не смыкаются. Между ними располагается промежуточная некодирующая последовательность (интрон) длиной около 1200 пар оснований, которая удаляется из первичного транскрипта при процессинге в ходе созревания мРНК (см. гл. 39 и 41). [c.73]

Эволюция без отбора Автоэволюция формы и функции (1981) -- [ c.276 , c.300 , c.301 , c.302 , c.304 , c.305 , c.308 , c.358 , c.373 ]

Эволюция без отбора (1981) -- [ c.276 , c.300 , c.301 , c.302 , c.304 , c.305 , c.308 , c.358 , c.373 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология